JoVE Logo
Yazarlar
Bize Ulaşın

Oturum Aç

Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliği gereklidir. Oturum açın veya ücretsiz deneme sürümünü başlatın.

Bu Makalede

  • Özet
  • Özet
  • Giriş
  • Protokol
  • Sonuçlar
  • Tartışmalar
  • Açıklamalar
  • Teşekkürler
  • Malzemeler
  • Referanslar
  • Yeniden Basımlar ve İzinler

Özet

Bu protokol, Moğol tıp teorisine dayanan depresyon için kronik öngörülemeyen hafif stres (CUMS) modelini ve davranışsal testleri doğrulama yöntemlerini ana hatlarıyla belirtir.

Özet

Depresyon yaygın bir duygusal bozukluktur ve küresel engelliliğin önde gelen bir nedenini oluşturur. Mevcut farmakolojik müdahalelerin sınırlamaları, bu duruma atfedilen önemli sağlık yüküne katkıda bulunmaktadır. Depresyonun altında yatan mekanizmaların daha derin bir şekilde anlaşılmasına acil bir ihtiyaç vardır ve bu da translasyon potansiyeline sahip klinik öncesi modelleri son derece değerli kılmaktadır. Geleneksel tıbbın bir alt kümesi olan Moğol tıbbı, hastalık oluşumunun rüzgar, safra ve balgam dengesine yakından bağlı olduğunu öne sürer. Bu çalışmada, sıçanlarda kronik öngörülemeyen hafif stres (CUMS) yöntemi için bir protokol sunuyoruz. Bu çerçevede, sıçanlar, insan depresyonunun patogenezini taklit eden depresyon benzeri bir fenotipi indüklemek için bir dizi dalgalı, hafif stresöre maruz bırakılır. Bu protokolde kullanılan davranışsal testler arasında, depresyonun temel bir belirtisi olan anhedoninin göstergesi olan sükroz tercih testi (SPT); kaygı düzeylerini ölçen açık alan testi (OFT); ve uzamsal hafızayı ve öğrenme yeteneklerini değerlendiren Morris su labirenti testi (MWM). CUMS yöntemi, anhedoniyi indükleme ve uzun vadeli davranışsal eksikliklere neden olma yeteneğini göstermektedir. Ayrıca, bu protokol Moğol tıp teorisi ile depresyon benzeri davranışları ortaya çıkarmak için tasarlanmış diğer hayvan modellerinden daha uyumludur. Bu hayvan modelinin geliştirilmesi ve müteakip araştırmalar, Moğol tıbbı alanında gelecekteki yenilikçi çalışmalar için sağlam bir temel oluşturmaktadır.

Giriş

Majör depresif bozukluk (MDB), dünya çapında üçüncü önde gelen engellilik nedeni olarak sıralanan ve 300 milyondan fazla insanı etkileyen yaygın bir akıl hastalığıdır1,2,3. Özellikle, etkilenen bireylerin en az yarısının yeterli tedavi almadığı tahmin edilmektedir4. Bu boşluk göz önüne alındığında, hayvan modelleri depresyonun etiyolojisini araştırmak için çok önemli bir araç olarak hizmet vermektedir. Bugüne kadar, depresyon için 20'den fazla farklı hayvan modeli bulunmaktadır5. Bunlar arasında, 1987 yılında Paul Winer tarafından rafine edilen kronik öngörülemeyen hafif stres (CUMS) modeli en sık kullanılanıdır6. CUMS modeli, kemirgenleri çok çeşitli sosyo-çevresel stres faktörlerine maruz bırakmanın anksiyete, gerginlik ve depresyona benzer semptomlara yol açtığı öncülüyle çalışır. Metodoloji, hayvanları birkaç hafta boyunca çeşitli hafif stres faktörlerine maruz bırakmayı içerir ve bu da anhedoni ve depresif benzeri davranışlar da dahil olmak üzere bir dizi davranış değişikliğiyle sonuçlanır7,8. Bu değişikliklere, 5-HT'de bir azalma gibi endokrin ve nörotransmitter profillerindeki kaymalar eşlik eder9,10. Bu sonuçlar, MDB teşhisi konan insanlarda gözlemlenenleri yakından yansıtır ve böylece modelin faydasını doğrular. CUMS modeli, antidepresanları değerlendirmede, yüksek düzeyde yüzeysel, yapısal ve öngörücü geçerlilik gösteren etkinliği nedeniyle özellikle değerlidir11,12. Diğer modellerden farklı olarak, CUMS, monoaminerjik antidepresanların kronik uygulamasının etkilerine karşı hassastır. Örneğin, sitalopram, paroksetin ve fluoksetin gibi seçici serotonin geri alım inhibitörlerinin (SSRI'lar) kronik stres koşulları altında anhedoniyi önlediği ve tersine çevirdiği gösterilmiştir12,13. Ek olarak, ketamin gibi yeni hızlı etkili antidepresanlar da bu modelde etkinlik göstermiştir14,15. Buna karşılık, zorla yüzme testi (FST) ve kuyruk süspansiyon testi (TST) gibi diğer testler, uzun vadeli davranış değişikliklerini modellemek için daha az güvenilirdir ve genellikle depresyon semptomlarına dayanmak yerine akut strese adaptasyonları yansıtır16. Bu özellikler, depresyon araştırmalarında CUMS modelinin sağlam geçerliliğinin altını çizmektedir. Klasik çalışmalarda yüksek güvenilirliği ile tanınan CUMS modelinin en göze çarpan özelliklerinden biri, anhedoni-günlük aktivitelerde zevk veya ilgi duyma yetersizliğidir17,18. Bu fenomen yaygın olarak sükroz tercih testleri kullanılarak değerlendirilir ve birçok antidepresanın azalmış sakaroz tüketimini tersine çevirdiği gösterilmiştir. CUMS literatüründe, istemli motor davranışı, keşif eğilimlerini ve gerginliği değerlendiren ve böylece depresyonun şiddetini ölçen açık alan testi (OFT) dahil olmak üzere bazı başka metrikler de yaygın olarak kullanılmaktadır19. Yükseltilmiş artı labirent (EPM) gibi diğer testler kaygı benzeri davranışları değerlendirir, Morris su labirenti testi (MWM) bilişsel işlevleri inceler20ve FST, olumsuz duygulara ve davranışsal umutsuzluğa duyarlılığı değerlendirir20. Ayrıca, insanları etkileyen stres faktörlerinin çoğu doğası gereği sosyaldir. Sınırlı sosyal aktiviteler, ağlar ve destek ile karakterize edilen optimal olmayan sosyal ilişkilere sahip bireyler, çeşitli hastalıklar için yüksek risk altındadır21,22. Bu aynı zamanda gruplar halinde yaşayan sosyal hayvanlar olan kemirgenler için de geçerlidir. Örneğin, tecrit altında barındırılan sıçanlar, sosyal strese neden olan ve depresyonun başlangıcını hızlandıran izolasyon sendromu olarak adlandırılan özelliklerin özelliklerini sergiler23.

