JoVE Logo
Authors
Contact Us

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • النتائج
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

تصف هذه الدراسة تقنية لإنشاء نموذج فئران السيليكا مع استنشاق السيليكا من خلال الجسم كله في غرفة الاستنشاق. يمكن للفئران المصابة بالسحار السيليكي عن كثب العملية المرضية لداء السيليكاتس البشري بطريقة سهلة وفعالة من حيث التكلفة مع قابلية جيدة للتكرار.

Abstract

السبب الرئيسي للسحار السيليسي هو استنشاق السيليكا في البيئة المهنية. على الرغم من بعض الاختلافات التشريحية والفسيولوجية ، لا تزال نماذج القوارض أداة أساسية لدراسة السحار السيليسي البشري. بالنسبة للسحار السيليسي ، يجب أن تكون العملية المرضية الكلاسيكية قابلة للتحفيز عن طريق استنشاق جزيئات الكوارتز المتولدة حديثا ، مما يعني على وجه التحديد إحداث مرض مهني بشري. وصفت هذه الدراسة تقنية لإنشاء ومحاكاة عملية التطور الديناميكي المرضي للسحار السيليسي بشكل فعال. علاوة على ذلك ، كانت هذه التقنية قابلة للتكرار بشكل جيد دون إجراء عملية جراحية. تم تصنيع نظام التعرض للاستنشاق والتحقق من صحته واستخدامه في دراسات السموم حول استنشاق الجسيمات القابلة للتنفس. وكانت المكونات الحاسمة على النحو التالي: (1) مولد مسحوق SiO2 الجاف السائب المعدل باستخدام وحدة تحكم في تدفق الهواء؛ (2) مولد مسحوق SiO 2 جاف السائب تم تعديله باستخدام جهاز تحكم في تدفق الهواء؛ (2) مولد مسحوق SiO 2 جاف السائب تم تعديله باستخدام جهاز تحكم في تدفق الهواء. (2) 0.3 م3 غرفة التعرض لاستنشاق الجسم بالكامل تستوعب ما يصل إلى 3 فئران بالغة ؛ (3) نظام مراقبة وتحكم لتنظيم تركيز الأكسجين ودرجة الحرارة والرطوبة والضغط في الوقت الفعلي ؛ و (4) حاجز ونظام التخلص من النفايات لحماية فنيي المختبرات والبيئة. باختصار ، يبلغ البروتوكول الحالي عن الاستنشاق عبر الجسم كله ، وأنشأت غرفة الاستنشاق نموذجا موثوقا ومعقولا وقابلا للتكرار لسيليكوتيك الفئران مع معدل وفيات منخفض وإصابة أقل وحماية أكبر.

Introduction

السحار السيليسي ، الذي يسببه استنشاق السيليكا ، هو أخطر مرض مهني في الصين ، حيث يمثل أكثر من 80٪ من إجمالي عدد تقارير الأمراض المهنية كل عام1. مسببات السحار السيليسي واضحة ، ويمكن الوقاية منها والسيطرة عليها ، ولكن لا توجد طريقة علاج فعالة متاحة2. أثبتت العديد من الأدوية فعاليتها في الدراسات الأساسية ، لكن لها تأثيرات سريرية غير دقيقة 3,4. لذلك ، لا تزال هناك حاجة إلى استكشاف الآليات المرضية والفسيولوجية للسحار.

استخدمت العديد من الدراسات ضخ السيليكا لمرة واحدة في القصبة الهوائية للجرذان أو الفئران للتحقيق في التسبب في السحارالسيليسي 5,6. على الرغم من أنه يمكن الحصول على نماذج سيليكوتيك القوارض هذه في وقت قصير7 ، إلا أن هذه الأساليب لا تزال تواجه تحديات ، مثل صدمة وارتفاع معدل الوفيات. تضمنت بعض الدراسات غرس السيليكا المخزنة في الرئتين للحث على تفاعل رئوي غير محدد ، لكنها لم تذكر العقيدات السيليكية في الفئران8. علاوة على ذلك ، بعيدا عن داء السيليكا الحاد ، أدى التعرض المزمن للسيليكا في البيئات المهنية إلى انخفاض الالتهاب الرئوي بشكل ملحوظ ورفع مستويات العلامات المضادة لموت الخلايا المبرمج ، بدلا من العلامات المؤيدة لموت الخلايا المبرمج ، في الرئتين9. لذلك ، هناك حاجة إلى نموذج حيواني موثوق ومعقول وقابل للتكرار لاستكشاف التسبب في السحار السيليسي بشكل أكبر.

