علاج الوخز بالإبر في نموذج فأر من الخلل المعرفي المزمن الناجم عن نقص الأكسجة

Summary

هنا ، نصف بروتوكولا لتنفيذ التخدير الخفيف والعلاج بالوخز بالإبر على نموذج فأر نقص الأكسجة المزمن وإجراء اختبارات سلوكية لتقييم التغيرات المعرفية بعد العلاج.

Abstract

شكل علاج الاضطرابات العصبية المركزية باستمرار تحديات كبيرة للمجال الطبي. يستلزم الوخز بالإبر ، وهو ممارسة غير دوائية متجذرة في الطب الصيني التقليدي ، إدخال إبر دقيقة في نقاط دقيقة على الجسم ويستخدم عادة لإدارة الحالات المتنوعة. في الآونة الأخيرة ، ظهر الوخز بالإبر كتدخل علاجي واعد لمجموعة من الأمراض العصبية ، بما في ذلك القلق واضطرابات الجهاز التنفسي. ومع ذلك ، فإن إمكانات الوخز بالإبر في علاج الخلل الوظيفي المعرفي الناجم عن نقص الأكسجة المزمن لم يتم استكشافها بعد. تقدم هذه الورقة بروتوكولا شاملا لإنشاء نموذج فأر للضعف الإدراكي المزمن الناجم عن نقص الأكسجة ، وإدارة التخدير الخفيف ، وإجراء علاج الوخز بالإبر ، وتقييم التغيرات السلوكية وقدرات الذاكرة باستخدام اختبارات المجال المفتوح ومتاهات المياه. يوفر البروتوكول خطوة بخطوة تعليمات مفصلة حول تحديد نقاط الوخز والإبر ووضعها بدقة للتحسين المعرفي. من خلال استخدام هذا البروتوكول ، يمكن للباحثين إجراء دراسات منهجية لتقييم شامل للإمكانات العلاجية للوخز بالإبر للخلل المعرفي.

Introduction

يواجه سكان العالم حاليا مشكلة شيخوخة حرجة ، مما يؤدي إلى زيادة سريعة في انتشار الاضطرابات المعرفية. يبلغ معدل حدوث الضعف الإدراكي في جميع أنحاء العالم حوالي 53.97 لكل 1000 شخص في^{السنة 1}. لا يزال نقص الأكسجة الدماغية المزمن الناجم عن خلل وظيفي في الأوعية الدموية أو اضطرابات الدورة الدموية / الجهاز التنفسي أحد عوامل الخطر الرئيسية للخرف المرتبط بالعمر². أظهرت الدراسات السابقة أن نقص الأكسجة الدماغية يمكن أن يزيد من ترسب β الأميلويد عن طريق تعديل تعبير BACE1³. بالإضافة إلى ذلك ، ارتبط نقص الأكسجة بعدم تنظيم الخلايا الدبقية والتهاب الأعصاب ^4,5. على الرغم من الحجم المتزايد لهذه المشكلة ، إلا أن الأدوية الغربية الفعالة لمنع التدهور المعرفي الناجم عن نقص الأكسجة المزمن غير موجودة حاليا. تم استخدام الطب الصيني التقليدي غير الدوائي ، وخاصة الوخز بالإبر ، منذ آلاف السنين لعلاج الاضطرابات المعرفية وأظهر نتائج واعدة في التخفيف من الأمراض التنكسية العصبية ^6,7. نقاط الوخز بالإبر Baihui و Shenting و Zusanli هي نقاط فعالة لعلاج الخلل المعرفي ^8,9. أظهرت الدراسات السريرية أن العلاج بالوخز بالإبر الكهربائية يحسن بشكل كبير درجات التقييم المعرفي في مونتريال (MoCA) وفحص الحالة العقلية المصغر (MMSE) في المرضى الذين يعانون من ضعف إدراكي في الأوعية الدموية ويخفف بشكل فعال من الخلل الوظيفي المعرفي⁸. على الرغم من أن الدراسات قد اقترحت أن الوخز بالإبر يمكن أن يعزز بشكل كبير قدرة الذاكرة لدى الفئران المصابة بربط الشرايين - وهو نقص الأكسجة الدماغي الحاد¹⁰ ، وهو نموذج نقص الأكسجة الدماغي الحاد ، لا يوجد تقرير عن آثار الوخز بالإبر في أي نموذج للقوارض مع الاضطرابات المعرفية المزمنة الناجمة عن نقص الأكسجة. وقد أعاق نقص البحث في الآلية إلى حد كبير تطبيقها السريري.