Çin tıbbının önemli bir dalı olan Moğol tıbbı, hastalığın başlangıcının içsel ve dış faktörler arasında karmaşık bir etkileşim olduğunu öne sürüyor. Dört yardımcı koşul olarak adlandırılan bu dış faktörler, iklim değişikliği, diyet, yaşam tarzı ve enfeksiyonlar, şaşırtıcı olaylar ve psikolojik bozukluklar gibi ani olayları kapsar. Hastalık süreci, üç tip homor olarak adlandırılan üç unsur ile dört yardımcı koşulla uyum içinde Yedi Bedensel Bileşen arasında devam eden bir etkileşim olarak kavramsallaştırılır24. Moğol tıbbı, insan vücudunun, üç homor arasında göreceli bir denge ile sürdürülen entegre bir varlık olarak işlev gördüğünü savunur. Bu dengedeki bir bozulmanın hastalığın habercisi olduğu düşünülmektedir24. Hayvan deneylerinin geleneksel ve modern tıp arasında köprü kurmadaki önemli rolü göz önüne alındığında, Moğol tıbbı alanındaki araştırmalarla ilgili hayvan modelleri geliştirmek çok önemlidir. Buna göre, bu fizyolojik ve psikolojik stres faktörlerini simüle etmek için CUMS ile birlikte 28 günlük bir izolasyon metodolojisi kullandık. Dokuz spesifik öngörülemeyen stres faktörü seçtik ve bu modelleme yöntemini Moğol tıbbının Üç homor teorisi aracılığıyla desteklemeye çalıştık. Sağlam bir hayvan modeli oluşturmak, Moğol tıbbındaki temel araştırmaları ilerletmek için esastır ve temel çalışmalarına önemli ölçüde katkıda bulunacaktır.

Protokol

Deney protokolleri, İç Moğolistan Tıp Üniversitesi (YKD202301172) Hayvan Deneyi Bakım Etiği Komitesi'nden onay aldı ve hayvan bakımı ve etiği için Ulusal Sağlık Enstitüleri yönergelerine bağlı kaldı. Hayvan merkezimizin lisans numarası NO.110324230102364187'dir. Her biri 8 haftalık (200 ±g ila 20 g) yirmi dört erkek Sprague-Dawley (SD) sıçanı alındı ve 22 ° C ± 2 ° C sıcaklık ve% 55 ± % 15 nem ile kontrollü bir ortamda barındırıldı. Fareleri kemirgen bakım yemi diyeti ve yatak takımları için mısır koçanı ile saf su ile besleyin. Sıçanlar, deneyden önce 1 hafta boyunca 12 saat / 12 saat aydınlık / karanlık döngüsüne tabi tutuldu.

