Sıçan ortopik karaciğer transplantasyonu modeli karaciğer naklinin birçok yönünü incelemek için güçlü bir araçtır. Enfeksiyondaki bağışıklık yanıtından, prosedürün teknik yönlerine kadar. Bu tekniğin başlıca avantajları komplikasyonları azaltabilir, daha iyi comely karaciğer nakli temsil, ve alıcı sağkalım ını artırmak vardır.
Bu modifiye sıçan ortotopik karaciğer nakli protokolü yakından insan karaciğer nakli yönlerini taklit eder ve değişken ve klinik olarak ilgili araştırma modeli olarak hizmet verecek. Umudumuz, görsel gösterim sayesinde izleyicilerin tüm detayları öğrenebiliyor ve bu teknik için gerekli olan mikrocerrahi becerisinde ustalaşmak için öğrenme eğrisini kısaltabilirler. Anestezik 12-14 haftalık bir sıçanın intrahepatik inferior vena kavasına 300 uluslararası ünite heparin sodyum enjekte ettikten sonra, safra kanalı bifurkasyonunun altında beş milimetrelik bir kesi yapın ve safra kanalını ortak safra kanalına yerleştirin.
Stenti bir adet 7-0 ipek ligatür, kesiden bir milimetre yukarıda ve bifurkasyonun 10 milimetre altında bir bağ ile sabitleyin. İki bağ arasındaki safra kanalını kesin ve uygun hepatik arteri ortaya çıkar. Gastroduodenal arteri iki 7-0 ipek ligatürler arasında bölün ve sol gastrik arter, dalak arter ve çölyak gövdeortaya.
Sonra sol gastrik arter kesti, dalak arter, ve arter bağları arasında çölyak gövde. 21,5 gauge iğneile donatılmış 20 mililitrelik şırınga kullanarak portal damarA 20 mililitre lik dört santigrat derecelik Ringer'ın laktat çözeltisini yavaşça enjekte edin. Donör karaciğer hazırlamak için, çölyak gövde bifurkasyon açık kesmek, dalak arter ve daha büyük bir arterkol manşet oluşturmak için sol gastrik arter ve eklemek 1.5 milimetre uzunluğunda 24 gauge arteriyel stent manşet yoluyla donör ortak hepatik arter içine.
Sonra stenti 8-0 ile sabitle. polipropilen ligatür ve Ringer laktat çözeltisi ile stent floş. 12-14 haftalık bir fare alıcısının portal damarını ortaya çıkardıktan sonra, alıcı safra kanalını tiler bifurkasyonun 0,5 santimetre altına bölün ve distal ortak safra kanalına safra kanalı stenti yerleştirin. Sol maruz, orta, ve sağ hepatik arterler ve hepatik arter çatallanma damarları distal kravat.
Bağları üzerinde karaciğere yakın arterler kesin ve süper hepatik inferior vena kava arkasında gazlı bez uzun ince bir parça yerleştirin. İntrahepatik vena kavanın arkasına 3D baskılı intrahepatik vena kava tutucu yerleştirin ve 3B baskılı sapın uçlarını birlikte dikmek için Tenno emilemez monofilament sütür kullanın. Gevşek intrahepatik vena kava ve portal ven arasında 3D baskılı tutucu altında 7-0 ipek ligature kravat ve 3D baskılı kava tutucu altında sağ renal ven hemen üzerinde intrahepatik vena kava kelepçe.
Portal damarı pilorik venin hemen üstünde ve 3D baskılı PV tutucunun altına kelepçeleyin. 27 gauge iğne bağlı üç mililitreşyon şırınga kullanarak, portal ven çatallanma yoluyla 37 santigrat derece Ringer's laktat çözeltisi iki mililitre floş, ve bir Kitzmiller kelepçe ile karaciğer üzerinde süper hepatik vena kava kelepçe. Sonra mümkün olduğunca karaciğeryakın kıskaç altında kesilmiş ve alıcı karaciğer kaldırmak için portal ven ve inter hepatik vena kava hem de 3D baskılı sahipleri üzerinde kesti.