أظهرت الأبحاث السابقة أن تعريض الفئران لبيئة نقص الأكسجين لمدة 8 أسابيع يمكن أن يرفع بشكل كبير مستويات الإجهاد التأكسدي والالتهاب في الدماغ ، مما يؤدي إلى انخفاض في وظيفة الذاكرة¹¹. تهدف الدراسة الحالية إلى التحقيق في تأثير الوخز بالإبر على نماذج القوارض من أجل زيادة فهمنا. ومع ذلك ، تجدر الإشارة إلى أن التخدير مطلوب عادة أثناء علاج الوخز بالإبر في القوارض بسبب احتمال حدوث هياج أثناء التحفيز المتكرر. يمكن أن يؤثر التخدير المطول بشكل كبير على الوظيفة الإدراكية لدى الفئران ، حيث يمكن لمعظم أدوية التخدير قمع النشاط العصبي وإعاقة معالجة المعلومات ، مما يؤدي إلى عجز سلوكي¹². أظهرت العديد من الدراسات أن إعطاء 2.5٪ سيفوفلوران لمدة 6 ساعات يمكن أن يضعف بشكل ملحوظ الذاكرة المكانية والقدرة على التعلم والانتباه في الفئران¹³. علاوة على ذلك ، تشير الأدلة إلى أن الجرعات العالية من التخدير قد تؤدي إلى موت الخلايا العصبية أو تلف الأعصاب في الفئران¹⁴. لذلك ، من الضروري تحديد نهج مناسب لتقليل الكمية الإجمالية للتخدير المستخدم. في هذه الدراسة ، نقدم طريقة فعالة للوخز بالإبر لعلاج الفئران ذات الضعف الإدراكي ، إلى جانب الاختبارات السلوكية لتقييم قدرات الذاكرة لديهم. الأهم من ذلك ، نقدم تقنية تخدير معدلة قبل العلاج يمكن أن تقلل بشكل فعال من الجرعة الإجمالية للتخدير التي يتم إعطاؤها أثناء التجربة.

Protocol

أجريت التجارب على بموافقة لجنة البحوث الحيوانية والأخلاقيات التابعة لمعهد خبي ييلينغ للبحوث الطبية (رقم الموافقة: N2022148). تم إيواء ذكور الفئران C57BL / 6J التي تزن 18-22 جم (انظر جدول المواد) في مركز تقييم الأدوية الجديد التابع لمعهد Hebei Yiling للبحوث الطبية. تم تزويدهم بالطعام العادي والمياه النظيفة وتعريضهم للضوء الاصطناعي لمدة 12 ساعة يوميا. حافظت الغرف على نطاق درجة حرارة متحكم فيه من 20-26 درجة مئوية ورطوبة نسبية من 40٪ -70٪.

1. إنشاء نموذج فأر نقص الأكسجة المزمن (الشكل 1)

1. قبل البدء في التجربة ، قم بإعداد أقفاص تحت الضغط الجوي العادي والأقفاص ذات البيئة المنخفضة الأكسجين المستمرة. إنشاء بيئة مستمرة منخفضة الأكسجين من خلال استخدام نظام توصيل آلي للتحكم في الغاز لغسل الغرفة بمزيج من الأكسجين النقي والنيتروجين.
   ملاحظة: تمت برمجة هذا النظام للتحكم في مفتاح الصمام الكهرومغناطيسي ، وبالتالي ضمان التوصيل الدقيق للغاز من حيث الوقت والتركيز.
2. قسم الفئران عشوائيا إلى ثلاث مجموعات: مجموعة تحكم (Con) ، ومجموعة نموذجية (CH) ، ومجموعة وخز بالإبر الكهربائية (EA + CH). ضع فئران التحكم والنموذج / الوخز بالإبر الكهربائية بشكل منفصل في القفصين ، مع 10 فئران لكل قفص. حافظ على دورة الضوء عند 12 ساعة / 12 ساعة (فاتح / داكن).
   ملاحظة: لا يحدث أي علاج أو نقص الأكسجة في المجموعة الضابطة (Con). تتكون المجموعة النموذجية (CH) من الفئران المصابة بنقص الأكسجة المزمن. تضم مجموعة الوخز بالإبر الكهربائية (EA + CH) الفئران التي يسببها نقص الأكسجة والتي يتم علاجها بالوخز بالإبر الكهربائية.
3. لتطوير نقص الأكسجة المزمن ، حدد معلمات غرفة الأكسجين المنخفض من خلال استخدام مقياس الأكسجين الرقمي لتنظيم معدل تدفق الغاز والحفاظ على تركيز الأكسجين بنسبة 10٪. ضع داخل غرفة منخفضة الأكسجين في الساعة 9:00 صباحا وقم بإزالتها في الساعة 5:00 مساء ، مما يؤدي إلى ما مجموعه 8 ساعات من التعرض المتواصل لانخفاض الأكسجين يوميا لمدة 3 أشهر.
   ملاحظة: عند إعداد توصيل غاز النيتروجين لتقليل تركيز الأكسجين ، ينصح بالمضي قدما ببطء لمنع الإدخال المفرط لغاز النيتروجين في وقت واحد ، لأنه سيؤدي إلى وفيات.
4. تقييم نموذج الخلل المعرفي المزمن الناجم عن نقص الأكسجة باستخدام فحص الأنسجة والاختبارات السلوكية: اختبار المجال المفتوح¹⁵ واختبار متاهة الماء¹⁶.

