Bir ozmotik pompa ile izoproterenol kronik uygulama yaygın farelerde ileri kalp yetmezliği değişiklikleri özetlemek için kullanılmıştır. Bu yöntem basittir ve LAD ve TAC gibi diğer modellere göre daha az cerrahi uzmanlık gerektirir. Prosedürü gösteren Dr. Vincent Ren, Dr. Yibin Wang'ın laboratuvarından bir araştırma bilim cisi olacak.
Tartma ve her farenin vücut ağırlığı kaydedildikten sonra, her hayvan için uygun miktarı ve izoproterenol konsantrasyonunu hesaplamak ve steril% 0.9 sodyum klorür 120 mikrolitre izoproterenol eritin. Tamamen izoproterenol solubilize etmek için bir dakika boyunca iyice karıştırın, ve tartmak ve bir boş ozmotik pompa ağırlığı kaydetmek, birlikte ve akış moderatör olmadan, fare başına. Ozmotik pompalarla sağlanan 27 kalibrelik, künt uçlu dolum tüpünü takın ve fare başına 120 mikrolitre izoproterenol çözeltisi içeren bir mililitrelik şırınga yükleyin.
Dik pozisyonda bir pompa tutarak, dolum tüpü ucu pompa rezervuar altına yakın oturur kadar üst açılan pompa ile dolum tüpü yerleştirin ve yavaş yavaş izoproterenol çözeltisi pompa açılışı doldurur kadar şırınga piston bastırmak. Pompa yüklendiğinde, dolum tüpünü dikkatlice çıkarın ve fazla çözeltiyi silin. Pompayı kapatmak için akış moderatörüne geri takın ve fazla çözümü silin.
Daha sonra rezervuar hacminin %90'ından fazlasının doldurulduğuna dair pompayı yeniden tartın. Fareyi ısıtılmış bir ped üzerinde supine pozisyonunda yerleştirin ve alt karın havakaldırın. Cerrahi ozmotik pompa implantasyonu için, anestezili bir farede ayak ucutu yanıt eksikliği onaylamak ve hayvanın gözlerine merhem uygulayın.
Maruz kalan cildi uygun bir dezenfektanla temizleyin ve bir santimetrelik orta hat deri kesisini yapın. Altta yatan periton duvarlarından deriyi dikkatlice incelemek için bir çift künt uçlu makas kullanın ve periton duvarlarını altta yatan bağırsaktan uzaklaştırmak için keçeler kullanın. Periton duvarında 0,8 santimetrelik bir delik kesmek için ince makas kullanın ve periton boşluğuna ilk olarak ozmotik pompa akış moderatörucunu yerleştirin.
Pompa yerinde olduğunda, periton duvarındaki deliği kapatmak için kesintili bir şekilde 5-0 emilebilir dikişler kullanın ve cildi kapatmak için 6-0 emilemez dikişler kullanın. Daha sonra fareyi, hayvanı ev kafesine geri döndürmeden önce tam bir tedavi ye kadar izleyerek özel bir kuluçka makinesine yerleştirin. Burada, seçilen ekokardiyografik parametrelere dayalı haftalık değişikliklerin bir özeti ve geliştirmeyi modellemek için beklenen süre sunulmuştur.
Fare suşları arasında farklılıklar gözlenmelerine rağmen, ortalama olarak, diyastole sonunda interventriküler septal duvar kalınlığı ve ilk hafta kesirli kısalma artışı ancak daha sonraki zaman noktaları tarafından azalır. Sonunda diyastole sol ventrikül iç çapı ve üç haftalık bir süre içinde sol ventrikül kitlesi artar. Ayrıca, fare kalpleri izoproterenol altında gözle görülür şekilde daha büyük sol ventrikül oda boyutları göstermek, yanı sıra tuzlu tedavi kontrolleri göre fibrozis daha büyük miktarda.
Postoperatif enfeksiyon ve morbiditeyi en aza indirmek için sağkalım cerrahisi sırasında steril bir cerrahi ortamın korunması çok önemlidir. Başarılı model oluşturma hipertrofi, dilatasyon ve disfonksiyon için seri ekokardiyografi ile in vivo olarak değerlendirilebilir, ayrıca hasat edilen kardiyak dokunun histolojik ve moleküler değerlendirilmesi yoluyla eksvivo. Bu yöntemi kronik beta-adrenerjik stimülasyona bağlı kardiyak remodeling özelliklerini değerlendirmek için 100'den fazla inbred fare suşlarına uyguladık.
Sonuçlar yayınlanır ve kolayca kullanılabilir.
