Bu iki adım cilt kanseri modeli cilt kanseriiltihabı rolü çalışma sağlar ve tümör ilerlemesi ayrı bir süreç olarak çalışma tümör başlatılması sağlar. Bu modelde tümör oluşumu kimyasal indüklenen ve nakavt suşları kullanımı çevresel faktörler veya terapötik adayların etkilerini incelemek için izin verir. Model de kanser bağışıklık sistemi ve anjiyogenez rolünü incelemek için uygundur.
İnsan hastalarda skuamöz hücreli karsinombenzer bir hastalık patolojisi göstermektedir. Bu yöntemin yürütülmesi nispeten kolay olsa da, doğru zamanlama esastır. Ayrıca bir karsinojen olan DMBA'yı kullanırken uygun güvenlik önlemlerinin alınması da önemlidir.
Deneye başlamadan önce, kavga ve deri lezyonları önlemek için ayrı kafeslerde herhangi bir agresif yedi ila dokuz haftalık fareler ev. Deri papilloma indüksiyon için, ilk deneysel hayvanların arka derileri tıraş ve fareler tek tek tartmak. Tıraştan 48 saat sonra, her anestezili farenin tıraş alanına 200 mikrolitre aseton halinde 50 mikrogram DMBA uygulamak için bir pipet kullanın.
Cilt papilloma promosyon için, Yedi gün sonra DMBA uygulama deneyin sonuna kadar haftada iki kez aseton 200 mikrolitre TPA beş mikrogram ile cilt tedavi. Papillomlar ve fotoğraf için hayvanları inceleyin ve her hafta bir harita üzerinde her papilloma boyutunu kaydedin. Çapı bir milimetreden büyük hissedilir bir kitle bir haftadan uzun kalırsa papilloma olarak kabul edilir.
Tümör yanıtı bir platoulaştığında, son TPA uygulamasından 24 saat sonra hayvanlardan uygun numune malzemesini toplayıp immünohistokimyasal analiz için tam kalınlıkta deri parçaları toplayıp toplayıp. Gen ekspresyonu ve protein anailses için papilloma ve non-papilloma deri örneklerinden deri parçaları toplamak için biyopsi yumruğu kullanın ve immünohistokimyasal analiz için papilloma ve non-papilloma deriden parçalar toplamak için bir neşter kullanın. Sonra istediğiniz gibi akış sitometrik analiz için cilt drenaj lenf düğümleri ve dalak bir parça toplamak.
DMBA TPA tümör modelinde papilloma serbest zaman ve deney grupları arasındaki papillom sayısında istatistiksel olarak anlamlı fark gözlenmektedir. Histolojik analizler papillomların yapısını, derinin morfolojisini veya ilgili bağışıklık hücrelerinin infiltrasyonunu incelemek için uygundur. DMBA ve TPA'yı cilde eşit olarak uygulamak ve TPA'yı tutarlı aralıklarla uygulamak esastır.
Ayrıca papillomlar düzenli olarak saymak önemlidir. Tümör oluşumunun sayısını ve zamanını etkileyen mekanizmalar immünohistokimya, akış sitometrisi, kantitatif PCR ve protein analizi gibi farklı yöntemler kullanılarak incelenebilir. Bu konvansiyonel teknik kolayca adapte edilebilir ve farklı genlerin etkilerini incelemek için uygulanabilir, çevresel faktörler, ya da tümör başlatma ve ilerlemesi üzerinde ilgi terapötik.
DMBA kanserojen olduğundan ve aseton hızlı bir şekilde buharlaştığından, tekniği gerçekleştirirken dikkatli olunması gerekir. Uygun bir solunum maskesi ve akış kabini kullanılması tavsiye edilir.