1. CUMS sıçan modelinin kurulması

  1. Grup -landırma
    1. 24 fareyi rastgele 2 gruba ayırın: izolasyon veya strese maruz kalmayacak kontrol (CON) grubu ve model (MOD) grubu. Her grup 12 sıçan içerir.
    2. Fareleri, kafes başına 6 sıçan olacak şekilde 55 cm x 40 cm x 20 cm ölçülerinde standart kafeslerde barındırın. Aksi belirtilmedikçe, iklimlendirme süresi boyunca kafes atamasını koruyun.
    3. Her yetiştirme kafesini yeni yataklarla doldurun ve haftada iki kez değiştirin.
    4. 1 haftalık bir iklimlendirme periyodu gerçekleştirin. CUMS stres etkeni uygulaması dışında, sıçanların yiyecek ve suya sınırsız erişimine izin verin. Aksi belirtilmedikçe, 22°C ± 2°C sıcaklık, %55 ± %15 nem ve 08:00 ile 20:00 arasında 12 saat/12 saat aydınlık/karanlık döngüsü ile sabit bir ortam sağlayın.
    5. Deneyi başlatmadan önce, fareleri araştırmacıya alıştırmak ve deney aşamasında ek stresi en aza indirmek için günlük olarak kullanın.
  2. Kronik, öngörülemeyen hafif stres ile izolasyon
    1. Aynı anda MOD ve CON gruplarını ayrı odalara yerleştirin. CON grubu sıçanları bir arada tutarken, MOD grubu sıçanları ayrı ayrı barındırın. Diğer tüm koşulları sabit tutun.
    2. 28 günlük bir stres rejimi uygulayın25. Alışkanlığı önlemek ve stresörün öngörülemezliğini sağlamak için, aynı stres etkenini ardışık günlerde kullanmaktan kaçınarak günde rastgele bir stres etkeni uygulayın.
    3. Aşağıdaki dokuz stres faktöründenbirini 26,27 farklı günlerde rastgele uygulayın: 24 saat su yoksunluğu, 24 saat gıda yoksunluğu, ıslak dolgu, kafes eğimi, aydınlık/karanlık döngüsünün tersine çevrilmesi, 4 °C'de soğuğa maruz kalma, 45 °C'de ısıya maruz kalma, 1 dakika kuyruk sıkıştırma veya 160 rpm'de 15 dakika sallama. Spesifik tasarım Tablo 1'de özetlenmiştir.
    4. Stres etkeninin uygulanması sırasında, aydınlık/karanlık döngüsünün tersine çevrilmesi dışında, stres bitene kadar MOD grubuna yiyecek ve suya erişimi kısıtlayın. CON grubunun su ve diyeti kısıtlamasına gerek yoktu.
  3. Stres yöntemleri
    1. Kontrol grubu hariç tüm sıçanlara 28 günlük izolasyon ile birlikte depresyon uyaranları uygulayarak deneyi başlatın. Bu fareleri ayrı kafeslerde barındırın. Depresyon uyaranlarıyla ilgili durumlar için Tablo 2'ye bakın.
    2. Kuyruk kelepçesi yöntemini gerçekleştirmek için, bir sıçanın kuyruğunu, sıçanın kuyruğunun kökünden 1-2 cm mesafede standart bir ataşla sıkıştırarak MOD grubundan sabitleyin. Sıkıştırma süresini 1 dakikalık bir süre boyunca ölçün (n = 12).
    3. Su yoksunluğu yönteminde, su şişesini çıkararak bir MOD grubu sıçandan suyu alıkoyun ve 24 saat boyunca kaydedin.
      NOT: Su yoksunluğunun başlama zamanı, bitiş zamanının doğru bir şekilde hesaplanabilmesi için kaydedilmiştir; Bu dönemde sıçanların davranışları, aktivite, iştah ve zihinsel durum dahil olmak üzere gözlendi.
    4. Yiyecek yoksunluğu yönteminde, yiyecekleri bir MOD grubu sıçandan alıkoyun ve 24 saat boyunca kaydedin.
      NOT: Bitiş zamanının doğru bir şekilde hesaplanabilmesi için gıda yoksunluğunun başladığı zamanı kaydedin; bu süre zarfında sıçanların yeterince su içtiğinden emin olun; ve bu süre zarfında farelerin davranışlarını, aktivite ve zihinsel durum vb. dahil olmak üzere gözlemleyin.
    5. 4 ° C'de soğuk stimülasyon için, MOD grubundan bir fareyi bir kova soğuk suya koyun ve 5 dakika kaydedin. Test boyunca su sıcaklığının sabit kaldığından emin olun. Deneyin sonunda, fareyi bir üfleyici ile kurulayın ve orijinal kafesine geri koyun.
      NOT: Yükseldiğinde su sıcaklığını düzenlemek için bir termometre ve buz küpleri kullanarak soğuk su sıcaklığını 4 °C'de tutun. Su kalitesinin temiz ve sıcaklığın sabit olmasını sağlamak için su düzenli olarak değiştirilmelidir. Yüzerken, sıçanların tüm uzuvları ve gövdeleri baş hariç soğuk suya batırılmalıdır. Kovanın dibiyle temas nedeniyle sıçanın sudan atlamasını önlemek için suyun derinliği sıçanın vücudunun uzunluğundan daha büyük olmalıdır.
    6. 45 ° C ısı stresi uygulamak için, bir MOD grubu sıçanı bir inkübatöre yerleştirin ve sıcaklığın test boyunca sabit kalmasını sağlayarak 5 dakika boyunca kaydedin.
    7. Aydınlık-karanlık döngüsünün tersine çevrilmesinde, gündüz karanlığını simüle etmek için kafesi 1 saat boyunca siyah bir bezle sarın. Ardından, gün ışığını taklit etmek için kafesi gece boyunca 12 saat aydınlatın. Farenin davranışını, yiyecek ve su alımını ve uyku düzenini 24 saat boyunca kaydedin.
    8. Islak dolgu deneyi için, 100 g dolgu içeren bir kafese 200 mL su verin. Islak kafeste bir MOD grubu sıçan barındırın ve sıçanların aktivite, iştah, su alımı vb. dahil olmak üzere ıslak yatak stresi altındaki davranışlarını kaydedin. Islak dolgunun neden olabileceği sıçanların cilt ve saç durumu gibi herhangi bir anormal davranış veya rahatsız edici reaksiyon olup olmadığını gözlemleyin ve 24 saat boyunca sonraki analizler için bunları zamanında kaydedin. Testin ardından, fareyi bir üfleyici ile kurulayın ve taze odun talaşı içeren bir kafese geri koyun.
    9. Kafes eğimi yönteminde, bir MOD grubu sıçanı bir duvara 45 ° açıyla eğilmiş bir kafese yerleştirin ve 24 saat boyunca kaydedin. Açıyı ayarlamak ve kafesi yerine sabitlemek için kafes çerçeve yapısını kullanın.
      NOT: Baştan sona geçen süreyi hesaplayın ve aktivite, iştah ve zihinsel durum dahil olmak üzere kafesin yatırılma süresi boyunca farelerin davranışlarını gözlemleyin ve eğik kafesin açısının doğru ayarlandığından ve deneyin doğruluğunu ve tekrarlanabilirliğini sağlamak için sabit kaldığından emin olun.
    10. Yüksek hızlı çalkalama için, 160 rpm'ye ayarlanmış mekanik bir çalkalayıcıya bir MOD grubu sıçan yerleştirin ve sıçanı 15 dakika boyunca kaydedin. Modelin başarılı bir şekilde kurulmasını değerlendirmek için daha sonra davranışsal test yöntemleri kullanılır.
    11. Stres faktörlerini uyguladıktan sonra, MOD grubu kafeslerini CUMS odasından muhafaza odasına geri taşıyın. 4 haftalık strese maruz kalma süresi boyunca, CON grubunu konut odasında bulunan ev kafeslerinde tutun.
  4. Deneyler sırasında alınacak önlemler
    1. CUMS odasında stres etkenini uyguladıktan sonra MOD grubunun kafeslerini genel konut odasına geri aktarın.
    2. CUMS modellemesi sırasında hayvan izleme
      1. Kuyruk kelepçeleme sırasında, hayvanın indüklenen stimülasyon nedeniyle mücadele etmesi muhtemeldir. Bu süre boyunca, kelepçeyi sürekli olarak izleyin. Yerinden çıkarsa, zamanlayıcıyı duraklatın, kelepçeyi yeniden uygulayın ve ardından zamanlayıcıyı 1 dakika devam ettirin.
      2. Su yoksunluğu ve ıslak yatak stresörlerini aynı anda uygulamayın.
        NOT: Islak dolgu ve su yoksunluğunun aynı anda uygulanmasından kaçınmak, deneysel bütünlüğün korunmasına yardımcı olur, kafa karıştırıcı değişkenleri azaltır ve hayvan refahını destekler.
      3. Hayvanın vücut ısısı ve ortam oda sıcaklığı, soğuk suda yüzme sırasında su sıcaklığını yükseltebilir. Bu nedenle, sabit bir su sıcaklığını korumak için buzlu su veya buz küpleri ekleyerek ayarlayın.
      4. Stresörlerin uygulanması sırasında, günlük tersine çevirme dışında, sıçanları 30 dakikalık aralıklarla gözlemleyin. Titreme, uyuşukluk veya hareket eksikliği gibi olağandışı sıkıntı belirtilerine özellikle dikkat edin. Bu tür semptomlar gözlenirse - özellikle 4 ° C soğuk suda yüzme ve ıslak yatak takımları sırasında potansiyel hipotermi - fareyi derhal stres etkeninden uzaklaştırın.
        NOT: Enfeksiyon, şiddetli travma, agresif davranışlar, anormal hareketlilik vb. gibi sağlık sorunları olduğunda deney hayvanlarını çalışmadan çıkarın, Hayvanları çalışmadan çıkarma koşulları tipik olarak deney sonuçlarının bütünlüğünü sağlarken sağlıklarını ve güvenliklerini koruma etrafında döner.
      5. Her sıçanda yaralar veya diğer fiziksel veya davranışsal anormallikler için günlük denetimler yapın. Herhangi bir anormallik gözlenirse, farenin deneyden çıkarılması gerekip gerekmediğini belirlemek için laboratuvar veterinerine danışın.
      6. Her fareyi her 3 günde bir tartın. Bir hayvan, beslenme öncesi bazal vücut ağırlığının% 20'sinden fazlasını kaybederse, deneyden çıkarılmalıdır.

2. Davranış testleri

  1. Başlamak için, depresyon uyaranlarını, kontrol grubu hariç tüm sıçanlara 28 gün boyunca izolasyonla birlikte uygulayın. Fareleri ayrı kafeslerde barındırın. Depresyon uyaran koşullarıyla ilgili ayrıntılar için Tablo 2'ye bakın.
  2. Açık alan testi için, bir kara kutuyu eşit alanlı 25 kare parçaya bölün. Kutuya bir video izleme analiz sistemi kurun. Fareyi merkezi kareye yerleştirin ve yatay ve dikey aktivitelerini 5 dakika boyunca izleyin.
    NOT: Kutunun boyutları 500 mm x 500 mm x 300 mm'dir. Aktivite verileri, yeni bir ortama maruz kaldıklarında kemirgenlerde kaygı ile ilgili davranışları değerlendirmek için video izleme sistemi kullanılarak toplanacaktır.
  3. Daha sonra, yatay aktiviteyi ölçmek için tüm pençeleri kullanarak sıçan tarafından geçilen karelerin sayısını hesaplayın. Dikey aktivitenin göstergeleri olarak ayakta durma ve tımar etme örneklerini sayın. Her testten sonra, sonraki testler için kalan fare kokularını ortadan kaldırmak için kutuyu %75 alkol kullanarak sterilize edin.
  4. Daha sonra, anhedoni sükroz tercih testi ile değerlendirilir. Kafes kapağına iki şişe yerleştirin: A şişesi saf su içerirken, B şişesi %1 sükroz çözeltisi içerir. Sıçan için her iki çözüme de ad libitum erişimine izin verin. 0, 7, 14, 21 ve 28. günlerde 60 dakikalık sükroz tercih oranlarını hesaplamak için şişeleri tüketmeden önce ve sonra tartın. Formül aşağıdaki gibidir:
    Sükroz tüketimi = figure-protocol-10516 × %100
  5. Uzamsal hafızayı ve öğrenme yeteneklerini ölçmek için Morris su labirenti testini kullanın. Havuzu dört çeyreğe bölün ve bunları birden dörde kadar numaralandırın. Üçüncü çeyrekte su yüzeyinin 1 cm altına batık bir dinlenme platformu yerleştirin.
  6. Su opaklığını artırmak ve deney prosedürü boyunca yaklaşık 23 ° C'lik bir su sıcaklığını korumak için havuza süt verin.
  7. Her fareyi labirentin çeşitli kadranlarına yerleştirin ve gizli platformu bulmaları için 120 saniye bekleyin. Fareler, platformun konumunu hatırlamak için uzamsal hafızaya ve öğrenme becerilerine güvenmelidir. Platformun konumunu öğrendikten sonra doğrudan ona yüzebilirler. Morris su labirenti video izleme sistemini kullanarak gecikme süresini kaydedin.
  8. Fareyi havuzda sabit bir yere yerleştirin. Konu 120 saniye içinde gizli platformu bulamazsa, gecikmeyi 120 saniye olarak kaydedin.
  9. Son olarak, gizli platformu çıkarın, fareyi tekrar suya yerleştirin ve 120 sn'lik bir süre boyunca bölge geçişlerinin sayısını kaydedin.

3. İstatistiksel analiz

  1. Biyokimyasal parametrelerdeki önemli farklılıkları değerlendirmek için, tek yönlü varyans analizi (ANOVA) ve ardından Duncan'ın post hoc testini kullanın. Verileri ortalama ± standart hata (SE) olarak sunun ve 0,05'ten küçük bir p değerini istatistiksel olarak anlamlı kabul edin.

Sonuçlar

CUMS ile indüklenen sıçan depresyonu modelindeki davranışsal testlerden elde edilen sonuçlar
Depresyon benzeri davranışları indüklemek için CUMS prosedürünün etkinliğini doğrulamak için bir manipülasyon kontrolü yapıldı. Erkek Sprague-Dawley (SD) sıçanları, adım 1.2.3'te belirtildiği gibi, 4 haftalık bir süre boyunca MOD veya CON grubuna rastgele tahsis edildi. Daha sonra, sıçanlar sakrifiye edildi ve hipokampusları, enzime bağlı immünosorbent testi (ELISA)

Tartışmalar

Depresyon, düşük ruh hali, zevk eksikliği ve düşük enerji gibi semptomlarla karakterize zihinsel bir bozukluktur30. Depresyon araştırmaları alanında, terapötik müdahaleleri ilerletmek için güvenilir bir hayvan modelinin oluşturulması çok önemlidir. Çeşitli hayvan modelleri arasında, CUMS modeli, yüksek güvenilirliği, geçerliliği ve insan depresyonunun özellikleriyle uyumu nedeniyle özellikle dikkat çekicidir31. Çeşitli ortamlarda uzun bir sü...

Açıklamalar

Yazarların açıklanacak herhangi bir çıkar çatışması yoktur.

Teşekkürler

Sağlanan enstrümantasyon ve laboratuvar için minnettarız, Çin İç Moğol Tıp Üniversitesi'nin Moğol tıp fakültesine şükranlarımızı sunuyoruz.Bu çalışma, gerekli enstrümantasyon ve laboratuvar olanaklarını sağlamak için desteklenmiştir. Bu çalışma, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı'ndan (Hibe No. 81760762) ve Çin İç Moğolistan Tıp Üniversitesi Projesi'nden (Hibe No. YKD2022MS074) ve İç Moğolistan, Çin'deki Yüksek Öğretim Bilimsel Araştırma Projesi (Hibe No. NJZY22661) ve İç Moğolistan Özerk Bölgesi, Çin'deki Çin ve Moğol Tıbbı Anahtar Laboratuvarı Açık Fon Projesi (Hibe No. MYX2023-K07).

Malzemeler

NameCompanyCatalog NumberComments
1.5 mL centrifuge tubeservice Biotechnology Co., LtdEP-150-M
1000 µL Pipetteservice Biotechnology Co., LtdIC021198160223
10 µL pipette tipservice Biotechnology Co., LtdIC012395160823
10 µL pipette tipservice Biotechnology Co., LtdTP-10
1250 µL pipette tipservice Biotechnology Co., LtdTP-1250
2 mL centrifuge tubeservice Biotechnology Co., LtdEP-200-M
200 µL pipette tipservice Biotechnology Co., LtdTP-200
200 µL pipette tipservice Biotechnology Co., LtdIC021029160323
300 µL Multi-Channel Pipetteservice Biotechnology Co., LtdIC091006161022
50 µL Pipetteservice Biotechnology Co., LtdDS35110
Automatic plate washing machinerayto Life Sciences Co., LtdRT-3100
Benchtop High-Speed Freezing Centrifugedalong construction Co., LtdD3024R
electronic balanceMettler Toledo International Trade (Shanghai) Co., LtdME203E/02
Electrothermal blast drying ovenLabotery Experimental Instrument Equipment Co., LtdGEL-70
Enzyme Label DetectorBioTeK Co., LtdEpoch
High Speed Tissue Grinderservice Biotechnology Co., LtdKZ-figure-materials-1756-F
Horizontal FreezerMellow Group Co., LtdBCD-318AT
Laboratory Ultrapure Water MachineJinan Aiken Environmental Protection Technology Co., Ltd  AK-RO-C2
Morris water maze video trail analysing system Tai Meng Tech Co., LtdWMT-200
Rat 5-HT ELISA KitLian Ke bio Co., Ltd,China96T/48T
SPF grade Sprague Dawley (SD) ratsSPF (Beijing) Biotechnology Co SCXK(JING)2019-0010
Sprague Dawley ratsBeijing Biotechnology Co., Ltd, China SCXK (JING) 2019-0010
Vertical Refrigerated Display CabinetXingx Group Co., LtdLSC-316C
video tracking systemTai Meng Tech Co., LtdZH-ZFT
vortex mixerServicebio technology Co., LtdMV-100

