A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Method Article
* These authors contributed equally
يمكن ملاحظة التنكس العصبي في كل من العينين والدماغ نتيجة لمرض السكري من خلال الاختبارات السلوكية التي أجريت على القوارض. توفر متاهة Y، وهي مقياس للإدراك المكاني، والاستجابة الحركية البصرية، وهي مقياس للوظيفة البصرية، نظرة ثاقبة على التشخيصات والعلاجات المحتملة.
الاستجابة الحركية البصرية ومتاهة Y هي اختبارات سلوكية مفيدة لتقييم الوظيفة البصرية والمعرفية ، على التوالي. تعد الاستجابة الحركية البصرية أداة قيمة لتتبع التغيرات في عتبات التردد المكاني (SF) وحساسية التباين (CS) بمرور الوقت في عدد من نماذج أمراض الشبكية، بما في ذلك اعتلال الشبكية السكري. وبالمثل ، يمكن استخدام متاهة Y لمراقبة الإدراك المكاني (كما يقاس بالتناوب التلقائي) والسلوك الاستكشافي (كما يقاس بعدد من الإدخالات) في عدد من نماذج الأمراض التي تؤثر على الجهاز العصبي المركزي. تشمل مزايا الاستجابة الحركية البصرية ومتاهة Y الحساسية وسرعة الاختبار واستخدام الاستجابات الفطرية (ليست هناك حاجة إلى التدريب) ، والقدرة على القيام بها على الحيوانات المستيقظة (غير المخدرة). هنا ، يتم وصف البروتوكولات لكل من الاستجابة الحركية البصرية ومتاهة Y وأمثلة على استخدامها الموضحة في نماذج من مرض السكري من النوع الأول والنوع الثاني. وتشمل الأساليب إعداد القوارض والمعدات ، وأداء الاستجابة الحركية البصرية ومتاهة Y ، وتحليل بيانات ما بعد الاختبار.
يعيش أكثر من 463 مليون شخص مصاب بمرض السكري، مما يجعله واحدا من أكبر أوبئة الأمراض العالمية1. أحد المضاعفات الخطيرة التي تنشأ عن مرض السكري هو اعتلال الشبكية السكري (DR) ، وهو سبب رئيسي للعمى للبالغين الأمريكيين في سن العمل2. في السنوات ال 30 المقبلة، من المتوقع أن تتضاعف النسبة المئوية للسكان المعرضين لخطر الإصابة بالحد من مخاطر الكوارث، لذلك من الأهمية بمكان إيجاد طرق جديدة لتشخيص الحد من مخاطر الكوارث في مراحلها المبكرة لمنع تطور الحد من مخاطر الكوارث3 والتخفيف من حدته. يعتقد تقليديا أن DR هو مرض وعائي4,5,6. ومع ذلك ، الآن مع وجود أدلة على خلل وظيفي عصبي وموت الخلايا المبرمج في شبكية العين التي تسبق أمراض الأوعية الدموية ، يتم تعريف DR على أنه يحتوي على مكونات عصبية وأوعية دموية4،5،6،7،8،9. تتمثل إحدى طرق تشخيص DR في فحص التشوهات العصبية في شبكية العين ، وهو نسيج قد يكون أكثر عرضة للإجهاد التأكسدي والإجهاد الأيضي من مرض السكري من الأنسجة العصبية الأخرى10.
يحدث الانخفاض في الوظيفة الإدراكية والحركية أيضا مع مرض السكري وغالبا ما يرتبط بتغيرات الشبكية. يصور الأفراد الأكبر سنا المصابون بداء السكري من النوع الثاني أداء معرفيا أساسيا أسوأ ويظهرون تدهورا معرفيا أكثر تفاقما من المشاركين في التحكم11. بالإضافة إلى ذلك ، تم إنشاء شبكية العين كامتداد للجهاز العصبي المركزي ويمكن أن تظهر الأمراض في شبكية العين12. سريريا، تمت دراسة العلاقة بين شبكية العين والدماغ في سياق مرض الزهايمر وأمراض أخرى ولكن لم يتم استكشافها بشكل شائع مع مرض السكري12،13،14،15،16. يمكن استكشاف التغيرات في الدماغ والشبكية أثناء تطور مرض السكري باستخدام نماذج حيوانية ، بما في ذلك الفئران STZ (نموذج لمرض السكري من النوع الأول حيث يتم استخدام السم أو الستربتوزوتوسين أو STZ ، لإتلاف خلايا بيتا البنكرياسية) وفئران Goto-Kakizaki (نموذج متعدد الجينات لمرض السكري من النوع الثاني حيث تتطور الحيوانات إلى ارتفاع السكر في الدم تلقائيا في حوالي 3 أسابيع من العمر). في هذا البروتوكول ، يتم توفير وصف لمتاهة Y والاستجابة الحركية البصرية لتقييم التغيرات المعرفية والبصرية في القوارض المصابة بالسكري ، على التوالي. تقوم الاستجابة الحركية البصرية (OMR) بتقييم التردد المكاني (على غرار حدة البصر) وحساسية التباين من خلال مراقبة حركات تتبع الرأس الانعكاسية المميزة لقياس العتبات البصرية لكل عين17. يشير التردد المكاني إلى سمك أو صفاء القضبان ، وتشير حساسية التباين إلى مقدار التباين الموجود بين القضبان والخلفية (الشكل 1E). وفي الوقت نفسه ، تختبر متاهة Y الذاكرة المكانية قصيرة المدى والوظيفة الاستكشافية ، التي لوحظت من خلال التناوب التلقائي والدخول من خلال أذرع المتاهة.
