몽골 의학에 근거한 쥐의 만성 예측 불가능한 경미한 스트레스

요약

이 프로토콜은 몽골 의학 이론을 기반으로 우울증에 대한 만성 예측 불가능한 경미 스트레스(CUMS) 모델과 행동 테스트를 검증하는 방법을 설명합니다.

초록

우울증은 널리 퍼진 정서 장애이며 전 세계 장애의 주요 원인을 구성합니다. 현재 약물 치료의 한계는 이 질환으로 인한 상당한 건강 부담에 기여합니다. 우울증의 근본적인 메커니즘에 대한 더 깊은 이해가 시급히 필요하며, 이를 통해 중개 가능성이 있는 전임상 모델이 매우 가치가 있습니다. 전통의학의 일종인 몽골 의학은 질병 발생이 바람, 담즙, 가래의 평형과 밀접한 관련이 있다고 주장한다. 이 연구에서는 쥐의 만성 예측할 수 없는 경미한 스트레스(CUMS) 방법에 대한 프로토콜을 소개합니다. 이 틀 내에서 쥐는 인간 우울증의 발병 기전을 모방한 우울증과 같은 표현형을 유도하기 위해 일련의 변동하는 가벼운 스트레스 요인에 노출됩니다. 이 프로토콜에 사용된 행동 분석에는 우울증의 핵심 증상인 무쾌감증을 나타내는 자당 선호도 테스트(SPT)가 포함됩니다. 불안 수준을 측정하는 OFT(Open Field Test); 공간 기억력과 학습 능력을 평가하는 Morris water maze test(MWM)가 있습니다. CUMS 방법은 무쾌감증을 유발하고 장기적인 행동 결함을 유발할 수 있는 능력을 보여줍니다. 더욱이, 이 프로토콜은 우울증과 같은 행동을 유도하도록 설계된 다른 동물 모델보다 몽골 의학 이론에 더 부합한다. 이 동물 모델의 개발과 후속 연구는 몽골 의학 분야에서 미래의 혁신적인 연구를 위한 강력한 기반을 제공합니다.

서문

주요우울장애(MDD)는 널리 퍼진 정신 질환으로, 전 세계적으로 장애의 세 번째 주요 원인으로 꼽히며 3억 명 이상의 사람들에게 영향을 미칩니다^1,2,3. 주목할 만한 점은, 감염자의 절반 이상이 적절한 치료를 받지 못하고 있는 것으로 추정된다는 점이다⁴. 이러한 간극을 감안할 때, 동물 모델은 우울증의 원인을 조사하는 데 중요한 도구로 작용한다. 현재까지 우울증에 대한 20개 이상의 다양한 동물 모델이 존재합니다⁵. 이 중 1987년 폴 위너(Paul Winer)가 개선한 만성질환(chronic unpredictable mild stress, CUMS) 모델이 가장 많이 활용되고 있다⁶. CUMS 모델은 설치류를 다양한 사회 환경적 스트레스 요인에 노출시키면 불안, 긴장 및 우울증과 유사한 증상이 발생한다는 전제하에 작동합니다. 이 방법론은 몇 주에 걸쳐 동물을 다양한 경미한 스트레스 요인에 노출시켜 무쾌감증 및 우울과 같은 행동을 포함한 다양한 행동 변화를 초래하는 것을 포함합니다

프로토콜

실험 프로토콜은 내몽골 의과대학(YKD202301172)의 동물실험윤리위원회(Ethics of Animal Experiment Care Committee)의 승인을 받았으며, 미국 국립보건원(National Institutes of Health)의 동물 보호 및 윤리 지침을 준수했다. 동물 센터의 허가 번호는 NO.110324230102364187입니다. 생후 8주(200g ± 20g)인 24마리의 수컷 Sprague-Dawley(SD) 쥐를 획득하여 온도 22°C ± 2°C, 습도 55% ± 15%의 통제된 환경에서 사육했습니다. 쥐에게 설치류 유지 사료 식단과 침구용 옥수수 속대가 든 순수한 물을 먹이십시오. 쥐는 실험 전 1주일 동안 12시간/12시간 밝음/어둡음 주기를 받았습니다.

1. CUMS 랫트 모델 구축

1. 그룹화
   1. 24마리의 쥐를 무작위로 2개 그룹, 즉 고립이나 스트레스에 노출되지 않는 대조군(CON) 그룹과 모델(MOD) 그룹으로 나눕니다. 각 그룹에는 12마리의 쥐가 있습니다.
   2. 55cm x 40cm x 20cm 크기의 표준 케이지에 쥐를 수용하고 케이지 당 6 마리의 쥐를 수용하십시오. 달리 명시되지 않는 한 적응 기간 동안 케이지 할당을 유지하십시오.
   3. 각 ....

토론

우울증은 기분 저하, 즐거움 결핍, 에너지 감소와 같은 증상을 특징으로 하는 정신 장애입니다³⁰. 우울증 연구 분야에서는 신뢰할 수 있는 동물 모델을 확립하는 것이 치료적 개입을 발전시키는 데 매우 중요합니다. 다양한 동물모델 중에서도 CUMS 모델은 높은 신뢰성, 타당성, 그리고 인간 우울증의 특성과의 일치성으로 인해 특히 주목할 만하다³¹. 다양한 환경?.......

자료

Name	Company	Catalog Number	Comments
1.5 mL centrifuge tube	service Biotechnology Co., Ltd	EP-150-M
1000 µL Pipette	service Biotechnology Co., Ltd	IC021198160223
10 µL pipette tip	service Biotechnology Co., Ltd	IC012395160823
10 µL pipette tip	service Biotechnology Co., Ltd	TP-10
1250 µL pipette tip	service Biotechnology Co., Ltd	TP-1250
2 mL centrifuge tube	service Biotechnology Co., Ltd	EP-200-M
200 µL pipette tip	service Biotechnology Co., Ltd	TP-200
200 µL pipette tip	service Biotechnology Co., Ltd	IC021029160323
300 µL Multi-Channel Pipette	service Biotechnology Co., Ltd	IC091006161022
50 µL Pipette	service Biotechnology Co., Ltd	DS35110
Automatic plate washing machine	rayto Life Sciences Co., Ltd	RT-3100
Benchtop High-Speed Freezing Centrifuge	dalong construction Co., Ltd	D3024R
electronic balance	Mettler Toledo International Trade (Shanghai) Co., Ltd	ME203E/02
Electrothermal blast drying oven	Labotery Experimental Instrument Equipment Co., Ltd	GEL-70
Enzyme Label Detector	BioTeK Co., Ltd	Epoch
High Speed Tissue Grinder	service Biotechnology Co., Ltd	KZ--F
Horizontal Freezer	Mellow Group Co., Ltd	BCD-318AT
Laboratory Ultrapure Water Machine	Jinan Aiken Environmental Protection Technology Co., Ltd	AK-RO-C2
Morris water maze video trail analysing system	Tai Meng Tech Co., Ltd	WMT-200
Rat 5-HT ELISA Kit	Lian Ke bio Co., Ltd,China	96T/48T
SPF grade Sprague Dawley (SD) rats	SPF (Beijing) Biotechnology Co	SCXK(JING)2019-0010
Sprague Dawley rats	Beijing Biotechnology Co., Ltd, China	SCXK (JING) 2019-0010
Vertical Refrigerated Display Cabinet	Xingx Group Co., Ltd	LSC-316C
video tracking system	Tai Meng Tech Co., Ltd	ZH-ZFT
vortex mixer	Servicebio technology Co., Ltd	MV-100