Referanslar

  1. Alqurashi, G. K., et al. The impact of chronic unpredictable mild stress-induced depression on spatial, recognition and reference memory tasks in mice: Behavioral and histological study. Behav Sci. 12 (6), 166 (2022).
  2. Yu, S., Wang, L., Jing, X., Wang, Y., An, C. Features of gut microbiota and short-chain fatty acids in patients with first-episode depression and their relationship with the clinical symptoms. Front Psychol. 14, 1088268 (2023).
  3. Duda, P., Hajka, D., Wójcicka, O., Rakus, D., Gizak, A. Gsk3β: A master player in depressive disorder pathogenesis and treatment responsiveness. Cells. 9 (3), 727 (2020).
  4. Correia, A. S., Vale, N. Tryptophan metabolism in depression: A narrative review with a focus on serotonin and kynurenine pathways. Int J Mol Sci. 23 (15), 8493 (2022).
  5. Hao, Y., Ge, H., Sun, M., Gao, Y. Selecting an appropriate animal model of depression. Int J Mol Sci. 20 (19), 4827 (2019).
  6. Willner, P., Towell, A., Sampson, D., Sophokleous, S., Muscat, R. Reduction of sucrose preference by chronic unpredictable mild stress, and its restoration by a tricyclic antidepressant. Psychopharmacology (Berl). 93 (3), 358-364 (1987).
  7. Nakase, S., Kitayama, I., Soya, H., Hamanaka, K., Nomura, J. Increased expression of magnocellular arginine vasopressin mrna in paraventricular nucleus of stress-induced depression-model rats. Life Sci. 63 (1), 23-31 (1998).
  8. Wu, X., et al. Involvement of kynurenine pathway between inflammation and glutamate in the underlying etiopathology of cums-induced depression mouse model. BMC Neurosci. 23 (1), 62 (2022).
  9. Zhang, C., et al. Minocycline ameliorates depressive behaviors and neuro-immune dysfunction induced by chronic unpredictable mild stress in the rat. Behav Brain Res. 356, 348-357 (2019).
  10. Ma, J., Wang, R., Chen, Y., Wang, Z., Dong, Y. 5-HT attenuates chronic stress-induced cognitive impairment in mice through intestinal flora disruption. J Neuroinflammation. 20 (1), 23 (2023).
  11. Nollet, M. Models of depression: Unpredictable chronic mild stress in mice. Curr Protoc. 1 (8), e208 (2021).
  12. Becker, M., Pinhasov, A., Ornoy, A. Animal models of depression: What can they teach us about the human disease. Diagnostics (Basel). 11 (1), 123 (2021).
  13. Petkovic, A., Chaudhury, D. Encore: Behavioural animal models of stress, depression and mood disorders. Front Behav Neurosci. 16, 931964 (2022).
  14. Okine, T., Shepard, R., Lemanski, E., Coutellier, L. Sex differences in the sustained effects of ketamine on resilience to chronic stress. Front Behav Neurosci. 14, 581360 (2020).
  15. Fitzgerald, P. J., et al. Sex- and stress-dependent effects of a single injection of ketamine on open field and forced swim behavior. Stress. 24 (6), 857-865 (2021).
  16. Doron, R., Burstein, O. The unpredictable chronic mild stress protocol for inducing anhedonia in mice. J Vis Exp. (140), e58184 (2018).
  17. De Vry, J., Schreiber, R. The chronic mild stress depression model: Future developments from a drug discovery perspective. Psychopharmacology (Berl). 134 (4), 349-350 (1997).
  18. Tong, J., et al. Antidepressant effect of helicid in chronic unpredictable mild stress model in rats. Int Immunopharmacol. 67, 13-21 (2019).
  19. Liu, H., et al. Tnf signaling pathway-mediated microglial activation in the pfc underlies acute paradoxical sleep deprivation-induced anxiety-like behaviors in mice. Brain Behav Immun. 100, 254-266 (2022).
  20. He, L. W., et al. Optimization of food deprivation and sucrose preference test in sd rat model undergoing chronic unpredictable mild stress. Animal Model Exp Med. 3 (1), 69-78 (2020).
  21. Ma, W., Wu, B., Gao, X., Zhong, R. Association between frailty and cognitive function in older chinese people: A moderated mediation of social relationships and depressive symptoms. J Affect Disord. 316, 223-232 (2022).
  22. Geng, C., et al. Systematic impacts of chronic unpredictable mild stress on metabolomics in rats. Sci Rep. 10 (1), 700 (2020).
  23. Holmes, T. H., Rahe, R. H. The social readjustment rating scale. J Psychosom Res. 11 (2), 213-218 (1967).
  24. Zhang, M., et al. Shuxie-1 decoction alleviated cums -induced liver injury via il-6/jak2/stat3 signaling. Front Pharmacol. 13, 848355 (2022).
  25. Antoniuk, S., Bijata, M., Ponimaskin, E., Wlodarczyk, J. Chronic unpredictable mild stress for modeling depression in rodents: Meta-analysis of model reliability. Neurosci Biobehav Rev. 99, 101-116 (2019).
  26. Hu, C., et al. Re-evaluation of the interrelationships among the behavioral tests in rats exposed to chronic unpredictable mild stress. PLoS One. 12 (9), e0185129 (2017).