تصف الدراسة الحالية طريقة لمحاكاة عملية المرض للمرضى الذين يعانون من داء السيليكا من خلال استنشاق السيليكا عبر الجسم كله ، والجسيمات التي يتم توصيلها بالهواء في غرفة الاستنشاق ، والتي تتألف من مولد السيليكا الذي يتم توصيله بالهواء ، وغرفة الجسم بالكامل ، ونظام التخلص من النفايات. هذه الطريقة بسيطة وسهلة التشغيل وتحاكي بشكل فعال عملية التطور الديناميكي المرضي للسحار السيليسي. أيضا ، يتم تحديد العديد من الآليات الممكنة والتسبب في السحار السيليسي باستخدام هذه الطريقة10،11،12. ومن المتوقع أن يساعد البروتوكول المقترح في إجراء مزيد من التحقيقات في مجال أبحاث السحار السيليسي ذي الصلة.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

أجريت جميع التجارب على وفقا لدليل المعاهد الوطنية الأمريكية للصحة لرعاية واستخدام المختبر ووافقت عليها لجنة أخلاقيات جامعة شمال الصين للعلوم والتكنولوجيا (رمز البروتوكول LX2019033 و 2019-3-3 من الموافقة). تم استخدام ذكور فئران Wistar ، التي يبلغ عمرها 3 أسابيع ، في هذه الدراسة. تم الاحتفاظ بجميع الفئران في أقفاص ثابتة مع نشارة الخشب. تم الحفاظ على في دورة ضوء / مظلمة لمدة 12 ساعة / 12 ساعة ، وتم تزويدها بالطعام والماء حسب الحاجة. أجريت تجارب المتابعة بعد 1 أسبوع من التغذية التكيفية.

1. إعداد

  1. عند الوصول ، قم بإيواء جميع الفئران في غرفة محددة خالية من مسببات الأمراض (SPF).
  2. قسم الفئران السليمة بشكل عشوائي إلى مجموعتين (ن = 10): الفئران الضابطة التي تستنشق الهواء النقي والجرذان المصابة بالسيليكا التي تستنشق السيليكا.

2. إعداد السيليكا

تنبيه: غبار السيليكا الذي يستنشقه جسم الإنسان يمكن أن يتلف الرئتين. لذلك ، يجب على الأفراد ارتداء وزرة وقفازات طبية وأقنعة واقية (N95) أثناء العمليات.

  1. قم بتأريض جزيئات السيليكا (انظر جدول المواد) بمدافع الهاون من العقيق لمدة 1.5 ساعة قبل كل تعرض. وذلك لأن الكوارتز المكسور حديثا ينتج كميات أكبر من أنواع الأكسجين النشطة مقارنة بالكوارتز13 القديم ، والسيليكا التي يبلغ قطرها 1-5 ميكرومتر هي الأكثر إمراضا.
  2. قم بوزن السيليكا (30 جم) باستخدام ميزان إلكتروني بعد الطحن ، وضعها في وعاء زجاجي ، واخبزها على حرارة 180 درجة مئوية لمدة 6 ساعات في مجفف نفخ هواء كهربائي للتدفئة (انظر جدول المواد) للقضاء على مسببات الأمراض من سطح جزيئات السيليكا.

