Bu yöntem pT3 mide kanserinde tümör hücresinin elastik laminanın ötesinde inisiyyenin olup olmadığını belirlemeye yardımcı olur. pT3 mide kanseri için prognostik resimde elastik lamina erozyonu. Bu tekniğin en büyük avantajı, elastik lamina tanımlamak için uygun ve doğru bir yaklaşım, hangi tümör hücrelerinin pT3 mide kanserinde elastik lamina ötesinde işgal olup olmadığını değerlendirmek için patolog için daha kesin hale getirir.
Bu teknik akciğer kanseri ve kanser patolojik bir test aşaması tanısı doğru olabilir. Bu yöntem akciğer kanseri ve kolo-rektum kanseri TNM evre sistemine de uygulanabilir. İlk olarak, 10 dakika boyunca bir Coplin kavanozda ksilene slaytlar batırın.
Bu kavanozdan slaytlar çıkarın ve başka bir 10 dakika için farklı bir Coplin kavanozda taze ksilene batırın. Beş dakika boyunca% 100 etanol slaytlar batırın ve daha sonra başka bir beş dakika için taze% 100 etanol aktarın. Daha sonra, iki dakika boyunca% 95 etanol slaytlar batırın.
Slaytları iki dakika boyunca %70 etanol içeren bir kavanoza aktarın. Bundan sonra, yeni bir Coplin kavanozda distile su ile kısa bir süre slaytlar durulayın. İlk olarak, slayt veya doku çevresinde herhangi bir fazla çözelti silmek için doku kağıt kullanın.
Slaytları oda sıcaklığı ve neme uyan koşullarda yerleştirin. Eklenen hacmi her slayt doku bölümünü kapsayacak şekilde yeterli olduğundan emin olmak, onları okside etmek için her slayt için potasyum permanganat birkaç damla ekleyin. Beş dakika sonra, Coplin kavanozlarda distile su ile oksitlenmiş slaytlar durulayın, durulama 2-3 kez tekrarlayın ve her durulama için su yeni bir kavanoz kullanarak.
Doku gözlemlenebilir kahverengi bir renge sahip olmalıdır. Şimdi, onları ağartmak için her slayt için oksalik asit birkaç damla ekleyin, eklenen hacmi her slayt doku bölümünü kapsayacak şekilde yeterli olduğundan emin olun. Beş dakika sonra, damıtılmış su ile ağartılmış slaytlar durulayın, durulama 2-3 kez tekrarlayın ve her durulama için su yeni bir kavanoz kullanarak.
Slaytları kısaca %95 alkolle yıkayın. Yıkanmış slaytları 8 ila 24 saat elastin çözeltisine batırın. Sonra iyi her doku bölümü ayırt etmek için bir ila iki dakika boyunca% 95 etanol doğrudan slaytlar batırın.
Slaytları distile suyla tamamen durulayın. Mavi-siyah elastik lifler boyama ve gri arka plan için mikroskopik kontrol edin. Bir van Gieson çözeltisindeki slaytları bir dakika boyunca lekele, kullanılan hacmin her slayttaki doku bölümünü tamamen kaplamak için yeterli olduğundan emin olun.
Sonra, hızla iyi her doku bölümü ayırt etmek için birkaç saniye için doku dilimleri üzerine% 95 etanol bırakın. Başlamak için, hızlı bir şekilde susuz kalmak için beş dakika boyunca% 95 alkol slaytlar batırın. Dehidratasyondevam etmek için beş dakika boyunca% 100 alkol slaytlar aktarın.
Daha sonra, beş ek dakika için taze% 100 alkol slaytlar aktarın. Üç dakika süren her daldırma ile ksilenin iki farklı değişiklik slaytlar batırın. Bundan sonra, slayta bir damla rezorsöz montaj ortamı ekleyin ve üzerine bir kapak fişi yerleştirin.
Bir mikroskop kullanarak, metin protokolünde belirtildiği gibi doku bölümlerini gözlemleyin. Bu çalışmada subserosal elastik laminayı görsel olarak tanımlamak için elastik boyama kullanılmıştır. Bir temsilci başarılı boyama elastin çözeltisi boyama sonra ortaya koymaktadır, ama van Gieson's counterstaining önce, elastik lamina açıkça mavi-siyah lekeli filamentler şeklinde görülebilir.
Onlar serosal mezotelyal hücrelere yakın, ve mesafe belirli bir miktar hala elastik lamina ve tümör hücreleri arasında görülür. Van Gieson'ın karşı lekesi ile tipik elastik lekeler elastik laminanın mavi-siyah lekeli olduğunu göstermektedir. Kollajen lifleri kırmızı lekeli, ve kas lifleri ve kanser hücreleri sarı lekeli.
Elastik lamina nüfuz Kanser hücreleri elastik lamina invazyonu olarak kabul edilir. Kanser hücrelerinin elastik laminaya yakın olmasına rağmen istila etmemeleri ise elastik lamina non-invazyon olarak kabul edilir. Eğer boyama elastik lamina birden fazla tabaka gösteren tekrarlayan bir yapı ortaya çıkarır, ve tümör en dış tabaka ötesinde işgal etmezse, örnek elastik lamina non-invazyon olarak teşhis edilmelidir.
Elastin çözeltisi bir ve boyama süresi göreceli uzun, bu yüzden kapalı bir kapta elastin boyama ile tüm slaytlar batırmak için en iyisidir. Elastin çözeltisi boyama sonra, distile su ile yıkanmalıdır.