  27. Li, Y., et al. Increased hippocampal fissure width is a sensitive indicator of rat hippocampal atrophy. Brain Res Bull. 137, 91-97 (2018).
  28. Hu, R. L. B. G., et al. Effects of the Mongolian medicine Zadi-5 on monoamine neurotransmitters in the brain of rats with chronic stress depression model. Info Traditional Chinese Med. 34 (06), 5-8 (2017).
  29. Zhou, Y., Cong, Y., Liu, H. Folic acid ameliorates depression-like behaviour in a rat model of chronic unpredictable mild stress. BMC Neurosci. 21 (1), 1 (2020).
  30. Zhuang, Y., Zeng, R., Liu, X., Yang, L., Chan, Z. Neoagaro-oligosaccharides ameliorate chronic restraint stress-induced depression by increasing 5-ht and bdnf in the brain and remodeling the gut microbiota of mice. Mar Drugs. 20 (11), 725 (2022).
  31. Socała, K., et al. The role of microbiota-gut-brain axis in neuropsychiatric and neurological disorders. Pharmacol Res. 172, 105840 (2021).
  32. Song, J., Kim, Y. K. Animal models for the study of depressive disorder. CNS Neurosci Ther. 27 (6), 633-642 (2021).
  33. Abelaira, H. M., Réus, G. Z., Quevedo, J. Animal models as tools to study the pathophysiology of depression. Braz J Psychiatry. 35 Suppl 2, S112-S120 (2013).
  34. Strekalova, T., et al. Chronic mild stress paradigm as a rat model of depression: Facts, artifacts, and future perspectives. Psychopharmacology (Berl). 239 (3), 663-693 (2022).
  35. Markov, D. D. Sucrose preference test as a measure of anhedonic behavior in a chronic unpredictable mild stress model of depression: Outstanding issues. Brain Sci. 12 (10), 1287 (2022).
  36. Czéh, B., Fuchs, E., Wiborg, O., Simon, M. Animal models of major depression and their clinical implications. Progress in Neuro-Psychopharmacology and Biological Psychiatry. 64, 293-310 (2016).
  37. Gururajan, A., Reif, A., Cryan, J. F., Slattery, D. A. The future of rodent models in depression research. Nat Rev Neurosci. 20 (11), 686-701 (2019).
  38. Markov, D. D., Novosadova, E. V. Chronic unpredictable mild stress model of depression: Possible sources of poor reproducibility and latent variables. Biology (Basel). 11 (11), 1621 (2022).
  39. Willner, P. The chronic mild stress (cms) model of depression: History, evaluation and usage. Neurobiol Stress. 6, 78-93 (2017).
  40. Lages, Y. V. M., Rossi, A. D., Krahe, T. E., Landeira-Fernandez, J. Effect of chronic unpredictable mild stress on the expression profile of serotonin receptors in rats and mice: A meta-analysis. Neurosci Biobehav Rev. 124, 78-88 (2021).
  41. Willner, P., et al. Validation of chronic mild stress in the wistar-kyoto rat as an animal model of treatment-resistant depression. Behavioural Pharmacology. 30 (2 and 3), 239-250 (2019).
  42. Slattery, D. A., Cryan, J. F. Modelling depression in animals: At the interface of reward and stress pathways. Psychopharmacology (Berl). 234 (9-10), 1451-1465 (2017).
  43. Sterley, T. L., et al. Social transmission and buffering of synaptic changes after stress. Nat Neurosci. 21 (3), 393-403 (2018).
  44. Brechbühl, J., et al. Mouse alarm pheromone shares structural similarity with predator scents. Proc Natl Acad Sci U S A. 110 (12), 4762-4767 (2013).
  45. Beck, R. C., Self, J. L., Carter, D. J. Sucrose preference thresholds for satiated and water-deprived rats. Psychol Rep. 16, 901-905 (1965).
  46. Hawkins, P., Golledge, H. D. R. The 9 to 5 rodent - time for change? Scientific and animal welfare implications of circadian and light effects on laboratory mice and rats. J Neurosci Methods. 300, 20-25 (2018).
  47. Daut, R. A., Ravenel, J. R., Watkins, L. R., Maier, S. F., Fonken, L. K. The behavioral and neurochemical effects of an inescapable stressor are time of day dependent. Stress. 23 (4), 405-416 (2020).
  48. Hu, R. L. B. G., et al. Experimental research on nutmeg wuwei pills against of depression model rats behavior and hippocampus monoamine neurotransmitters. Chinese J Exp Traditional Medical Formulae. 21 (11), 146-149 (2015).
  49. Hu, R. L. B. G., et al. Effects of Rou kou Wuwei Pill on the learning and memory abilities and the expression of BDNF and TrkB in hippocampus of depression rats. Chinese J Traditional Chines Med Pro. 32 (8), 3797-3800 (2017).

Yeniden Basımlar ve İzinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya resimlerini yeniden kullanma izni talebi

Izin talebi

Daha Fazla Makale Keşfet

Anahtar Kelimeler Kronik ng r lemeyen Hafif StresCUMSMo ol T bbDepresyonAnhedoniA k Alan TestiMorris Su LabirentiHayvan ModeliDavran sal Testler

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Gizlilik

Kullanım Şartları

İlkeler

Bize Ulaşın

KÜTÜPHANEYE TAVSİYE ET

JoVE HABER BÜLTENLERİ

Araştırma

Eğitim

Yazarlar

Kütüphaneciler

JoVE Hakkında

Telif Hakkı © 2020 MyJove Corporation. Tüm hakları saklıdır