의식이 있는 쥐의 쇄골하 정맥 혈액 샘플링

요약

여기에서는 마취 없이 쥐에서 빠르고 안전하며 반복적인 채혈을 가능하게 하는 효과적인 쥐 제한과 쇄골하 정맥 천자 방법의 조합을 제시합니다.

초록

쥐로부터 반복적인 혈액 샘플을 얻기 위한 몇 가지 확립된 방법이 있으며, 가장 일반적으로 사용되는 방법은 마취 없는 측면 꼬리 정맥 샘플링과 마취를 통한 경정맥 샘플링입니다. 그러나 이러한 방법의 대부분은 도움과 마취 장비가 필요하며 때로는 혈액 채취 또는 혈액 샘플의 품질이 좋지 않은 측면에서 어려움을 겪습니다. 또한 이러한 채혈 방법은 많은 수의 쥐에 대해 반복적인 혈액 샘플링이 필요할 때 상당한 시간과 인적 자원을 소비합니다. 이 연구는 숙련된 단일 개인이 마취되지 않은 쥐에서 반복적인 혈액 샘플링 기술을 제시합니다. 매우 만족스러운 혈액 샘플은 쇄골하 정맥에 구멍을 뚫어 얻을 수 있습니다. 이 방법은 쥐 억제에서 채혈 완료까지 평균 2분에 불과한 95%의 인상적인 전체 성공률을 보여주었습니다. 또한 지정된 범위 내에서 연속적인 채혈을 수행해도 쥐에게 해를 끼치 지 않습니다. 이 방법은 특히 대규모 약동학 연구에서 혈액 수집을 위해 홍보할 가치가 있습니다.

서문

쥐는 가장 흔한 실험 동물 중 하나이며 혈액 샘플을 얻는 방법에는 여러 가지가 있습니다. 최종 단계에서 단일 채혈을 포함하는 실험의 경우, 심장 천자 또는 복부 대동맥 채혈을 통해 충분한 양의 혈액을 얻을 수 있다¹. 그러나 일부 연구에서는 일상적인 혈액 또는 생화학적 분석을 위해 쥐의 반복적인 혈액 채취가 필요하며,^{특히 약물의} 흡수, 분포 및 대사를 결정하기 위해 반복적인 혈액 채취가 필요한 약동학 및 독성학 연구에서 2.

현재 꼬리 정맥 채혈이 쥐의 혈액 채취에 가장 일반적인 방법이지만 마취가 필요하지 않음에도 불구하고 이 방법은 반복적인 채혈이 어려울 수 있으며 채혈된 혈액의 양은 상대적으로 적습니다 ^3,4. 또한 복재정맥과 음경정맥에서 혈액을 채취할 수 있지만 채취하는 혈액의 양이 제한되어 있어 마취가 필요하다 ^1,5. 또한, 턱밑 정맥총과 설하정맥, 경정맥 및 쇄골하 정맥에서 채취한 혈액 샘플은 더 높은 품질의 샘플을 제공하지만, 일반적으로 ....

프로토콜

이 연구는 Guide for the Care and Use of Laboratory Animals¹³의 8판에 요약된 지침을 준수했습니다. 이 연구는 란저우 대학 제2병원 윤리위원회의 승인을 받았으며 ARRIVE 지침 2.0¹⁴를 준수하여 문서화되었습니다. 생후 12-16주 된 건강한 위스타 쥐 12마리(수컷 290-330g, 암컷 6마리)를 실제 실험 전 3일 동안 란저우 대학의 GLP 동물 실험실에 수용했습니다. 사용된 쥐 케이지는 545mm x 395mm x 200mm 크기의 R5 유형이었고 오토클레이브 침구 재료가 장착되었습니다. 모든 쥐는 음식과 물을 제한 없이 이용할 수 있었다. 실험실은 평균 습도 25%, 평균 온도 24°C, 낮과 밤이 번갈아 가며 빛의 주기(오전 7:00/오후 7:00)를 유지했습니다. 연구가 끝날 무렵, 모든 동물은 이소플루란을 과다 투여하여 인도적으로 안락사시켰다. 이 연구에 사용된 재료 및 도구에 대한 포괄적인 정보는 재료 표를 참조하십시오.

1. 표본 크기 계산 및 동물 선택

1. 방정식 (1)을 사용하여 동물 표본 ....

토론

꼬리 정맥 채혈은 쥐의 반복 혈액 채취를 위한 가장 일반적인 방법이지만, 마취제의 영향을 받을 수 있으며, 꼬리 정맥의 크기가 작기 때문에 한 번에 채취할 수 있는 혈액의 양이 제한되어 채혈 시간이 길어진다 ^4,5. 쥐 꼬리 정맥의 모세관 마이크로샘플링(CMS)과 결합된 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)-탠덤 질량분석법(MS/MS) 시스템은 쥐에서 사용되는 .......

자료

Name	Company	Catalog Number	Comments
0.75% normal saline	Gansu Fuzheng Pharmaceutical Technology Co., Ltd.	——	Prepared heparin sodium solution
1 mL Pasteur pipette	Biosharp	BS-XG-01-NS	Blood collection
1 mL syringe (26 G, 0.45 mm x 12 mm)	Shinva Medical Instrument Co.,Ltd.	0.45*12RWLB	Blood collection
1.5 mL Eppendorf tube	Biosharp	BS-15-M	Blood storage and collection
75% medical alcohol	Shandong Lircon Medical Technology Co., Ltd.	——	Disinfection of rat blood collection site
Centrifuge tube holder	Biosharp	BS-05/15-SM60	——
Electronic scale	Shanghai PUCHUN Measure Instrument Co., Ltd.	JE1002	Weigh
Heparin sodium injection	Hebei Changshan Biochemical Pharmaceutical Co., Ltd.	——	Rinse the syringe and EP tube; dilute with normal saline to 25 U/mL
Low temperature centrifuge	HuNan Xiang Yi Centrifuge Instrument  Co., Ltd.	H1750R	Separation of serum