أخذ عينات دم الوريد تحت الترقوة في الفئران الواعية

Summary

نقدم هنا مزيجا من القيود الفعالة للفئران وطرق ثقب الوريد تحت الترقوة التي تمكن من جمع الدم بسرعة وأمان وتكرار في الفئران دون تخدير.

Abstract

هناك العديد من الطرق المعمول بها للحصول على عينات دم متكررة من الفئران ، مع أكثر الطرق المستخدمة شيوعا هي أخذ عينات الوريد الجانبي بدون تخدير وأخذ عينات الوريد الوداجي مع التخدير. ومع ذلك ، فإن معظم هذه الطرق تتطلب المساعدة ومعدات التخدير وأحيانا تشكل صعوبات من حيث جمع الدم أو رداءة نوعية عينات الدم. بالإضافة إلى ذلك ، تستهلك طرق جمع الدم هذه وقتا كبيرا وموارد بشرية عندما يكون أخذ عينات الدم المتكررة مطلوبا لعدد كبير من الفئران. تقدم هذه الدراسة تقنية لأخذ عينات الدم المتكررة في الفئران غير المخدرة من قبل فرد واحد بارع. يمكن الحصول على عينات دم مرضية للغاية عن طريق ثقب الوريد تحت الترقوة. أظهرت الطريقة معدل نجاح إجمالي مثير للإعجاب بنسبة 95٪ ، مع متوسط وقت يبلغ 2 دقيقة فقط من ضبط الفئران إلى الانتهاء من جمع الدم. علاوة على ذلك ، فإن إجراء عمليات جمع دم متتالية ضمن النطاق المحدد لا يلحق أي ضرر بالفئران. هذه الطريقة تستحق الترويج لجمع الدم ، خاصة في دراسات الحرائك الدوائية واسعة النطاق.

Introduction

الفئران هي واحدة من أكثر التجارب شيوعا ، وهناك العديد من الطرق للحصول على عينات الدم. بالنسبة للتجارب التي تتضمن جمع دم واحد في المرحلة الختامية ، يمكن الحصول على كمية كافية من الدم من خلال ثقب القلب أو جمع الدم من الشريان الأورطي البطني¹. ومع ذلك ، تتطلب بعض الدراسات جمع الدم المتكرر من الفئران للدم الروتيني أو التحليل الكيميائي الحيوي ، خاصة في دراسات الحرائك الدوائية والسموم ، حيث يلزم جمع الدم المتكرر لتحديد امتصاص الأدوية وتوزيعها واستقلابها².

حاليا ، على الرغم من أن جمع الدم في الوريد الذيل هو الطريقة الأكثر شيوعا لأخذ عينات الدم من الفئران ، على الرغم من عدم الحاجة إلى التخدير ، إلا أن ....

Protocol

التزمت هذه الدراسة بالمبادئ التوجيهية الموضحة في الطبعة الثامنة من دليل رعاية واستخدام المختبر¹³. حصل البحث على موافقة من لجنة الأخلاقيات في مستشفى جامعة لانتشو الثاني وتم توثيقه وفقا لإرشادات REACH 2.0¹⁴. تم إيواء اثني عشر فأرا من Wistar الأصحاء (ستة ذكور تزن 290-330 جم وست إناث تزن 250-280 جم) تتراوح أعمارهم بين 12-16 أسبوعا في مختبر GLP للحيوانات بجامعة Lanzhou لمدة 3 أيام قبل التجربة الفعلية. كانت أقفاص الفئران المستخدمة من النوع R5 ، بقياس 545 مم × 395 مم × 200 مم ، وكانت مجهزة بمواد فراش معقم. تم تزويد جميع الفئران بإمكانية الوصول غير المقيد إلى كل من الطعام والماء. حافظ المختبر على متوسط رطوبة يبلغ 25٪ ، ومتوسط در....

النتائج

تظهر عينات البلازما عالية الجودة لونا أصفر باهتا ووضوحا وشفافية ، خالية من أي مسحة حمراء أو تخثر ، كما هو موضح في الشكل 2 أ. يوضح الشكل 2B انحلال الدم (الجانب الأيسر) أو التخثر (الجانب الأيمن) نتيجة لإجراءات غير لائقة ، على التوالي. على مدار 96 جلسة جمع دم في غضون.......

Discussion

على الرغم من أن جمع الدم في الوريد الذيل هو الطريقة الأكثر شيوعا لأخذ عينات الدم المتكررة في الفئران ، إلا أنه قد يتأثر بأدوية التخدير ، وبسبب صغر حجم الوريد الذيل ، فإن كمية الدم التي يمكن جمعها في حالة واحدة محدودة ، مما يؤدي إلى مدة أطول لجمع الدم ^4,5. على ال.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
0.75% normal saline	Gansu Fuzheng Pharmaceutical Technology Co., Ltd.	——	Prepared heparin sodium solution
1 mL Pasteur pipette	Biosharp	BS-XG-01-NS	Blood collection
1 mL syringe (26 G, 0.45 mm x 12 mm)	Shinva Medical Instrument Co.,Ltd.	0.45*12RWLB	Blood collection
1.5 mL Eppendorf tube	Biosharp	BS-15-M	Blood storage and collection
75% medical alcohol	Shandong Lircon Medical Technology Co., Ltd.	——	Disinfection of rat blood collection site
Centrifuge tube holder	Biosharp	BS-05/15-SM60	——
Electronic scale	Shanghai PUCHUN Measure Instrument Co., Ltd.	JE1002	Weigh
Heparin sodium injection	Hebei Changshan Biochemical Pharmaceutical Co., Ltd.	——	Rinse the syringe and EP tube; dilute with normal saline to 25 U/mL
Low temperature centrifuge	HuNan Xiang Yi Centrifuge Instrument  Co., Ltd.	H1750R	Separation of serum