3. التعرض السيليكا للفئران

  1. قم بتوصيل الحقن وأنظمة المولدات المتاحة تجاريا (انظر جدول المواد) وضع السيليكا (30 جم) في المولد. تحقق مما إذا كان خط أنابيب التوصيل طبيعيا ، وأن سلك الطاقة متصل ، وأن مصدر الطاقة طبيعي.
    1. تحقق من مستوى الماء في برج الرش ومرطب جهاز معالجة غاز النفايات (انظر جدول المواد) يدويا ، وأضف الماء إذا كان غير كاف (لا يصل إلى الخط القياسي).
    2. أضف ماء الصنبور إلى برج الرش لجهاز معالجة غاز النفايات والماء المقطر إلى المرطب (الشكل 1).
  2. قم بتشغيل جهاز تفريغ غاز العادم (انظر جدول المواد) ومفتاح مصدر الهواء لتأكيد ما إذا كان الجزء الداخلي من خزانة التدريع في حالة ضغط سلبي.
    1. تأكد من إغلاق خلط السائل وخلط المسحوق وصمامات التحكم في تدفق الغاز النقي وصمام تصريف مياه الصرف الصحي أسفل غرفة الاستنشاق.
  3. ضع ما مجموعه 10 فئران في غرفة الاستنشاق (انظر جدول المواد) ، وأغلق حجرة الاستنشاق وأبواب الخزانة المغطاة.
  4. اضبط المعلمات التجريبية التالية على لوحة العدادات أو في الكمبيوتر: ضغط الخزانة: -50 إلى -30 باسكال ؛ تركيز الأكسجين: 21٪ ؛ درجة حرارة الخزانة: 26-30 °C ؛ الرطوبة: 30٪ -70٪ ؛ معدل دخول الغبار: 2.0-2.5 مل / دقيقة ؛ وتركيز غبار الخزانة: 60 ± 5 مجم / م3.
    ملاحظة: راقب البيانات التجريبية وحالة المعدات بشكل مستمر أثناء التجربة. دفع إنذار فشل المعدات المعالجة في الوقت المناسب.
    1. تعريض كل للسيليكا بشكل مستمر لمدة 3 ساعات في اليوم ، 5 أيام في الأسبوع ، والسماح للحيوانات في المجموعة الضابطة باستنشاق الهواء النقي.
  5. عند الانتهاء من التجربة ، أغلق صمام التحكم في تدفق الغاز المختلط ، وافتح صمام تدفق الغاز النقي. حقن الغاز النقي باستمرار في غرفة الاستنشاق.
    ملاحظة: في الدراسة الحالية ، تم حقن تدفق الغاز النقي (7.0-7.5 م3 / ساعة) لمدة 20 دقيقة على الأقل حتى تم استبدال الغاز السام في غرفة الاستنشاق بالكامل.
    1. أغلق صمام تدفق الهواء النقي ، وافتح الباب ، وأخرج الفئران ، وأرسلها مرة أخرى إلى الغرفة الخالية من مسببات الأمراض.
  6. قم بإزالة رف الفئران ومكونات الأنبوب الفرعي بالتسلسل وضعها في الحوض للتنظيف. بعد الشطف ، أغلق صمام التنظيف التلقائي وافتح الفتحة.
    1. امسح الجدار الداخلي بقطعة قماش نظيفة ، أو قم بتشغيل الغاز النقي لتجفيف الخزان. أخيرا ، نفذ التطهير. بعد التنظيف والتطهير باستخدام 75٪ من الإيثانول ، أغلق بوابة العادم ، وفي أسرع وقت ممكن ، افتح باب كابينة الاستنشاق قليلا لتبخير الرطوبة ، بحيث يظل الجزء الداخلي من كابينة الاستنشاق جافا.
  7. تحقق من تركيز السيليكا في الخزانة باستخدام جهاز أخذ عينات شامل في الغلاف الجوي باتباع تعليمات الشركة المصنعة (انظر جدول المواد) مرتين في الأسبوع لضمان استقرار تركيز السيليكا أثناء التجربة. معايرة جهاز أخذ العينات في الغلاف الجوي قبل أخذ العينات.
    1. استخدم ميزان تحليلي رقمي أحادي المقلاة لتحديد الجاذبية. كان تركيز السيليكا المحسوب 65 ملغم / م3 (الشكل 1 والجدول 1).
      ملاحظة: قم بوزن ورق الترشيح قبل وبعد امتصاص السيليكا. تم حساب تركيز السيليكا باستخدام الصيغةالتالية 12:
      figure-protocol-4709
      حيث W2 = وزن ورق الترشيح بعد أخذ العينات ، W1 = وزن ورق الترشيح قبل أخذ العينات ، و V = حجم الهواء.

4. اكتساب وتثبيت أنسجة الرئة

  1. القتل الرحيم للفئران عن طريق الحقن داخل الصفاق من بنتوباربيتال (100 مغ/كغ من وزن الجسم) وليدوكائين (4 مغ/كغ من وزن الجسم). تقييم الوفاة بفقدان نبضاتالقلب 14.
  2. في نهاية التجربة ، قم بإصلاح الرئة السفلية اليمنى والكلى والكبد والطحال والعظام بنسبة 4٪ بارافورمالدهيد لمدة 24 ساعة على الأقل ، وقم بتضمينها في البارافين ، ومقطعة إلى 5 أقسام ميكرومتر 7,15.

5. تلطيخ الهيماتوكسيلين ويوزين (H&E)

  1. قم بإزالة البارافين من أقسام البارافين في الزيلول (انظر جدول المواد) مرتين لمدة 10 دقائق لكلمنهما 16 ، وأعد ترطيبها في 100٪ إيثانول ، 95٪ إيثانول ، 90٪ إيثانول ، 80٪ إيثانول ، 70٪ إيثانول ، وماء مقطر لمدة 3 دقائق لكل منهما.
  2. تلطيخ الأقسام بالهيماتوكسيلين (انظر جدول المواد) لمدة 5 دقائق ، ثم اغسل الأقسام بالماء10.
  3. ضع المقاطع في 2٪ كحول هيدروكلوريك ثم في ماء مقطر حتى يتغير اللون إلى اللون الأزرق.
  4. تلطيخ المقاطع مع eosin لمدة 1 دقيقة ، وتجفيفها مع الإيثانول 95 ٪ ، وجعلها شفافة مع الزيلين ، وختمها مع اللثة محايدة ، ومراقبة تحت المجهر الضوئي12.

6. تلطيخ كيميائي مناعي

  1. اغسل أقسام البارافين بالماء بشكل روتيني.
  2. قم بتعريض المستضدات عند ضغط عال (60 كيلو باسكال) ودرجة حرارة عالية (100 درجة مئوية) لمدة 80 ثانية ثم قم بحظرها باستخدام مانع بيروكسيديز داخلي المنشأ (3٪) لمدة 15 دقيقة للقضاء على البيروكسيديزالداخلي 7.
  3. احتضان العينات بأجسام مضادة موجهة ضد CD68 (1: 200 تخفيف - أضف 4 ميكرولتر من CD68 إلى 396 ميكرولتر من مخفف الأجسام المضادة ؛ انظر جدول المواد) عند 4 درجات مئوية طوال الليل.
  4. احتضان العينات بجسم مضاد ثانوي (بوليمر IgG المضاد للفأر المقترن HRP ؛ انظر جدول المواد) عند 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة ، ثم اغسل العينات باستخدام 1x PBS.
  5. تصور التفاعل المناعي مع 3،3-ديامينوبنزيدين (DAB ؛ انظر جدول المواد). بعد تطبيق DAB على الأنسجة ، لاحظ تلطيخ الأنسجة تحت المجهر الضوئي10.
    ملاحظة: يختلف وقت التلوين من بضع ثوان إلى بضع دقائق وفقا لوقت تلطيخ الأنسجة. تم إجهاض عملية التلوين عن طريق وضع الأقسام في الماء. في هذه الدراسة ، يمثل التلوين البني للأنسجة التعبير الإيجابي ل CD68. تم تخفيف جميع الأجسام المضادة في 1x PBS.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

النتائج

باستخدام الطريقة المقترحة ، تم استكشاف بعض الآليات المحتملة والتسبب في السحار السيليسي في الفئران. يظهر الرسم التخطيطي لغرفة الاستنشاق في الشكل 1. تتكون الغرفة من مولد سيليكا يتم توصيله بالهواء ، وغرفة لكامل الجسم ، ونظام للتخلص من النفايات ، كما هو موضح سابقا17

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

باعتبارها السبب الرئيسي للسحار السيليكي ، تلعب السيليكا دورا حاسما في الصب. جزيئات السيليكا التي يستنشقها المرضى الذين يعانون من التهاب الرئة هي جزيئات السيليكا الطازجة والحرة التي تنتجها القطع الميكانيكي. يمكن أن تولد السيليكا أنواع الأكسجين التفاعلية إما مباشرة على أسطح الجسيمات الم?...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

يعلن أصحاب البلاغ عدم وجود تضارب في المصالح.

Acknowledgements

تم تمويل هذا العمل من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (82003406) ، ومؤسسة العلوم الطبيعية في مقاطعة خبي (H2022209073) ، ومشروع العلوم والتكنولوجيا التابع لإدارة التعليم في خبي (ZD2022127).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
Air detector (compressive atmospheric sampler)Qingdao Xuyu Environmental Protection Technology Co. LTD
Anatomical table No specific brand is recommended.
Antibody of CD68Abcamab201340
DABZSGB-BIOZLI-9018
Electric heating air-blowing drierShanghai Yiheng Scientific Instrument Co., LTD
Electronic balanceOHRUS
Embedding machineleica
Exhaust gas discharge device  HOPE Industry and Trade Co. Ltd.
Generator systems HOPE Industry and Trade Co. Ltd.
Gloves (thin laboratory gloves)The secco medical
Hematoxylin and eosinBaSO Diagnostics Inc.BA4025
HOPE MED 8050 exposure control apparatusHOPE Industry and Trade Co. Ltd.
Inhalation chamber HOPE Industry and Trade Co. Ltd.
Injection syringe No specific brand is recommended.
Light microscope olympus
Object slideshitai
PV-6000 (HRP-conjugated goat anti-mouse IgG polymer)Beijing Zhongshan Jinqiao Biotechnology Co. Ltds5631
Silicon dioxideSigma-Aldrich
Slicing machineleicaRM2255
Waste gas treatment deviceHOPE Industry and Trade Co. Ltd.
Wet boxCooperative plastic Products Factory
XylolTianjin Yongda Chemical Reagent Co., LTD

References

  1. Li, J., et al. The burden of pneumoconiosis in China: an analysis from the Global Burden of Disease Study. BMC Public Health. 22 (1), 1114(2019).
  2. The Lancet Respiratory Medicine. The world is failing on silicosis. The Lancet. Respiratory Medicine. 7 (4), 283(2019).
  3. Li, T., Yang, X., Xu, H., Liu, H. Early identification, accurate diagnosis, and treatment of silicosis. Canadian Respiratory Journal. 3769134, (2022).
  4. Adamcakova, J., Mokra, D. New insights into pathomechanisms and treatment possibilities for lung silicosis. International Journal of Molecular Sciences. 22 (8), 4162(2021).
  5. Li, Y., et al. Thalidomide alleviates pulmonary fibrosis induced by silica in mice by inhibiting ER stress and the TLR4-NF-κB pathway. International Journal of Molecular Sciences. 23 (10), 5656(2022).
  6. Zhang, E., et al. Exosomes derived from bone marrow mesenchymal stem cells reverse epithelial-mesenchymal transition potentially via attenuating Wnt/β-catenin signaling to alleviate silica-induced pulmonary fibrosis. Toxicology Mechanisms and Methods. 31 (9), 655-666 (2021).
  7. Li, S., et al. N-Acetyl-Seryl-Asparyl-Lysyl-Proline regulates lung renin angiotensin system to inhibit epithelial-mesenchymal transition in silicotic mice. Toxicology and Applied Pharmacology. 408, 408(2020).
  8. Walters, E. H., Shukla, S. D. Silicosis: Pathogenesis and utility of animal models of disease. Allergy. 76 (10), 3241-3242 (2021).
  9. Langley, R. J., Mishra, N. C., Peña-Philippides, J. C., Hutt, J. A., Sopori, M. L. Granuloma formation induced by low-dose chronic silica inhalation is associated with an anti-apoptotic response in Lewis rats. Journal of Toxicology and Environmental Health, Part A. 73 (10), 669-683 (2010).
  10. Jin, F., et al. Ac-SDKP Attenuates activation of lung macrophages and bone osteoclasts in rats exposed to silica by inhibition of TLR4 and RANKL signaling pathways. Journal of Inflammation Research. 14, 1647-1660 (2021).
  11. Xu, H., et al. A new anti-fibrotic target of Ac-SDKP: inhibition of myofibroblast differentiation in rat lung with silicosis. PloS One. 7 (7), e40301(2012).
  12. Li, S., et al. Ac-SDKP increases α-TAT 1 and promotes the apoptosis in lung fibroblasts and epithelial cells double-stimulated with TGF-β1 and silica. Toxicology and Applied Pharmacology. 369, 17-29 (2019).
  13. Vallyathan, V., Shi, X. L., Dalal, N. S., Irr, W. Generation of free radicals from freshly fractured silica dust. Potential role in acute silica-induced lung injury. The American Review of Respiratory Disease. 138 (5), 1213-1219 (1988).
  14. Khoo, S. Y., Lay, B. P. P., Joya, J., et al. Local anesthetic refinement of pentobarbital euthanasia reduces abdominal writhing without affecting immunohistochemical endpoints in rats. Lab Anim. 2018 (52), 152-162 (2018).
  15. Chooi, K. F., Rajendran, D. B. K., Phang, S. S. G., Toh, H. H. A. The dimethylnitrosamine induced liver fibrosis model in the rat. Journal of Visualized Experiments. 112 (112), (2016).
  16. Valentin, J., Frobert, A., Ajalbert, G., Cook, S., Giraud, M. -N. Histological quantification of chronic myocardial infarct in rats. Journal of Visualized Experiments. 118 (118), (2016).
  17. Zhang, H., et al. silicosis decreases bone mineral density in rats. Toxicology and Applied Pharmacology. 348, 117-122 (2018).
  18. Zhang, B., et al. Targeting the RAS axis alleviates silicotic fibrosis and Ang II-induced myofibroblast differentiation via inhibition of the hedgehog signaling pathway. Toxicology Letters. 313, 30-41 (2019).
  19. Li, S., et al. Silica perturbs primary cilia and causes myofibroblast differentiation during silicosis by reduction of the KIF3A-repressor GLI3 complex. Theranostics. 10 (4), 1719-1732 (2020).
  20. Gao, X., et al. Pulmonary silicosis alters microRNA expression in rat lung and miR-411-3p exerts anti-fibrotic effects by inhibiting MRTF-A/SRF signaling. Molecular therapy. Nucleic Acids. 20, 851-865 (2020).
  21. Cai, W., et al. Differential expression of lncRNAs during silicosis and the role of LOC103691771 in myofibroblast differentiation induced by TGF-β1. Biomedicine & Pharmacotherapy. 125, (2020).
  22. Cai, W., et al. Transcriptomic analysis identifies upregulation of secreted phosphoprotein 1 in silicotic rats. Experimental and Therapeutic. 21 (6), (2021).
  23. Li, Y., et al. Minute cellular nodules as early lesions in rats with silica exposure via inhalation. Veterinary Sciences. 9 (6), 251(2022).
  24. Mao, N., et al. Glycolytic reprogramming in silica-induced lung macrophages and silicosis reversed by Ac-SDKP treatment. International Journal of Molecular Sciences. 22 (18), 10063(2021).
  25. Hamilton, R. F., Thakur, S. A., Holian, A. Silica binding and toxicity in alveolar macrophages. Free Radical Biology and Medicine. 44 (7), 1246-1258 (2008).
  26. Park, R., et al. Exposure to crystalline silica, silicosis, and lung disease other than cancer in diatomaceous earth industry workers: a quantitative risk assessment. Occupational and Environmental. 59 (1), 36-43 (2002).
  27. Honnons, S., Porcher, J. M. In vivo experimental model for silicosis. Journal of Environmental Pathology, Toxicology and. 19 (4), 391-400 (2000).
  28. Lakatos, H. F., et al. Oropharyngeal aspiration of a silica suspension produces a superior model of silicosis in the mouse when compared to intratracheal instillation. Experimental Lung Research. 32 (5), 181-199 (2006).
  29. Li, B., et al. A suitable silicosis mouse model was constructed by repeated inhalation of silica dust via nose. Toxicology Letters. 353, 1-12 (2021).
  30. Hoy, R. F., Chambers, D. C. Silica-related diseases in the modern world. Allergy. 75 (11), 2805-2817 (2020).
  31. Davis, G. S. Pathogenesis of silicosis: current concepts and hypotheses. Lung. 164 (3), 139-154 (1986).
  32. Moss, O. R., James, R. A., Asgharian, B. Influence of exhaled air on inhalation exposure delivered through a directed-flow nose-only exposure system. Inhalation Toxicology. 18 (1), 45-51 (2006).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

188 SiO2

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Contact Us

Recommend to library

JoVE NEWSLETTERS

Research

Education

Authors

Librarians

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved