Authors
Contact Us

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • النتائج
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

يصف هذا البروتوكول تحليل مخلفات مبيدات الآفات متعددة الفئات في أصناف الأفوكادو باستخدام طريقة Quick-E asy-Ch eap-E ffective-R ugged-S afe (QuEChERS) مع فورمات الأمونيوم ، تليها كروماتوغرافيا الغاز - مطياف الكتلة الترادفية.

Abstract

كروماتوغرافيا الغاز (GC) قياس الطيف الكتلي الترادفي (MS / MS) يقف كأداة تحليلية بارزة تستخدم على نطاق واسع لمراقبة بقايا مبيدات الآفات في الأغذية. ومع ذلك ، فإن هذه الطرق عرضة لتأثيرات المصفوفة (MEs) ، والتي يمكن أن تؤثر على القياس الكمي الدقيق اعتمادا على تركيبة محددة من التحليل والمصفوفة. ومن بين الاستراتيجيات المختلفة للتخفيف من MEs ، تمثل المعايرة المتطابقة مع المصفوفة النهج السائد في تطبيقات بقايا مبيدات الآفات نظرا لفعاليتها من حيث التكلفة وتنفيذها المباشر. في هذه الدراسة ، تم تحليل ما مجموعه 45 مبيد آفات تمثيلي في ثلاثة أنواع مختلفة من الأفوكادو (أي كريولو وهاس ولورينا) باستخدام طريقة Quick-E asy-Ch eap-E ffective-R ugged-S afe (QuEChERS) مع فورمات الأمونيوم و GC-MS / MS.

لهذا الغرض ، تم استخراج 5 غرام من عينة الأفوكادو مع 10 مل من الأسيتونيتريل ، ثم تمت إضافة 2.5 غرام من فورمات الأمونيوم للحث على فصل الطور. بعد ذلك ، خضع الطافي لعملية تنظيف عن طريق استخراج الطور الصلب المشتت باستخدام 150 مجم من MgSO4 اللامائي ، و 50 مجم من الأمين الأولي والثانوي ، و 50 مجم من أوكتاديسيلسيلان ، و 10 مجم من أسود الكربون الجرافيتي ، و 60 مجم من مادة ماصة قائمة على أكسيد الزركونيوم (Z-Sep +). تم إجراء تحليل GC-MS / MS بنجاح في أقل من 25 دقيقة. تم إجراء تجارب تحقق صارمة لتقييم أداء الطريقة. كشف فحص منحنى معايرة مطابق للمصفوفة لكل نوع من الأفوكادو أن ME ظل ثابتا نسبيا وأقل من 20٪ (يعتبر ME ناعما) لمعظم مجموعات مبيدات الآفات / الأصناف. وعلاوة على ذلك، كانت حدود القياس الكمي لهذه الطريقة أقل من 5 ميكروغرام/كغ لجميع الأصناف الثلاثة. وأخيرا، تقع قيم الاسترداد لمعظم مبيدات الآفات ضمن النطاق المقبول من 70-120٪، مع قيم الانحراف المعياري النسبي أقل من 20٪.

Introduction

في التحليل الكيميائي ، يمكن تعريف تأثير المصفوفة (ME) بطرق مختلفة ، ولكن التعريف العام المقبول على نطاق واسع هو كما يلي: يشير إلى التغيير في الإشارة ، وخاصة التغيير في ميل منحنى المعايرة عندما تكون مصفوفة العينة أو جزء منها موجودة أثناء تحليل مادة محددة تحليل. كجانب حاسم ، يتطلب ME إجراء تحقيق شامل أثناء عملية التحقق من صحة أي طريقة تحليلية ، لأنه يؤثر بشكل مباشر على دقة القياس الكمي للتحليلات المستهدفة1. من الناحية المثالية ، يجب أن يكون إجراء المعالجة المسبقة للعينة انتقائيا بدرجة كافية لتجنب استخراج أي مكونات من مصفوفة العينة. ومع ذلك ، على الرغم من الجهود الكبيرة ، لا يزال العديد من مكونات المصفوفة هذه ينتهي بها المطاف في أنظمة التحديد النهائي في معظم الحالات. وبالتالي ، غالبا ما تعرض مكونات المصفوفة هذه قيم الاسترداد والدقة للخطر ، وتحدث ضوضاء إضافية ، وتصعد التكلفة الإجمالية والعمالة التي تنطوي عليها الطريقة.