يمكن إجراء كلا الاختبارين في الحيوانات المستيقظة وغير المخدرة ولهما ميزة الاستفادة من الاستجابات الفطرية للحيوانات ، مما يعني أنها لا تتطلب التدريب. كلاهما حساس نسبيا ، حيث يمكن استخدامه للكشف عن العجز في وقت مبكر من تطور مرض السكري في القوارض ، وموثوق به ، من حيث أنه ينتج نتائج ترتبط باختبارات بصرية أو شبكية أو سلوكية أخرى. بالإضافة إلى ذلك ، فإن استخدام OMR ومتاهة Y بالاقتران مع اختبارات مثل التصوير الكهربائي للشكليات والتصوير المقطعي للتماسك البصري يمكن أن يوفر معلومات حول متى تتطور التغيرات الشبكية والهيكلية والمعرفية بالنسبة لبعضها البعض في نماذج الأمراض. يمكن أن تكون هذه التحقيقات مفيدة في تحديد التنكس العصبي الذي يحدث بسبب مرض السكري. في نهاية المطاف، يمكن أن يؤدي هذا إلى طرق تشخيصية جديدة تحدد بشكل فعال DR في المراحل المبكرة من التقدم.
يتم وصف أنظمة OMR و Y-maze المستخدمة لتطوير هذا البروتوكول في جدول المواد. تم استخدام البحث السابق حول OMR ، من قبل Prusky et al.18 ، و Y-maze ، بواسطة Maurice et al.19 ، كنقطة انطلاق لتطوير هذا البروتوكول.
تمت الموافقة على جميع الإجراءات من قبل لجنة رعاية واستخدام الحيوانات المؤسسية لشؤون المحاربين القدامى في أتلانتا وتتوافق مع دليل المعاهد الوطنية للصحة لرعاية واستخدام المختبر (منشورات المعاهد الوطنية للصحة ، الطبعة 8th ، تم تحديثها عام 2011).
1. الاستجابة الحركية البصرية (OMR)
2. متاهة Y
يعتبر OMR ناجحا إذا كان من الممكن الحصول على عتبات التردد المكاني وحساسية التباين من القوارض. هنا ، يتضح استخدام OMR لتقييم التردد المكاني في السيطرة الساذجة على الفئران براون النرويج ولونغ إيفانز ، وكلاهما شاب (3-6 أشهر) وعمره (9-12 شهرا). عادة ما تظهر الفئران البنية النرويجية ترددا مكانيا خطيا ?...
يسمح OMR ومتاهة Y بالتقييم غير الغازي للوظيفة البصرية والعجز في الوظائف الإدراكية في القوارض بمرور الوقت. في هذا البروتوكول ، تم إثبات OMR ومتاهة Y لتتبع العجز البصري والمعرفي في نماذج القوارض من مرض السكري.
الخطوات الحاسمة في البروتوكول
ريال عماني
وليس لدى صاحبي البلاغ ما يكشفان عنه.
تم دعم هذا العمل من قبل جوائز التطوير الوظيفي لخدمة إعادة التأهيل وإعادة التأهيل التابعة لوزارة شؤون المحاربين القدامى (CDA-1, RX002111; CDA-2; RX002928) إلى RSA و (CDA-2 ، RX002342) إلى AJF والمعاهد الوطنية للصحة (NIH-NICHD F31 HD097918 إلى DACT و NIH-NIEHS T32 ES012870 إلى DACT) و NEI Core Grant P30EY006360.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
OptoMotry HD | CerebralMechanics Inc. | OMR apparatus & software | |
Timer | Thomas Scientific | 810029AR | |
Y-Maze apparatus | San Diego Instruments | 7001-043 | Available specifically for rats |
An erratum was issued for: Behavioral Assessment of Visual Function via Optomotor Response and Cognitive Function via Y-Maze in Diabetic Rats. The author list was updated.
The author list was updated from:
Kaavya Gudapati*1,2, Anayesha Singh*1,3, Danielle Clarkson-Townsend1,4, Andrew J. Feola1,2, Rachael S. Allen1,2
1Center for Visual and Neurocognitive Rehabilitation, Atlanta VA Medical Center,
2Department of Biomedical Engineering, Georgia Institute of Technology,
3Department of Neuroscience, Emory University,
4Gangarosa Department of Environmental Health, Emory University
* These authors contributed equally
to:
Kaavya Gudapati*1,2, Anayesha Singh*1,3, Danielle Clarkson-Townsend1,4, Stephen Q. Phillips1, Amber Douglass1, Andrew J. Feola1,2, Rachael S. Allen1,2
1Center for Visual and Neurocognitive Rehabilitation, Atlanta VA Medical Center,
2Department of Biomedical Engineering, Georgia Institute of Technology,
3Department of Neuroscience, Emory University,
4Gangarosa Department of Environmental Health, Emory University
* These authors contributed equally
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionThis article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved