في الجسم الحي توصيف الآثار الكيميائية لتعطيل الغدد الصماء عن طريق هرمون الغدة الدرقية مؤشر عمل الماوس

Summary

تم تطوير نموذج الماوس مؤشر عمل هرمون الغدة الدرقية لتمكين القياس الكمي الخاص بالأنسجة لعمل هرمون الغدة الدرقية المحلي باستخدام آليته التنظيمية الداخلية. في الآونة الأخيرة ، ثبت أن النموذج مناسب لتوصيف المواد الكيميائية المسببة لاضطرابات الغدد الصماء التي تتفاعل مع اقتصاد هرمون الغدة الدرقية ، سواء من خلال منهجيات خارج الجسم الحي أو في الجسم الحي .

Abstract

تلعب هرمونات الغدة الدرقية (TH) دورا مهما في استقلاب الخلايا ووظيفة الأنسجة. اقتصاد TH عرضة للمواد الكيميائية المسببة لاضطرابات الغدد الصماء (EDCs) التي يمكن أن تزعج إنتاج الهرمونات أو عملها. العديد من الملوثات البيئية هي EDCs ، مما يمثل تهديدا ناشئا لكل من صحة الإنسان والإنتاج الزراعي. وقد أدى ذلك إلى زيادة الطلب على أنظمة الاختبار المناسبة لدراسة آثار EDCs المحتملة. ومع ذلك، تواجه المنهجيات الحالية تحديات. تستخدم معظم أنظمة الاختبار علامات داخلية تنظمها عمليات تنظيمية متعددة ومعقدة في كثير من الأحيان ، مما يجعل من الصعب التمييز بين الآثار المباشرة وغير المباشرة. علاوة على ذلك ، تفتقر أنظمة الاختبار في المختبر إلى التعقيد الفسيولوجي لعملية التمثيل الغذائي EDC والحرائك الدوائية في الثدييات. بالإضافة إلى ذلك ، فإن التعرض ل EDCs البيئية عادة ما ينطوي على خليط من مركبات متعددة ، بما في ذلك المستقلبات المتولدة في الجسم الحي ، لذلك لا يمكن تجاهل إمكانية التفاعلات. هذا التعقيد يجعل توصيف EDC صعبا. فأر مؤشر عمل هرمون الغدة الدرقية (THAI) هو نموذج معدل وراثيا يحمل نظام مراسل لوسيفيراز مستجيب ل TH ، مما يتيح تقييم عمل TH الخاص بالأنسجة. يمكن للمرء تقييم التأثيرات الخاصة بالأنسجة للمواد الكيميائية على عمل TH المحلي عن طريق تحديد تعبير مراسل لوسيفيراز في عينات الأنسجة. علاوة على ذلك ، مع التصوير في الجسم الحي ، يسمح نموذج الماوس التايلاندي بإجراء دراسات طولية حول تأثيرات EDCs المحتملة في الحية. يوفر هذا النهج أداة قوية لاختبار التعرض طويل الأجل أو هياكل العلاج المعقدة أو الانسحاب ، لأنه يتيح تقييم التغييرات في عمل TH المحلي بمرور الوقت في نفس. يصف هذا التقرير عملية قياسات التصوير في الجسم الحي على الفئران التايلاندية. يركز البروتوكول الذي تمت مناقشته هنا على تطوير وتصوير الفئران المفرطة والغدة الدرقية ، والتي يمكن أن تكون بمثابة عناصر تحكم. يمكن للباحثين تكييف أو توسيع العلاجات المقدمة لتلبية احتياجاتهم الخاصة ، وتقديم نهج أساسي لمزيد من التحقيق.

Introduction

إشارات هرمون الغدة الدرقية (TH) هي منظم أساسي لعملية التمثيل الغذائي الخلوي ، وهي ضرورية للتطور الطبيعي ووظيفة الأنسجة المثلى في مرحلة البلوغ¹. داخل الأنسجة ، يتم التحكم في عمل TH بدقة بواسطة آلية جزيئية معقدة ، مما يسمح بصيانة الأنسجة الخاصة بمستويات TH المحلية. هذا الاستقلال الذاتي للأنسجة المختلفة من مستويات TH المتداولة له أهمية كبيرة^2،3،4.

العديد من المواد الكيميائية لديها القدرة على تعطيل وظائف الغدد الصماء وتوجد في البيئة كملوثات. إنه قلق متزايد من أن هذه الجزيئات يمكن أن تدخل السلسلة الغذائية من خلال مياه الصرف الصحي....

Protocol

تمت مراجعة هذا البروتوكول والموافقة عليه من قبل لجنة رعاية في معهد الطب التجريبي (PE / EA / 1490-7 / 2017 ، PE / EA / 106-2 / 2021). البيانات المقدمة مأخوذة من خلفية FVB / Ant¹⁴ ، ذكور الفئران التايلاندية البالغة من العمر 3 أشهر (ن = 3-6 / مجموعة). خلفية FVB / النمل تميل التايلاندية إلى وجود بقع شديدة التصبغ على جلدها قد تشوه القياسات. ومن ثم ، ابحث عن البقع المصطبغة على جلد المنطقة المصورة بعد إزالة الفراء. لا تتطلب ظروف سكن خاصة ما لم تتطلب التجربة ذلك على وجه التحديد (على سبيل المثال ، نظام غذائي خاص).

1. علاج فرط نشاط الغدة الدرقية

ملاحظة: يتم توفير بروتوكول عام لتحفيز فرط نشاط الغدة الد....

النتائج

بشكل عام ، يتراوح الإشعاع المقاس من مقادير 10⁵ إلى 10¹⁰ p / s^{/ cm 2} / sr. ومع ذلك ، يمكن أن تختلف القيم الدقيقة بين داخل نفس الصورة وعبر الصور المختلفة. لذلك ، قد تكون مقارنة البيانات الأولية مضللة. من الضروري إنشاء إشارات تحكم وخلفية في جميع التجارب ، مما يجعل التص?.......

Discussion

إن التهديدات التي تشكلها المواد الكيميائية المسببة لاضطرابات الغدد الصماء (EDCs) على صحة الإنسان معترف بها جيدا. ومع ذلك ، فإن البحث في EDCs يواجه تحديات هائلة. هذه التحديات هي جزئيا نتيجة لتعقيد نظام الغدد الصماء. تم تحديد العديد من EDCs لتعطيل أنظمة الغدد الصماء المتعددة في وقت^{واحد 22<.......}

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
3,5,3'-triiodothyronine (T3)	Merck	T2877
Animals, mice			THAI mouse
Eye protection gel	Oculotect		1000 IU/g
Falcon tube	Thermo Fisher Scientific		50 mL volume
Iodine-free chow diet	Research Diets	custom
IVIS Lumina II in vivo imaging system	Perkin Elmer	-
Ketamine	Vetcentre	E1857
Living Image software 4.5	Perkin Elmer	-	provided with the instrument
Measuring cylinder			250 mL
methimazole	Merck	M8506
Microfuge tubes	Eppendorf		For diluting treatment materials
NaClO4	Merck	71852
Na-luciferin, substrate	Goldbio	103404-75-7
NaOH	Merck	101052833
Phoshphate buffer saline	Chem Cruz	sc-362302
Pipette	Gilson		For diluting treatment materials
Pipette tips	Axygen		For diluting treatment materials
Shaving cream/epilator/shaver			Personal preference
Syringe	B Braun		1 mL volume
Syringe needle	B Braun		0.3 x 12 mm
Xylazine	Vetcentre	E1852