في كروماتوغرافيا الغاز (GC) ، ينشأ ME بسبب وجود مواقع نشطة داخل نظام GC ، والتي تتفاعل مع التحليلات المستهدفة من خلال آليات مختلفة. من ناحية ، تقوم مكونات المصفوفة بحجب أو إخفاء هذه المواقع النشطة التي من شأنها أن تتفاعل مع تحليلات الهدف ، مما يؤدي إلى تحسين الإشارة بشكل متكرر2. من ناحية أخرى ، قد تتسبب المواقع النشطة التي تظل دون عائق في ذروة المخلفات أو تحلل التحليل بسبب التفاعلات القوية ، مما يؤدي إلى ME سلبي. ومع ذلك ، يمكن أن يقدم هذا فوائد محتملة في بعض الحالات2. من الأهمية بمكان التأكيد على أن تحقيق الخمول الكامل في نظام GC يمثل تحديا كبيرا ، على الرغم من استخدام مكونات خاملة للغاية وصيانة مناسبة. مع الاستخدام المستمر ، يصبح تراكم مكونات المصفوفة في نظام GC أكثر وضوحا ، مما يؤدي إلى زيادة ME. في الوقت الحاضر ، من المعترف به على نطاق واسع أن التحليلات التي تحتوي على الأكسجين والنيتروجين والفوسفور والكبريت والعناصر المماثلة ، تظهر ME أكبر لأنها تتفاعل بسهولة مع هذه المواقع النشطة. على العكس من ذلك ، فإن المركبات عالية الاستقرار مثل الهيدروكربونات أو الهالوجينات العضوية لا تخضع لمثل هذه التفاعلات ولا تظهر ME يمكن ملاحظتها أثناء التحليل 2,3.

بشكل عام ، لا يمكن التخلص من ME بالكامل ، مما يؤدي إلى تطوير العديد من الاستراتيجيات للتعويض أو التصحيح عندما تكون الإزالة الكاملة لمكونات المصفوفة غير ممكنة. من بين هذه الاستراتيجيات ، تم توثيق استخدام المعايير الداخلية المخففة (ISs) ، أو واقيات التحليل ، أو المعايرة المتطابقة مع المصفوفة ، أو طريقة الإضافة القياسية ، أو تعديل تقنيات الحقن في الأدبيات العلمية1،2،4،5. كما أوصت إرشادات SANTE / 11312/2021 بهذه الاستراتيجيات6.

فيما يتعلق بتطبيق المعايرة المتطابقة مع المصفوفة للتعويض عن MEs ، تشمل تسلسلات العينات في المواقف العملية أنواعا متنوعة من الأطعمة أو عينات مختلفة من نفس السلعة. في هذه الحالة ، يتم افتراض أن استخدام أي عينة من نفس السلعة سيعوض بشكل فعال عن ME في جميع العينات. ومع ذلك ، هناك نقص في الدراسات الكافية في الأدبيات الموجودة التي تحقق على وجه التحديد في هذه المسألة7.

يشكل تحديد المخلفات المتعددة لمبيدات الآفات في المصفوفات التي تحتوي على نسبة كبيرة من الدهون والأصباغ مهمة صعبة. يمكن أن تؤثر الكمية الكبيرة من المواد المستخرجة بشكل كبير على كفاءة الاستخراج وتتداخل مع التحديد الكروماتوغرافي اللاحق ، مما قد يؤدي إلى إتلاف العمود والمصدر والكاشف ، مما يؤدي إلى MEs8،9،10 كبير. وبالتالي ، فإن تحليل مبيدات الآفات عند مستويات ضئيلة في هذه المصفوفات يستلزم انخفاضا كبيرا في مكونات المصفوفة قبل التحليل مع ضمان قيم استرداد عالية7. يعد الحصول على قيم استرداد عالية أمرا بالغ الأهمية لضمان بقاء تحليلات مبيدات الآفات موثوقة ودقيقة ومتوافقة مع المعايير التنظيمية. وهذا أمر حيوي لضمان سلامة الأغذية وحماية البيئة واتخاذ القرارات المستنيرة في الزراعة والمجالات ذات الصلة.

الأفوكادو هو ثمرة ذات قيمة تجارية عالية تزرع في المناخات الاستوائية والمتوسطية في جميع أنحاء العالم وتستهلك على نطاق واسع في كل من مناطقها الأصلية وفي أسواق التصدير العديدة. من وجهة النظر التحليلية ، الأفوكادو عبارة عن مصفوفة معقدة تحتوي على عدد كبير من الأحماض الدهنية (أي الأوليك ، النخيلي ، واللينوليك) ، على غرار المكسرات ، ومحتوى صبغي كبير ، كما هو الحال في الأوراق الخضراء ، وكذلك السكريات والأحماض العضوية ، على غرار تلك الموجودة في الفواكه الأخرى11. نظرا لطبيعتها الدهنية ، يجب إيلاء اهتمام خاص عند استخدام أي طريقة تحليلية للتحليل. في حين تم إجراء تحليل بقايا مبيدات الآفات على الأفوكادو باستخدام GC-MS في بعض الحالات8،12،13،14،15،16،17،18،19،20 ، فقد كان أقل تواترا نسبيا مقارنة بالمصفوفات الأخرى. في معظم الحالات ،تم تطبيق نسخة من طريقة Quick-E asy-Ch eap-E ffective-R ugged-S afe (QuEChERS) 8،12،13،14،15،16،17،18. لم تحقق أي من هذه الدراسات في اتساق MEs بين أنواع الأفوكادو المختلفة.

لذلك ، كان الهدف من هذا العمل هو دراسة اتساق MEs وقيم الاسترداد ل 45 مبيد آفات تمثيلي عبر أنواع مختلفة من الأفوكادو (مثل Criollo و Hass و Lorena) باستخدام طريقة QuEChERS مع فورمات الأمونيوم و GC-MS / MS. على حد علمنا ، هذه هي المرة الأولى التي يتم فيها إجراء هذا النوع من الدراسة على عينات المصفوفة الدهنية هذه.

Protocol

1. إعداد المخزون وحلول العمل

ملاحظة: لأسباب تتعلق بالسلامة ، ينصح بارتداء قفازات النتريل ومعطف المختبر ونظارات السلامة طوال البروتوكول.

  1. إعداد محاليل المخزون الفردية لكل معيار من معايير مبيدات الآفات التجارية البالغ عددها 45 معيارا (انظر جدول المواد) عند حوالي 1000 مجم / لتر في الأسيتونيتريل في قوارير حجمية سعة 10 مل.
  2. اجمع بين حلول المخزون الفردية المذكورة أعلاه لإعداد محلول مخزون 400 مجم / لتر في الأسيتونيتريل في دورق حجمي سعة 25 مل.
    ملاحظة: سيتم استخدام هذا الحل المختلط لإعداد حلول العمل لتجارب الاسترداد والمعايرة.
  3. تحضير محاليل مخزون من الأترازين-د5 وثلاثي فينيل الفوسفات (TPP) بتركيزات 750 ملغم/لتر و1050 ملغم/لتر، على التوالي، في الأسيتونيتريل في قوارير حجمية سعة 10 مل. استخدم atrazine-d5 كمعيار داخلي إجرائي (P-IS) و TPP كمعيار داخلي للحقن (I-IS).
    ملاحظة: ينطوي السيناريو المثالي على استخدام معيار داخلي موسوم نظائريا لكل تحليل مستهدف محدد.
  4. تحضير محاليل استعادة المخزون في الأسيتونيتريل المحتوي على 0.05٪ (v / v) من حمض الفورميك (لمنع التحلل) في قوارير حجمية سعة 10 مل لإنتاج مكافئات عينة 10 و 100 و 400 ميكروغرام / كجم لمبيدات الآفات و 200 ميكروغرام / كجم ل P-IS بشكل منفصل. قم بتخزين هذه المحاليل في قوارير زجاجية كهرمانية في الظلام عند -20 درجة مئوية.
  5. تحضير محاليل معايرة المبيدات و P-IS معا في الأسيتونيتريل مع 0.05٪ (v / v) من حمض الفورميك في قوارير حجمية سعة 10 مل لإنتاج 5 و 10 و 25 و 75 و 200 و 400 و 600 ميكروغرام / كجم و 200 نانوغرام / نانوغرام على التوالي ، وتخزينها في قوارير زجاجية كهرمانية في الظلام عند -20 درجة مئوية.
    ملاحظة: يمكن استخدام نفس الحلول في جميع أنحاء العمل التجريبي ولكن تخزينها في ظل الظروف المحددة مباشرة بعد كل استخدام أمر ضروري.
  6. تحضير خليط من واقيات المادة المراد تحليلها تحتوي على 100 جم / لتر من 3-إيثوكسي-1،2-بروبانديول ، و 10 جم / لتر من حمض إل-جولونيك γ-لاكتون ، و 10 جم / لتر من د-سوربيتول ، و 5 جم / لتر من حمض الشيكيميك بنسبة 4/1 (v / v) من الأسيتونيتريل إلى الماء مع 0.5٪ (v / v) من حمض الفورميك.
    ملاحظة: يجب إضافة هذا الخليط من واقيات التحليل قبل الحقن مباشرة لتخفيفي.

2. جمع العينات

  1. اجمع عينات من ثلاثة أنواع من الأفوكادو (مثل كريولو وهاس ولورينا) المتوفرة في محلات السوبر ماركت. تأكد من أن كل عينة تزن حوالي 1 كجم ، وهو ما يكفي لإجراء جميع الدراسات اللاحقة وتتماشى مع التوجيه 2002/63 / CE21.
    ملاحظة: تم اختيار العينات العضوية بشكل تفضيلي لتقليل احتمالية وجود بقايا المبيدات.
  2. نقل عينات الأفوكادو المجمعة إلى المختبر ، وتجانسها بشكل فردي بدون الأنبوب باستخدام المروحية (انظر جدول المواد). قم بتخزين العينات المتجانسة في عبوات زجاجية كهرمانية على حرارة 4 درجات مئوية حتى التحليل.
    ملاحظة: سيتم استخدام نفس عينات الأفوكادو طوال فترة الدراسة بأكملها. لذلك ، من الضروري تخزينها في ظل الظروف المحددة مباشرة بعد كل استخدام.

3. تحضير العينة باستخدام طريقة QuEChERS مع فورمات الأمونيوم

ملاحظة: يوضح الشكل 1 تمثيلا تخطيطيا لطريقة QuEChERS باستخدام فورمات الأمونيوم.

  1. وزن 5 غرام من كل عينة أفوكادو في أنبوب طرد مركزي سعة 50 مل (انظر جدول المواد).
  2. أضف 50 ميكرولتر من محلول P-IS للحصول على تركيز 200 ميكروغرام / كجم. لتقييم الاسترداد، أضف أيضا محاليل مبيدات الآفات المحضرة في الخطوة 1.4 لإنتاج تركيزات 10 و 100 و 400 ميكروغرام / كجم (ن = 5 لكل منها).
  3. دوامة الأنبوب لمدة 30 ثانية لضمان التكامل الشامل للسنبلة في العينة.
  4. أضف 10 مل من الأسيتونيتريل إلى أنبوب الطرد المركزي. هز الأنبوب عند 70 دورة في الدقيقة لمدة 5 دقائق.
  5. أضف 2.5 غرام من فورمات الأمونيوم ، وهز الأنبوب مرة أخرى عند 70 دورة في الدقيقة لمدة 5 دقائق ، ثم قم بطرده عند 1800 × جم لمدة 5 دقائق.
  6. إلى أنبوب طرد مركزي سعة 2 مل يحتوي على 150 مجم من MgSO4 اللامائي ، و 50 مجم من الأمين الثانوي الأولي (PSA) ، و 50 مجم من أوكتاديسيلسيلان (C18) ، و 10 مجم من أسود الكربون الجرافيتي (GCB) ، و 60 مجم من مادة ماصة قائمة على أكسيد الزركونيوم Z-Sep + ، أضف 1 مل من المستخلص للتنقية باستخدام استخراج الطور الصلب المشتت (d-SPE). دوامة الأنبوب لمدة 30 ثانية وأجهزة الطرد المركزي عند 1800 × جم لمدة 5 دقائق.
  7. نقل 200 ميكرولتر من المستخلص إلى قنينة أخذ العينات الأوتوماتيكية، وإضافة 20 ميكرولتر من محلول الحماية المراد تحليله المحضر في الخطوة 1.6، وتضمين 50 ميكرولتر من محلول TPP.
  8. إجراء تحليل آلي باستخدام نظام GC-MS/MS (انظر القسم 4).
  9. قم بإجراء معايرة مطابقة للمصفوفة باتباع نفس الإجراء الموضح أعلاه ، باستخدام مستخلصات فارغة ، باستثناء ، أثناء خطوة d-SPE (الخطوة 3.6) ، قم بتنظيف 5 مل من المادة الطافية في أنابيب سعة 15 مل. أضف حلول spike و P-IS في الخطوة 3.7. أضف حلول معيار المعايرة إلى قوارير أخذ العينات الأوتوماتيكية لإنتاج 5 و 10 و 25 و 50 و 100 و 200 و 400 و 600 ميكروغرام / كجم ، جنبا إلى جنب مع TPP ، مما ينتج عنه حجم نهائي يبلغ 270 ميكرولتر.
    ملاحظة: بشكل عام ، تأكد من إنشاء منحنيات معايرة متطابقة مع المصفوفة لكل نوع من أنواع الأفوكادو بالإضافة إلى معايرة الأسيتونيتريل فقط.

4. التحليل الآلي باستخدام GC-MS / MS

  1. إجراء التحليلات باستخدام نظام GC-MS / MS مع رباعي ثلاثي الأقطاب (TQ) مجهز بواجهة تأين الإلكترون (-70 eV) وأخذ عينات تلقائي (انظر جدول المواد).
  2. استخدم عمود MS GC (رابطة السيليكا بطول 30 مترا ، قطر داخلي 0.25 مم ، سمك فيلم 0.25 ميكرومتر) جنبا إلى جنب مع الهيليوم عالي النقاء كغاز حامل بمعدل تدفق ثابت يبلغ 1.2 مل / دقيقة.
  3. تحقق من المعلمات التالية قبل متابعة تشغيل الجهاز:
    1. تأكد من صحة ضغوط الغاز: الهيليوم عند 140 رطل لكل بوصة مربعة والأرجون عند 65 رطل / بوصة مربعة.
    2. تحقق من حالة زيت المضخة الدوارة للتأكد من أنه واضح وعلى المستوى المناسب.
    3. تأكد من أن حقنة الحقن لا تحتوي على أي عوائق من الحقن السابقة.
    4. تأكد من أن قوارير الغسيل تحتوي على كمية كافية من كل مذيب.
    5. تأكد من أن عداد المواد الاستهلاكية (الحاجز ، البطانة) لم يصل إلى الحد الأقصى.
  4. قم بتشغيل مفتاح GC الرئيسي الموجود على اللوحة الأمامية وقم بتشغيل مفتاح MS الموجود في الخلف.
  5. افتح برنامج GCMS للتحليل في الوقت الفعلي الذي يتحكم في جميع معلمات نظام GC-MS/MS.
    ملاحظة: يتضمن نظام الأجهزة برنامج GCMS للتحليل في الوقت الفعلي بشكل افتراضي.
  6. انقر فوق التحكم في الفراغ | متقدم | مضخة دوارة 1 لبدء نظام التفريغ.
    ملاحظة: في هذه النافذة ، راقب الضغط لتحديد قيم الفراغ المثلى ، والتي يجب أن تكون أقل من 9.0 باسكال. سوف يستغرق حوالي 12 ساعة.
  7. انقر فوق ابدأ لتشغيل المضخة الجزيئية التوربينية 1 والمضخة الجزيئية التوربينية 2.
  8. انقر فوق ابدأ للحصول على خيار سخان مصدر الأيونات .
    ملاحظة: بعد وقت موصى به قدره 1 ساعة ، تحقق من فراغ النظام للتأكد من أن القيمة الموصى بها أقل من 1.6e-3 باسكال.
  9. اضبط درجة حرارة واجهة MS على 250 درجة مئوية ودرجة حرارة مصدر الأيونات على 300 درجة مئوية.
  10. حافظ على فرن GC عند درجة حرارة أولية تبلغ 50 درجة مئوية لمدة 1 دقيقة ، ثم قم برفعه حتى 180 درجة مئوية بمعدل 25 درجة مئوية / دقيقة. بعد ذلك ، قم بزيادة درجة الحرارة إلى 230 درجة مئوية عند 5 درجات مئوية / دقيقة ثم إلى 290 درجة مئوية عند 25 درجة مئوية / دقيقة. أخيرا ، حافظ على درجة حرارة ثابتة عند 290 درجة مئوية لمدة 6 دقائق. إجمالي وقت التحليل هو 24.6 دقيقة.
  11. انقر فوق إغلاق بمجرد تشغيل جميع هذه الأنظمة.
  12. انقر فوق خيار الضبط من برنامج التحليل وانقر فوق Peak Monitor View لإجراء تحقق أولي من ظروف مطياف الكتلة.
    ملاحظة: إذا لزم الأمر، قم بإجراء الضبط التلقائي.
  13. انقر فوق اكتساب ، ومن النافذة المعروضة ، انقر فوق تنزيل المعلمات الأولية. تحقق من أن الجهاز جاهز GC وجاهز MS.

5. الحصول على البيانات

  1. انقر فوق ملف دفعي جديد من البرنامج وقم بإنشاء تسلسل يحتوي على معلومات مثل اسم العينة ومعرف العينة وملف الطريقة وملف البيانات وحجم الحقن وملف الضبط. أضف صفوفا حسب الضرورة وانقر فوق حفظ.
  2. انقر فوق بدء الدفعة واترك عملية الحقن تبدأ.
  3. قم بإجراء الحقن عند 250 درجة مئوية في الوضع غير المقسم ، مع الحفاظ على حجم حقن يبلغ 1 ميكرولتر. بعد 1 دقيقة بعد الحقن ، افتح الانقسام.
    ملاحظة: بين الحقن ، تأكد من تنظيف المحقنة سعة 10 ميكرولتر بالميثانول وخلات الإيثيل والأسيتونيتريل ، باستخدام شطف واحد مع كل مذيب. يتم تنفيذ جميع الحقن في ثلاث نسخ.
  4. تحليل التحليلات باستخدام وضع مراقبة التفاعل المتعدد (MRM) ، وهو الوضع القياسي المستخدم في أنظمة MS / MS مع TQ.
    ملاحظة: يقدم الجدول 1 أوقات الاستبقاء (بالدقائق) وانتقالات الكمية والمؤهلة لمبيدات الآفات متعددة الفئات ، P-IS ، و I-IS. يعتمد التحليل الكمي على نسبة منطقة الذروة لأيون القياس الكمي إلى أيون P-IS. يتم استخدام I-IS لمراقبة الجودة أثناء الحقن. يحتوي الملف التكميلي 1 على كروماتوجرام لجميع مبيدات الآفات ال 45 التي تم تحليلها.
  5. افتح برنامج تحليل ما بعد التشغيل لتحليل البيانات.
    ملاحظة: يتضمن نظام الأجهزة برنامج تحليل ما بعد التشغيل GCMS تلقائيا.
  6. انقر فوق الحقن المراد تحليله ، وانتقل عبر الجدول الذي يحتوي على التحليلات ، وحدد ذروة الاهتمام.
  7. انقر فوق الذروة أو المنطقة محل الاهتمام لتصور الكروماتوجرام. راجع عمليات تكامل الذروة، وإذا لزم الأمر، قم بإجراء التكامل اليدوي. تحقق من مناطق جميع التحليلات لإجراء الحسابات اللازمة وتقييم الطريقة.

النتائج

تم إجراء التحقق الشامل من الطريقة التحليلية وفقا للمبادئ التوجيهية6 ل SANTE / 11312/2021 ، بما في ذلك تقييمات الخطية ، ME ، الاسترداد ، والتكرار.