Donör karaciğer nakli için, dikkatli bir üst arnavut kaldırımanomoz oluşturulabilir şekilde alıcının vücut boşluğu içinde donör karaciğer yönlendirmek. Alıcı portal ven içine donör portal ven manşet yerleştirin ve 7-0 ipek kravat sıkın. Süper hepatik vena kavadan atravmatik kelepçeyi çıkarın ve portal ven için mikrovasküler klipsi çıkarın.
Karaciğeri sıcak kanla tekrar perfüzyonla dıktan sonra, donör intrahepatik vena kava manşetini alıcı intrahepatik vena kavaiçine takın ve damarı 7-0 ipek kravatla sabitle. Ardından alıcı klibini çıkarmadan önce donör intrahepatik vena kava klibini çıkarın. Bir arteriyel anastomoz gerçekleştirmek için, stent ötesine uzanan donör çölyak gövde kısmını kesti, ve alıcının uygun hepatik arter kelepçe.
Sonunda kravat ve damar çevreleyen herhangi bir ekstra doku kesin. Ve hem donör hem de alıcı damar uçlarının lümenlerini yıkamak için Ringer'ın laktat çözeltisini kullanın. Kavisli bir iğne kullanarak, donör hepatik arterin sol kısmından 10-0 ethilon sütür yerleştirin, stentdistal orifisin 2.5 milimetre üzerinde, ve stentin sonuna kadar.
Alıcıyı uygun hepatik arteri damarın sol tarafından, arterin sağ tarafına doğru 0.5 milimetre aşağıda niçin transfix. Donör hepatik arterin sağ duvarından bir sonraki sütüye içeriden dışarıya, orijinal dikişle aynı stent orisinden uzak bir mesafede yerleştirin ve alıcıyı düzgün hepatik arteri yukarı ve hepatik arter stentiniçine atmak için 10-0 emilmeyen monofilamentin iki ucunu yukarı çekin. Sonra donör hepatik arter üzerinde kendisi ile 10-0 emilir monofilament kravat.
Hem alıcıyı hem de donör safra kanallarını temizle ve donör safra kanallarını alıcı safra kanalına stent takın. Daha sonra alıcı safra kanalı etrafında yerleştirilen kravat sıkın. Bu temsili deneyde, non hepatik arter anastomoz sıçan ortotopik karaciğer nakli modeli, sırasıyla 21 gün ve 60 gün, 50 ve 37.5% sağkalım oranları gösterdi.
Buna karşılık, optimize karaciğer arter reconnection prosedürü önemli ölçüde uzun vadeli sağkalım arttı. Hepatik arter rebağlantısı olmayan nakledilen hayvanların temsili bir alt kümesinin histolojik analizi, nakil sonrası altıncı ve on üç gün, santral lobüler nekroz lu hipoksik karaciğer hasarı belirtileri ni saptadı. Geniş karaciğer nekrozu bu hayvanlarda alanin immüno transfereler ve aspartat amino transferaz derece yüksek düzeyleri ile ilişkili ydi.
Buna karşılık, hepatik arter rebağlantısı olan nakledilen sıçanlarda karaciğer hasarı belirtisi saptanmadı ve histolojik analizlerde organize acini, lobules, arterler ve safra kanalları ile normal karaciğer parankim yapısı saptandı. Buna ek olarak, non hepatik arter reconnection model sıçanlardan karaciğerhistolojik analizi hipoksik karaciğer hasarı sonrası reaktif değişiklikler ortaya. Pazar safra yolu proliferasyonu dahil, peri portal fibrozis ve inflamasyon, ve bozulmuş karaciğer parankim.
Bu protokol karaciğer transplantasyonunun birçok immünolojik ve cerrahi yönünü incelemek üzere uyarlanabilir ve transplantasyonla ilgili yeni terapötik müdahalelerin test edilmesinde bir model olarak hizmet verebilir.
