الإجهاد الخفيف المزمن غير المتوقع في الفئران على أساس الطب المنغولي

Summary

يحدد هذا البروتوكول نموذج الإجهاد المعتدل المزمن غير المتوقع (CUMS) للاكتئاب بناء على النظرية الطبية المنغولية ، إلى جانب طرق التحقق من صحة الاختبارات السلوكية.

Abstract

الاكتئاب هو اضطراب عاطفي سائد ويشكل سببا رئيسيا للإعاقة العالمية. تساهم قيود التدخلات الدوائية الحالية في العبء الصحي الكبير المنسوب إلى هذه الحالة. هناك حاجة ملحة لفهم أعمق للآليات الأساسية للاكتئاب ، مما يجعل النماذج قبل السريرية ذات الإمكانات الانتقالية ذات قيمة عالية. يفترض الطب المنغولي ، وهو مجموعة فرعية من الطب التقليدي ، أن حدوث المرض يرتبط ارتباطا وثيقا بتوازن الرياح والصفراء والبلغم. في هذه الدراسة ، نقدم بروتوكولا لطريقة الإجهاد الخفيف المزمن غير المتوقع (CUMS) في الفئران. في هذا الإطار ، تتعرض الفئران لسلسلة من الضغوطات المتقلبة والخفيفة للحث على نمط ظاهري يشبه الاكتئاب ، يحاكي التسبب في الاكتئاب البشري. تشمل المقايسات السلوكية المستخدمة في هذا البروتوكول اختبار تفضيل السكروز (SPT) ، مما يدل على انعدام التلذذ - وهو أحد الأعراض الأساسية للاكتئاب. اختبار المجال المفتوح (OFT) ، الذي يقيس مستويات القلق ؛ واختبار موريس للمتاهة المائية (MWM) ، الذي يقيم الذاكرة المكانية وقدرات التعلم. توضح طريقة CUMS القدرة على إحداث anhedonia والتسبب في عجز سلوكي طويل الأجل. علاوة على ذلك ، فإن هذا البروتوكول أكثر توافقا مع النظرية الطبية المنغولية من النماذج الحيوانية الأخرى المصممة لاستنباط سلوك يشبه الاكتئاب. يوفر تطوير هذا النموذج الحيواني والبحوث اللاحقة أساسا قويا للدراسات المبتكرة المستقبلية في مجال الطب المنغولي.

Introduction

الاضطراب الاكتئابي الشديد (MDD) هو مرض عقلي منتشر ، ويحتل المرتبة الثالثة كسبب رئيسي للإعاقة على مستوى العالم ويؤثر على أكثر من 300 مليون شخص^1,2,3. والجدير بالذكر أن التقديرات تشير إلى أن ما لا يقل عن نصف الأفراد المصابين لا يتلقون العلاج المناسب.⁴. بالنظر إلى هذه الفجوة ، تعمل النماذج الحيوانية كأداة حاسمة للتحقيق في مسببات الاكتئاب. حتى الآن ، يوجد أكثر من 20 نموذجا حيوانيا مختلفا للاكتئاب⁵. من بين هؤلاء ، نموذج الإجهاد المعتدل المزمن الذي لا يمكن التنبؤ به (CUMS) ، الذي صقله بول وينر في عام 1987 ، هو الأكثر استخداما

Protocol

حصلت البروتوكولات التجريبية على موافقة من لجنة أخلاقيات رعاية التجارب على بجامعة منغوليا الطبية الداخلية (YKD202301172) والتزمت بإرشادات المعاهد الوطنية للصحة لرعاية وأخلاقياته. رقم الترخيص لمركز لدينا هو NO.110324230102364187. تم الحصول على أربعة وعشرين من ذكور فأر Sprague-Dawley (SD) ، كل منها يبلغ من العمر 8 أسابيع (200 جم ± 20 جم) ، وإيواؤها في بيئة خاضعة للرقابة بدرجة حرارة 22 درجة مئوية ± 2 درجة مئوية ورطوبة 55٪ ± 15٪. إطعام الفئران مع اتباع نظام غذائي صيانة القوارض والمياه النقية مع الكيزان الذرة للفراش. تعرضت الفئران لدورة ضوء / مظلمة لمدة 12 ساعة / 12 ساعة لمدة أسبوع واحد قبل التجربة.

1. إنشاء نموذج الفئران CUMS

1. تجميع
   ....

النتائج

نتائج الاختبارات السلوكية في نموذج اكتئاب الفئران الناجم عن CUMS
لتأكيد فعالية إجراء CUMS للحث على سلوكيات شبيهة بالاكتئاب ، تم إجراء فحص للتلاعب. تم تخصيص ذكور الفئران Sprague-Dawley (SD) بشكل عشوائي إما لمجموعة MOD أو CON لمدة 4 أسابيع ، كما هو موضح في الخطوة 1.2.3. بعد ذلك ، تم التضحية بالفئران ?.......

Discussion

الاكتئاب هو اضطراب عقلي يتميز بأعراض مثل انخفاض الحالة المزاجية وقلة المتعة وانخفاض الطاقة³⁰. في مجال أبحاث الاكتئاب ، يعد إنشاء نموذج حيواني موثوق به أمرا بالغ الأهمية لتعزيز التدخلات العلاجية. من بين النماذج الحيوانية المختلفة ، يعد نموذج CUMS جديرا بالملاحظة بشكل خاص لموثوق.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
1.5 mL centrifuge tube	service Biotechnology Co., Ltd	EP-150-M
1000 µL Pipette	service Biotechnology Co., Ltd	IC021198160223
10 µL pipette tip	service Biotechnology Co., Ltd	IC012395160823
10 µL pipette tip	service Biotechnology Co., Ltd	TP-10
1250 µL pipette tip	service Biotechnology Co., Ltd	TP-1250
2 mL centrifuge tube	service Biotechnology Co., Ltd	EP-200-M
200 µL pipette tip	service Biotechnology Co., Ltd	TP-200
200 µL pipette tip	service Biotechnology Co., Ltd	IC021029160323
300 µL Multi-Channel Pipette	service Biotechnology Co., Ltd	IC091006161022
50 µL Pipette	service Biotechnology Co., Ltd	DS35110
Automatic plate washing machine	rayto Life Sciences Co., Ltd	RT-3100
Benchtop High-Speed Freezing Centrifuge	dalong construction Co., Ltd	D3024R
electronic balance	Mettler Toledo International Trade (Shanghai) Co., Ltd	ME203E/02
Electrothermal blast drying oven	Labotery Experimental Instrument Equipment Co., Ltd	GEL-70
Enzyme Label Detector	BioTeK Co., Ltd	Epoch
High Speed Tissue Grinder	service Biotechnology Co., Ltd	KZ--F
Horizontal Freezer	Mellow Group Co., Ltd	BCD-318AT
Laboratory Ultrapure Water Machine	Jinan Aiken Environmental Protection Technology Co., Ltd	AK-RO-C2
Morris water maze video trail analysing system	Tai Meng Tech Co., Ltd	WMT-200
Rat 5-HT ELISA Kit	Lian Ke bio Co., Ltd,China	96T/48T
SPF grade Sprague Dawley (SD) rats	SPF (Beijing) Biotechnology Co	SCXK(JING)2019-0010
Sprague Dawley rats	Beijing Biotechnology Co., Ltd, China	SCXK (JING) 2019-0010
Vertical Refrigerated Display Cabinet	Xingx Group Co., Ltd	LSC-316C
video tracking system	Tai Meng Tech Co., Ltd	ZH-ZFT
vortex mixer	Servicebio technology Co., Ltd	MV-100