بالنسبة لتقييم الخطية ، تم إنشاء منحنيات معايرة متطابقة مع المصفوفة باستخدام عينات فارغة مسننة عند مستويات تركيز متعددة (تتر...

Discussion

ينشأ القيد الأساسي المرتبط بالمعايرة المتطابقة مع المصفوفة من استخدام العينات الفارغة كمعايير للمعايرة. وهذا يؤدي إلى زيادة عدد العينات التي يتعين معالجتها للتحليل وزيادة حقن مكونات المصفوفة في كل تسلسل تحليلي ، مما قد يؤدي إلى ارتفاع متطلبات صيانة الأجهزة. ومع ذلك ، فإن هذه الاستراتيجي...

Disclosures

ليس لدى المؤلفين أي تضارب في المصالح للكشف عنه.

Acknowledgements

نود أن نشكر جامعة EAN وجامعة لا لاغونا.

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
3-Ethoxy-1,2-propanediolSigma Aldrich260428-1G
AcetonitrileMerk1006652500
Ammonium formateSigma Aldrich156264-1KG
AOAC 20i/s autosamplerShimadzu221-723115-58
Automatic shaker MX-T6-PROSCILOGEX8.23222E+11
BalanceOHAUSPA224
Centrifuge tubes, 15 mLNest601002
Centrifuge tubes, 2 mLEppendorf4610-1815
Centrifuge tubes, 50 mLNest602002
Centrifuge Z206AMERMLE6019500118
Choper 2LOster2114111
Column SH-Rxi-5sil MS, 30 m x 0.25 mm, 0.25 µmShimadzu221-75954-30MS GC column 
Dispensette 5-50 mLBRAND4600361
DSC-18Sigma Aldrich52600-U
D-SorbitolSigma Aldrich240850-5G
Ethyl acetateMerk1313181212
GCMS-TQ8040 Shimadzu211552
Graphitized carbon blackSigma Aldrich57210-U
Injection syringeShimadzuLC2213461800
L-Gulonic acid γ-lactoneSigma Aldrich310301-5G
Linner splitlessShimadzu221-4887-02
Magnesium sulfate anhydrusSigma AldrichM7506-2KG
MethanolPanreac131091.12.12
Milli-Q ultrapure (type 1) waterMilliporeF4H4783518
Pipette tips 10 - 100 µLBiologix200010
Pipette tips 100 - 1000 µLBrand541287
Pipette tips 20 - 200 µLBrand732028
Pipettes PasteurNORMAX5426023
Pippette Transferpette S variabel 10 - 100 µLBRAND704774
Pippette Transferpette S variabel 100 - 1000 µLBRAND704780
Pippette Transferpette S variabel 20 - 200 µLSCILOGEX7.12111E+11
Primary-secondary amineSigma Aldrich52738-U
Shikimic acidSigma AldrichS5375-1G
Syringe Filter PTFE/L 25 mm, 0.45 µmNORMAXFE2545I
Triphenyl phosphate (QC)Sigma Aldrich241288-50G
Vials with fused-in insertSigma Aldrich29398-U
Z-SEP+Sigma Aldrich55299-Uzirconium oxide-based sorbent
PesticidesCAS registry number
4,4´-DDDSigma Aldrich35486-250MG72-54-8
4,4´-DDESigma Aldrich35487-100MG72-55-9
4,4´-DDTSigma Aldrich31041-100MG50-29-3
AlachlorSigma Aldrich45316-250MG15972-60-8
AldrinSigma Aldrich36666-25MG309-00-2
AtrazineSigma Aldrich45330-250MG-R1912-24-9
Atrazine-d5 (IS)Sigma Aldrich34053-10MG-R163165-75-1
BuprofezinSigma Aldrich37886-100MG69327-76-0
CarbofuranSigma Aldrich32056-250-MG1563-66-2
ChlorprophamSigma Aldrich45393-250MG101-21-3
ChlorpyrifosSigma Aldrich45395-100MG2921-88-2
Chlorpyrifos-methylSigma Aldrich45396-250MG5598-13-0
DeltamethrinSigma Aldrich45423-250MG52918-63-5
DichloranSigma Aldrich45435-250MG99-30-9
DichlorvosSigma Aldrich45441-250MG62-73-7
DieldrinSigma Aldrich33491-100MG-R60-57-1
DiphenylamineSigma Aldrich45456-250MG122-39--4
Endosulfan ASigma Aldrich32015-250MG115-29-7
EndrinSigma Aldrich32014-250MG72-20-8
EPNSigma Aldrich36503-100MG2104-64-5
EsfenvalerateSigma Aldrich46277-100MG66230-04-4
EthionSigma Aldrich45477-250MG563-12-2
FenamiphosSigma Aldrich45483-250MG22224-92-6
FenitrothionSigma Aldrich45487-250MG122-14-5
FenthionSigma Aldrich36552-250MG55-38-9
FenvalerateSigma Aldrich45495-250MG51630-58-1
HCBSigma Aldrich45522-250MG118-74-1
IprodioneSigma Aldrich36132-100MG36734-19-7
LindaneSigma Aldrich45548-250MG58-89-9
MalathionSigma Aldrich36143-100MG121-75-5
MetalaxylSigma Aldrich32012-100MG57837-19-1
MethidathionSigma Aldrich36158-100MG950-37-8
MyclobutanilSigma Aldrich34360-100MG88671-89-0
OxyfluorfenSigma Aldrich35031-100MG42874-03-3
Parathion-methylSigma Aldrich36187-100MG298-00-0
PenconazolSigma Aldrich36189-100MG66246-88-6
Pirimiphos-methylSigma Aldrich32058-250MG29232-93-7
PropiconazoleSigma Aldrich45642-250MG60207-90-1
PropoxurSigma Aldrich45644-250MG114-26-1
PropyzamideSigma Aldrich45645-250MG23850-58-5
PyriproxifenSigma Aldrich34174-100MG95737-68-1
Tolclofos-methylSigma Aldrich31209-250MG5701804-9
TriadimefonSigma Aldrich45693-250MG43121-43-3
TriflumizoleSigma Aldrich32611-100MG68694-11-1
α-HCHSigma Aldrich33377-50MG319-86-8
β-HCHSigma Aldrich33376-100MG319-85-7