2. التخدير (الشكل 2)

1. قم بإعداد آلة تخدير الصغيرة (انظر جدول المواد) ووسادة التسخين ذات درجة الحرارة الثابتة.
   ملاحظة: أثناء التخدير ، تكون عرضة لخفض حرارة الجسم ، مما يؤكد ضرورة استخدام وسادة تسخين ذات درجة حرارة ثابتة للعزل.
2. ضع الماوس في صندوق تحريض التخدير وحث بسرعة مع 2٪ -2.5٪ إيزوفلوران في الأكسجين (انظر جدول المواد) لمدة 1 دقيقة تقريبا.
   ملاحظة: هذه المعالجة المسبقة قصيرة المدى هي خطوة حاسمة لضمان أن الفئران يمكن أن تزدهر تحت جرعة منخفضة التركيز لفترة طويلة من الزمن.
3. بمجرد انخفاض استثارتها ، اضغط على إصبع قدم الماوس للتحقق من رد فعله. بعد ذلك ، انقل الماوس إلى وسادة التسخين ذات درجة الحرارة الثابتة (37 درجة مئوية).
4. اضبط معدل تدفق التخدير على تركيز 0.5٪ تقريبا. قم بتوصيل آلة التخدير بفم وأنف الماوس. المضي قدما في العلاج بالوخز بالإبر الكهربائية مع ضمان الحفاظ على التخدير.
   ملاحظة: تم تأكيد تأثير التخدير عندما توقفت الفئران عن الوميض. يمكن أن يستمر تأثير التخدير لمدة 30 دقيقة على الأقل.

3. علاج الوخز بالإبر الكهربائية

1. لتحسين الخلل الوظيفي المعرفي بشكل فعال ، حدد نقاط وخز وخز محددة ، مثل Baihui (GV20) و Shenting (GV24) و Zusanli الثنائية (ST36) ، بناء على نظرية الطب الصيني التقليدي والخبرة السريرية (الشكل 3). إدارة العلاج بالوخز بالإبر الكهربائية 2 أسابيع قبل الانتهاء من عملية النمذجة.
   1. حدد موقع نقطة الوخز بالإبر GV20 على خط الوسط للجبهة ، عند منتصف الخط الذي يربط أطراف الأذنين⁷. يجب أن يكون عمق إدخال إبرة الوخز بالإبر 2 مم.
   2. حدد موقع نقطة الوخز GV24 على بعد 1.3 مم مباشرة فوق نقطة منتصف عيون الماوس على خط الوسط للجبهة¹⁷. يجب أن يكون عمق إدخال إبرة الوخز بالإبر 2 مم.
   3. حدد موقع نقطة الوخز ST36 على السطح الخارجي لمفصل الركبة ، على بعد حوالي 2 مم أسفل رأس الشظية^18,19. يجب أن يكون عمق إدخال إبرة الوخز بالإبر 3-4 مم.
2. قم بإعداد إبر الوخز بالإبر التي تستخدم لمرة واحدة (انظر جدول المواد) وجهاز الوخز بالإبر الكهربائية (انظر جدول المواد) للإجراء (الشكل 4).
3. ضع الماوس في وضعية الانبطاح تحت تخدير خفيف مع 0.5٪ إيزوفلوران ، مع التأكد من تثبيت رؤوسهم وأطرافهم. أمسك إبرة من الفولاذ المقاوم للصدأ (القطر: 0.18 مم ؛ الطول: 7 مم) باليد اليمنى ، باستخدام الإبهام والسبابة والإصبع الأوسط.
4. قم بإجراء الوخز بالإبر عند نقاط الوخز بالإبر GV20 و GV24 بشكل عرضي لعمق 2 مم ، ورفع الجلد على رأس الماوس باليد اليسرى. ثقب نقطة الوخز ST36 عموديا لعمق 3-4 مم عن طريق لمس الرأس الشظوي على الجانب الجانبي من مفصل ركبة الماوس والضغط على الجلد بالإبهام الأيسر.
   ملاحظة: بالنسبة لنقاط الوخز الموجودة على الرأس ، ينصح بإدخال الإبر في تسلسل GV24 متبوعا ب GV20. هذا الأمر يسهل الراحة التشغيلية. نقاط الوخز بالإبر هي مواقع تشريحية منفصلة بدلا من نقاط ثابتة. وبالتالي ، فإن الانحرافات الطفيفة في زاوية إدخال الإبرة ليس لها أي تأثير على الفعالية العلاجية ، كما هو الحال في المرضى الذين يتلقون العلاج بالوخز بالإبر الكهربائية في البيئات السريرية.
5. قم بتوصيل جهاز الوخز بالإبر الإلكتروني بالإبر ، مع توصيل GV20 و ST36 الأيسر بمجموعة قطب كهربائي واحد و GV24 و ST36 الأيمن متصل بآخر (الشكل 4). حدد وضع الموجة المستمرة ، بكثافة تيار كهربائي تبلغ 2 مللي أمبير وتردد 2 هرتز^20,21. تأكد من العلاج المثالي من خلال مراقبة الهزات الخفيفة المحلية عند نقاط الوخز والتسامح الهادئ بواسطة الماوس.
   1. عند توصيل أداة الوخز بالإبر الكهربائية ، قم بتوصيل الطرف القريب من الإبرة. يساعد هذا في تقليل التأثير الناجم عن وزن خط الاتصال وبالتالي يحسن الوقاية من انفصال الإبرة. إذا لزم الأمر ، استخدم شريطا لاصقا لتأمين الإبرة التي يتم إدخالها أفقيا وخط التوصيل.
6. تطبيق العلاج اليومي لمدة 30 دقيقة كل يوم لمدة 6 أيام متتالية، مع يوم راحة واحد بين كل دورة علاج.

4. اختبار المجال المفتوح (الشكل 5)

ملاحظة: اختبار المجال المفتوح هو طريقة تقليدية تستخدم لتقييم السلوك المستقل والسلوك الاستكشافي والقدرات المعرفية وسلوك القلق لحيوانات التجارب في بيئات جديدة وغير مألوفة²². يتكون من صندوق تفاعل مفتوح المجال وجهاز تسجيل.

1. لإجراء الاختبار ، قم بإعداد مكعب أبيض الجدران بقياس 50 سم × 50 سم × 30 سم ، مع تقسيم الجزء السفلي إلى 25 مربعا متساويا بقياس 10 سم × 10 سم.
2. ضع الماوس في مربع تفاعل المجال المفتوح للتأقلم. اسمح للماوس باستكشاف غرفة الاختبار والتعرف على البيئة الجديدة خلال فترة التأقلم. قم بإجراء اختبار المجال المفتوح بعد تأقلم الماوس مع البيئة التجريبية لمدة 1 ساعة.
   ملاحظة: هذا يضمن تقليل القلق أو التوتر الناجم عن التغيرات في البيئة ، وبالتالي تمكين نتائج أكثر دقة خلال التقييمات السلوكية اللاحقة.
3. ضع الماوس في وسط الصندوق وراقبه لمدة 10 دقائق بعد السماح للماوس بالتكيف مع البيئة لمدة 2 دقيقة.
   1. استخدم نظام تتبع الفيديو (انظر جدول المواد) لتسجيل مسار حركة الماوس ، والمسافة الإجمالية المقطوعة ، والوقت المستغرق في المنطقة المركزية ، وسرعة عبور المنطقة المركزية ، وعدد الإدخالات إلى المنطقة المركزية أثناء الاختبار.
   2. قم بإجراء العمليات ذات الصلة وفقا للتعليمات الواردة في دليل المنتج لنظام تتبع الفيديو. يخضع كل ماوس لاختبار واحد ويبدأ الاستكشاف من نفس الموقع داخل الصندوق.
   3. بعد كل اختبار ، قم بتنظيف صندوق المجال المفتوح بنسبة 75٪ من الإيثانول لمنع أي نتائج خاطئة ناتجة عن تداخل الرائحة عند استخدام الماوس.

5. متاهة المياه (الشكل 5)

ملاحظة: كثيرا ما يستخدم اختبار متاهة الماء كأداة تقييم سلوكي في التجارب التي تشمل الفئران لتقييم قدرات التعلم المكاني والذاكرة²³.

1. تحضير خزان مياه دائري بقطر 120 سم وعمق 30 سم. قسم الخزان إلى أربعة أرباع متساوية: الأول والثاني والثالث والرابع. في حالة استخدام الفئران السوداء في التجربة ، استخدم خزان مياه أبيض ؛ بالنسبة للفئران البيضاء ، استخدم خزان مياه أسود.
2. ضع الستائر حول خزان المياه الدائري لمنع الفأر من رؤية الباحثين أثناء الاختبار.
3. ضع علامات مختلفة على السطح العلوي لخزان المياه كإشارات مرئية للتوجيه المكاني. تأكد من بقاء هذه العلامات ثابتة طوال التجربة للحفاظ على الاتساق.
4. ضع منصة دائرية بقطر 10 سم في الربع الثالث من خزان المياه كمنطقة مستهدفة محددة. تأكد من إمكانية نقل المنصة وتأمينها بسهولة في أي مكان مطلوب.
5. خلال التجربة ، أدخل الماء في الخزان مع الحفاظ على نطاق درجة حرارة 22-24 درجة مئوية.
   1. تأكد من بقاء مستوى الماء ثابتا 1 سم فوق المنصة المستهدفة. قم بتضمين تركيز 20٪ من ثاني أكسيد التيتانيوم غير السام في الماء لتحقيق تباين واضح بين الفئران السوداء والخلفية البيضاء. يسهل هذا التباين تسجيل الكاميرا لحركات الماوس والمعلمات ذات الصلة.
6. قم بإجراء اختبار استكشاف مكاني مستمر لمدة 5 أيام عن طريق وضع كل ماوس بالتتابع في الأرباع الأول والثاني والثالث والرابع.
   1. ضع الماوس في مواجهة الحائط. ابتعد عن المتاهة لمنع الماوس من استخدام موضع المجرب كنقطة مرجعية. سجل الوقت الذي يستغرقه الماوس للعثور على النظام الأساسي.
   2. إذا فشل الماوس في تحديد موقع المنصة تحت الماء في غضون 90 ثانية ، فقم بتوجيه الماوس إلى المنصة وتوفير فترة تعلم مدتها 30 ثانية. بالإضافة إلى ذلك ، سجل فترة الكمون ك 90 ثانية.
   3. إذا حدد الماوس موقع المنصة تحت الماء في غضون 90 ثانية ، فدعها تبقى على المنصة لمدة 10 ثوان للتعلم قبل إزالتها من خزان المياه.
   4. جفف الماوس بمنشفة وأعده إلى قفصه.
   5. قم بتدوير موضع كل ماوس في كل ربع كل 20 دقيقة. سجل مسافة السباحة لكل ماوس وسرعته والوقت المستغرق للعثور على المنصة (فترة الكمون) باستخدام نظام تتبع الفيديو (انظر جدول المواد) ، وقم بإجراء العمليات ذات الصلة وفقا للتعليمات الواردة في دليل المنتج.
   6. اضبط المنصة على ارتفاع 1 سم فوق سطح الماء في اليوم الأول. ضع المنصة على عمق 1 سم تحت سطح الماء في الأيام 2-5.
7. في اليوم 6 ، قم بإزالة النظام الأساسي من الربع المستهدف وقم بإجراء اختبار استكشاف مكاني.
   1. ضع الماوس في الربع الأول للاستكشاف بحرية لمدة 90 ثانية. يسجل الكمبيوتر مسار السباحة للماوس ، والوقت الذي يقضيه في الربع المستهدف ، وعدد المرات التي يعبر فيها المنصة.
      ملاحظة: من أجل تقليل الأخطاء التجريبية التي تسببها العوامل البشرية ، من المهم الحفاظ على موضع النقطة المرجعية ثابتا في تجربة متاهة الماء. بالإضافة إلى ذلك ، يجب على المجرب التراجع فورا بعد وضع الماوس في الماء. بعد اكتمال التجربة ، يجب تجفيف الفئران بمنشفة ووضعها مرة أخرى في أقفاصها للحفاظ على الدفء.

6. تلطيخ الهيماتوكسيلين ويوزين (HE) (الشكل 6)

ملاحظة: يساعد الفحص النسيجي لمنطقة الحصين في تقييم إنشاء نموذج نقص الأكسجة وتحديد فعالية علاج الوخز بالإبر.

1. بعد التجربة السلوكية ، قم بتخدير الفأر بحقنة داخل الصفاق من 20 مجم / كجم من صوديوم بنتوباربيتال وتعميمه بمحلول بارافورمالدهايد بنسبة 10٪ (انظر جدول المواد) لضمان نضح الجسم بالكامل. عزل أنسجة المخ وغمرها في محلول بارافورمالدهيد 10 ٪ في درجة حرارة الغرفة (RT) لمدة 3 أيام لتحقيق التثبيت.
2. ضع عينات الدماغ في صندوق التضمين. بعد ذلك ، اغسل عينات الدماغ المعالجة بالماء الجاري لمدة 6 ساعات.
3. استخدم معالجا آليا للأنسجة لتجفيف العينات باستخدام سلسلة من محاليل الكحول بتركيزات متزايدة ، وهي 60٪ إيثانول لمدة 1 ساعة ، و 70٪ إيثانول لمدة 1 ساعة ، و 90٪ إيثانول لمدة 1 ساعة ، و 95٪ إيثانول لمدة 2 ساعة ، وأخيرا ، 100٪ إيثانول لمدة 2 ساعة.
4. اغمر عينات الأنسجة في الزيلين لمدة 2 ساعة لتحقيق الشفافية. بعد ذلك ، بعد الانتهاء من عملية الجفاف ، قم بنقل العينات المتداخلة إلى شمع البارافين المسخن إلى 60 درجة مئوية لمدة 3 ساعات. أخيرا ، قم بتضمينها في معالج تلقائي.
5. استخدم قطاعة دوارة للحصول على أقسام 4 ميكرومتر. بعد ذلك ، قم بإخضاع الأقسام لتلطيخ الهيماتوكسيلين لمدة تتراوح من 3-8 دقائق ، تليها تلطيخ اليوزين لمدة 1-3 دقائق.
6. نقل الأجزاء الملطخة بالتتابع إلى حاويات منفصلة من الكحول النقي والزيلين. ثم ، قم بإغلاق وتأمين الأجزاء الملطخة باللثة المحايدة استعدادا للفحص المرضي تحت المجهر الضوئي.
7. استخدم ماسح ضوئي للشرائح (انظر جدول المواد) لمسح الشرائح. بعد ذلك ، استخدم برنامج العرض للحصول على نتائج تلطيخ HE لمنطقة الحصين. قارن بين ترتيب الخلايا العصبية وتكثيف النوى العصبية.

النتائج

توصيف مسارات حركة الفأر في تجربة المجال المفتوح
تكشف خريطة المسار أن الفئران في المجموعة العادية تظهر ميلا عميقا للاستكشاف في بيئات غير مألوفة. تتركز مسارات نشاطها بشكل أساسي في الزوايا بينما تغطي الحقل المفتوح بأكمله (اللوحة اليسرى). في المقابل ، تظهر مجموعة نموذج نقص الأكسجة ...

Discussion

الوخز بالإبر ، وهو ممارسة طبية غير دوائية نشأت في الصين منذ أكثر من 2000 عام ، ينطوي على إدخال إبر رفيعة في نقاط محددة على الجسم تعرف باسم نقاط الوخز بالإبر. يعتقد أن هذه النقاط متصلة بقنوات أو خطوط طول تتدفق من خلالها الطاقة الحيوية للجسم ، أو "qi" ،²⁴. من خلال تحفيز هذه النقاط ، يهد?...

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
10% paraformaldehyde solution	Bioroyee (Beijing) Biotechnology Co., Ltd	RL3234
ANY-maze	Science	SA201	Video tracking system
C75BL/6J mice	BEIJING HFK BIOSCIENCE CO.,LTD	No.110322220103041767	Gender: Male,  Weight: 18–22 g
Electroacupuncture device	Great Wall	KWD-808 I
Hwato acupuncture  needle	Suzhou Medical Appliance Factory	2655519
Isoflurane	RWD Life Science Co.,Ltd	R510-22
NanoZoomer Digital Pathology	Hamamatsu Photonics K. K	C9600-01
Small animal anesthesia machine	RWD	YL-LE-A106