References

  1. Raposo, F., Barceló, D. Challenges and strategies of matrix effects using chromatography-mass spectrometry: An overview from research versus regulatory viewpoints. Trends Analyt Chem. 134, 116068 (2021).
  2. Rahman, M. M., Abd El-Aty, A. M., Shim, J. H. Matrix enhancement effect: a blessing or a curse for gas chromatography?-A review. Anal Chim Acta. 801, 14-21 (2013).
  3. Poole, C. F. Matrix-induced response enhancement in pesticide residue analysis by gas chromatography. J Chromatogr A. 1158 (1-2), 241-250 (2007).
  4. Anastassiades, M., Maštovská, K., Lehotay, S. J. Evaluation of analyte protectants to improve gas chromatographic analysis of pesticides. J Chromatogr A. 1015 (1-2), 163-184 (2003).
  5. Trufelli, H., Palma, P., Famiglini, G., Cappiello, A. An overview of matrix effects in liquid chromatography-mass spectrometry. Mass Spectrom Reviews. 30 (3), 491-509 (2011).
  6. European Commission SANTE/11312/2021. Guidance document on analytical quality control and method validation procedures for pesticide residues analysis in food and feed. European Commission. , (2021).
  7. Kwon, H., Lehotay, S. J., Geis-Asteggiante, L. Variability of matrix effects in liquid and gas chromatography-mass spectrometry analysis of pesticide residues after QuEChERS sample preparation of different food crops. J Chromatogr A. 1270, 235-245 (2012).
  8. Lehotay, S. J., Maštovská, K., Yun, S. J. Evaluation of two fast and easy methods for pesticide residue analysis in fatty food matrixes. J AOAC Int. 88 (2), 630-638 (2005).
  9. González-Curbelo, M. &. #. 1. 9. 3. ;., González-Sálamo, J., Varela-Martínez, D. A., Hernández-Borges, J. Analysis of pesticide residues in pollen and dairy products. Sustainable Agriculture Reviews 47. 47, 47-89 (2020).
  10. Madej, K., Kalenik, T. K., Piekoszewski, W. Sample preparation and determination of pesticides in fat-containing foods. Food Chem. 269, 527-541 (2018).
  11. Yanty, N. A. M., Marikkar, J. M. N., Long, K. Effect of varietal differences on composition and thermal characteristics of avocado oil. J Am Oil Chem Soc. 88, 1997-2003 (2011).
  12. Pano-Farias, N. S., Ceballos-Magaña, S. G., Muniz-Valencia, R., Gonzalez, J. Validation and assessment of matrix effect and uncertainty of a gas chromatography coupled to mass spectrometry method for pesticides in papaya and avocado samples. J Food Drug Anal. 25 (3), 501-509 (2017).
  13. Pano-Farias, N. S., Ceballos-Magaña, S. G., Jurado, J. M., Aguayo-Villarreal, I. A., Muñiz-Valencia, R. Analytical method for pesticides in avocado and papaya by means of ultra-high performance liquid chromatography coupled to a triple quadrupole mass detector: Validation and uncertainty assessment. J Food Sci. 83 (8), 2265-2272 (2018).
  14. Pano-Farias, N. S., Ceballos-Magaña, S. G., Gonzalez, J., Jurado, J. M., Muñiz-Valencia, R. Supercritical fluid chromatography with photodiode array detection for pesticide analysis in papaya and avocado samples. J Sep Sci. 38 (7), 1240-1247 (2015).
  15. Lozano, A., Rajski, &. #. 3. 2. 1. ;., Uclés, S., Belmonte-Valles, N., Mezcua, M., Fernández-Alba, A. R. Evaluation of zirconium dioxide-based sorbents to decrease the matrix effect in avocado and almond multiresidue pesticide analysis followed by gas chromatography tandem mass spectrometry. Talanta. 118, 68-83 (2014).
  16. Han, L., Matarrita, J., Sapozhnikova, Y., Lehotay, S. J. Evaluation of a recent product to remove lipids and other matrix co-extractives in the analysis of pesticide residues and environmental contaminants in foods. J Chromatogr A. 1449, 17-29 (2016).
  17. Chamkasem, N., Ollis, L. W., Harmon, T., Lee, S., Mercer, G. Analysis of 136 pesticides in avocado using a modified QuEChERS method with LC-MS/MS and GC-MS/MS. J Agric Food Chem. 61 (10), 2315-2329 (2013).
  18. Rajski, &. #. 3. 2. 1. ;., Lozano, A., Uclés, A., Ferrer, C., Fernández-Alba, A. R. Determination of pesticide residues in high oil vegetal commodities by using various multi-residue methods and clean-ups followed by liquid chromatography tandem mass spectrometry. J Chromatogr A. 1304, 109-120 (2013).
  19. Hernández-Borges, J., Ravelo-Pérez, L. M., Hernández-Suárez, E. M., Carnero, A., Rodríguez-Delgado, M. &. #. 1. 9. 3. ;. Analysis of abamectin residues in avocados by high-performance liquid chromatography with fluorescence detection. J Chromatogr A. 1165 (1-2), 52-57 (2007).
  20. Moreno, J. F., Liébanas, F. A., Frenich, A. G., Vidal, J. M. Evaluation of different sample treatments for determining pesticide residues in fat vegetable matrices like avocado by low-pressure gas chromatography-tandem mass spectrometry. J Chromatogr A. 1111 (1), 97-105 (2006).
  21. . Commission Directive 2002/63/EC of 11 July 2002 establishing Community methods of sampling for the official control of pesticide residues in and on products of plant and animal origin and repealing Directive 79/700/EEC. Official Journal of the European Union. L187, 30-43 (2002).
  22. . European Regulation, 396/2005, Regulation (EC) NO 396/2005 of the European Parliament and of the Council of 23 February 2005 on maximum residue levels of pesticides in or on food and feed of plant and animal origin and amending Council Directive 91/414/EEC. Official Journal of the European Union. L70, 1-16 (2005).
  23. González-Curbelo, M. &. #. 1. 9. 3. ;., Lehotay, S. J., Hernández-Borges, J. Validation of a modified QuEChERS version for high-throughput analysis of a wide range of pesticides in foods. Abstracts of Papers of the American Chemical Society. 246, (2013).
  24. González-Curbelo, M. &. #. 1. 9. 3. ;., Lehotay, S. J., Hernández-Borges, J., Rodríguez Delgado, J. Ammonium formate buffer in QuEChERS for high throughput analysis of pesticides in food by fast, low-pressure GC-MS/MS and LC-MS/MS. Abstracts of Papers of the American Chemical Society. 248, (2014).
  25. González-Curbelo, M. &. #. 1. 9. 3. ;., Lehotay, S. J., Hernández-Borges, J., Rodríguez-Delgado, M. &. #. 1. 9. 3. ;. Use of ammonium formate in QuEChERS for high-throughput analysis of pesticides in food by fast, low-pressure gas chromatography and liquid chromatography tandem mass spectrometry. J Chromatogr A. 1358, 75-84 (2014).
  26. Varela-Martínez, D. A., González-Sálamo, J., González-Curbelo, M. &. #. 1. 9. 3. ;., Quick Hernández-Borges, J. Quick, easy, cheap, effective, rugged, and safe (QuEChERS) extraction. Handbooks in Separation Science. , 399-437 (2020).
  27. González-Curbelo, M. &. #. 1. 9. 3. ;. Analysis of organochlorine pesticides in a soil sample by a modified QuEChERS approach using ammonium formate. J Vis Exp. 191, e64901 (2023).
  28. González-Curbelo, M. &. #. 1. 9. 3. ;., Dionis-Delgado, S., Asensio-Ramos, M., Hernández-Borges, J. Pesticide analysis in toasted barley and chickpea flours. J Sep Sci. 35 (2), 299-307 (2012).
  29. Varela-Martínez, D. A., González-Curbelo, M. &. #. 1. 9. 3. ;., González-Sálamo, J., Hernández-Borges, J. High-throughput analysis of pesticides in minor tropical fruits from Colombia. Food Chem. 280, 221-230 (2019).
  30. Li, L., Li, W., Qin, D. M., Jiang, S. R., Liu, F. M. Application of graphitized carbon black to the QuEChERS method for pesticide multiresidue analysis in spinach. J AOAC Int. 92 (2), 538-547 (2009).

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

QuEChERS GC MS MS

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Contact Us

Recommend to library

JoVE NEWSLETTERS

Research

Education

Authors

Librarians

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved