Avokado Çeşitlerinde Bulunan 45 Pestisitin QuEChERS Yöntemi ve Gaz Kromatografisi-Tandem Kütle Spektrometresi ile Belirlenmesi

Özet

Mevcut protokol, avokado çeşitlerinde çok sınıflı pestisit kalıntılarının Quick-E asy-Ch eap-E etkili-Rugged-S afe (QuEChERS) yöntemi kullanılarak amonyum format ile analizini ve ardından gaz kromatografisi-tandem kütle spektrometresini açıklamaktadır.

Özet

Gaz kromatografisi (GC) tandem kütle spektrometresi (MS/MS), gıdalardaki pestisit kalıntılarının gözetimi için yaygın olarak kullanılan önde gelen bir analitik araçtır. Bununla birlikte, bu yöntemler, analit ve matrisin spesifik kombinasyonuna bağlı olarak doğru miktar tayinini potansiyel olarak etkileyebilen matris etkilerine (ME'ler) karşı savunmasızdır. ME'leri azaltmaya yönelik çeşitli stratejiler arasında, matris uyumlu kalibrasyon, maliyet etkinliği ve basit uygulaması nedeniyle pestisit kalıntı uygulamalarında hakim yaklaşımı temsil eder. Bu çalışmada, üç farklı avokado çeşidinde (yani Criollo, Hass ve Lorena) toplam 45 temsili pestisit, Quick-E asy-Ch eap-E etkili-Rugged-S afe (QuEChERS) yöntemi kullanılarak amonyum format ve GC-MS/MS ile analiz edilmiştir.

Bu amaçla, 5 g avokado numunesi 10 mL asetonitril ile ekstrakte edildi ve daha sonra faz ayrımını indüklemek için 2.5 g amonyum format ilave edildi. Daha sonra, süpernatant, 150 mg susuz_MgS4, 50 mg birincil-ikincil amin, 50 mg oktadesilsilan, 10 mg grafitleştirilmiş karbon siyahı ve 60 mg zirkonyum oksit bazlı sorbent (Z-Sep+) kullanılarak dağıtıcı katı faz ekstraksiyonu yoluyla bir temizleme işlemine tabi tutuldu. GC-MS/MS analizi 25 dakikadan daha kısa bir sürede başarıyla gerçekleştirildi. Yöntemin performansını değerlendirmek için titiz doğrulama deneyleri yapılmıştır. Her bir avokado çeşidi için matris eşleştirilmiş bir kalibrasyon eğrisinin incelenmesi, ME'nin çoğu pestisit / çeşit kombinasyonu için nispeten tutarlı ve %20'den az (yumuşak bir ME olarak kabul edilir) kaldığını ortaya koydu. Ayrıca, yöntemin miktar belirleme limitleri, her üç çeşit için de 5 μg/kg'dan düşüktü. Son olarak, çoğu pestisit için geri kazanım değerleri, nispi standart sapma değerleri %20'nin altında olmak üzere, kabul edilebilir %70-120 aralığında kalmıştır.

Giriş

Kimyasal analizde, matris etkisi (ME) çeşitli şekillerde tanımlanabilir, ancak yaygın olarak kabul edilen genel bir tanım şu şekildedir: sinyaldeki değişikliği, özellikle spesifik bir analitin analizi sırasında numune matrisi veya bunun bir kısmı mevcut olduğunda kalibrasyon eğrisinin eğimindeki bir değişikliği ifade eder. Kritik bir husus olarak, ME, hedef analitler için kantitatif ölçümün doğruluğunu doğrudan etkilediğinden, herhangi bir analitik yöntemin doğrulama süreci sırasında kapsamlı bir araştırma gerektirir¹. İdeal olarak, bir numune ön işlem prosedürü, numune matrisinden herhangi bir bileşenin çıkarılmasını önleyecek kadar seçici olmalıdır. Bununla birlikte, önemli çabalara rağmen, bu matris bileşenlerinin çoğu, çoğu durumda hala nihai belirleme sistemlerinde sona ermektedir. Sonuç olarak, bu tür matris bileşenleri genellikle geri kazanım ve hassasiyet değerlerini tehlikeye atar, ek gürültüye neden olur ve yöntemde yer alan toplam maliyeti ve işçiliği artırır.

Gaz kromatografisinde (GC), ME, GC sistemi içinde çeşitli mekanizmalar yoluyla hedef analitlerle etkileşime giren aktif bölgelerin varlığına bağlı olarak ortaya çıkar. Bir yandan, matris bileşenleri, aksi takdirde hedef analitlerle etkileşime girecek olan bu aktif bölgeleri bloke eder veya maskeler, bu da sık sık sinyal artışına^{neden olur 2}. Öte yandan, engellenmeden kalan aktif bölgeler, güçlü etkileşimler nedeniyle pik kuyruğuna veya analit ayrışmasına neden olabilir ve bu da negatif bir ME'ye yol açabilir. Bununla birlikte, bu, belirli durumlarda potansiyel faydalar sağlayabilir². Bir GC sisteminde tam eylemsizlik elde etmenin, yüksek derecede inert bileşenler kullanılmasına ve uygun bakıma rağmen son derece zor olduğunu vurgulamak çok önemlidir. Sürekli kullanımla, GC sistemindeki matris bileşenlerinin birikimi daha belirgin hale gelir ve bu da ME'nin artmasına neden olur. Günümüzde, oksijen, azot, fosfor, kükürt ve benzeri elementler içeren analitlerin, bu aktif bölgelerle kolayca etkileşime girdikleri için daha büyük bir ME sergiledikleri yaygın olarak kabul edilmektedir. Tersine, hidrokarbonlar veya organohalojenler gibi oldukça kararlı bileşikler bu tür etkileşimlere maruz kalmaz ve analiz sırasında gözlemlenebilir ME göstermezler ^2,3.

Genel olarak, ME tamamen ortadan kaldırılamaz, bu da matris bileşenlerinin tamamen çıkarılmasının mümkün olmadığı durumlarda telafi veya düzeltme için çeşitli stratejilerin geliştirilmesine yol açar. Bu stratejiler arasında, döteryumlu iç standartların (IS'ler), analit koruyucuların, matris uyumlu kalibrasyonun, standart ekleme yönteminin veya enjeksiyon tekniklerinin modifikasyonunun kullanımı bilimsel literatürde belgelenmiştir 1,2,4,5. SANTE/11312/2021 yönergeleri de bu stratejileri önermiştir⁶.

ME'leri telafi etmek için matris eşleştirmeli kalibrasyonun uygulanmasıyla ilgili olarak, pratik durumlarda numune dizileri, çeşitli gıda türlerini veya aynı emtiadan çeşitli numuneleri kapsar. Bu durumda, aynı emtiadan herhangi bir numunenin kullanılmasının, tüm numunelerde ME'yi etkili bir şekilde telafi edeceği varsayımı yapılır. Bununla birlikte, mevcut literatürde bu konuyu özel olarak araştıran yeterli çalışma eksikliği vardır⁷.

Kayda değer bir oranda yağ ve pigment içeren matrislerdeki pestisitlerin çoklu kalıntı tayini zorlu bir görev teşkil eder. Önemli miktarda birlikte ekstrakte edilen malzeme, ekstraksiyon verimliliğini önemli ölçüde etkileyebilir ve sonraki kromatografik belirlemeye müdahale edebilir, kolona, kaynağa ve dedektöre potansiyel olarak zarar verebilir ve önemli ME'lere^{neden olabilir 8,9,10}. Sonuç olarak, pestisitlerin bu tür matrislerde eser seviyelerde analizi, yüksek geri kazanım değerleri sağlarken, analizden önce matris bileşenlerinde önemli bir azalma gerektirir⁷. Pestisit analizlerinin güvenilir, doğru ve düzenleyici standartlarla uyumlu kalmasını sağlamak için yüksek geri kazanım değerleri elde etmek çok önemlidir. Bu, tarım ve ilgili alanlarda gıda güvenliği, çevre koruma ve bilinçli karar vermenin sağlanması için hayati önem taşır.

Avokado, dünya çapında tropikal ve Akdeniz iklimlerinde yetiştirilen ve hem menşe bölgelerinde hem de çok sayıda ihracat pazarında yaygın olarak tüketilen, ticari değeri yüksek bir meyvedir. Analitik bakış açısına göre, avokado, fındıklara benzer şekilde önemli sayıda yağ asidi (yani oleik, palmitik ve linoleik), yeşil yapraklarda olduğu gibi önemli bir pigment içeriği ve ayrıca diğer meyvelerde bulunanlara benzer şekerler ve organik asitler içeren karmaşık bir matristir¹¹. Yağlı doğası nedeniyle, analiz için herhangi bir analitik yöntem kullanılırken özel dikkat gösterilmelidir. Bazı durumlarda 8,12,13,14,15,16,17,18,19,20 GC-MS kullanılarak avokado üzerinde pestisit kalıntı analizi yapılmış olsa da, diğer matrislere kıyasla nispeten daha az sıklıkta olmuştur. Çoğu durumda, Quick-E asy-Ch eap-E fuffective-R ugged-S afe (QuEChERS) yönteminin bir versiyonu uygulanmıştır ^{8,12,13,14,15,16,17,18}. Bu çalışmaların hiçbiri, farklı avokado çeşitleri arasındaki ME'lerin tutarlılığını araştırmamıştır.

Bu nedenle, bu çalışmanın amacı, amonyum format ve GC-MS/MS ile QuEChERS yöntemini kullanarak farklı avokado türlerinde (yani Criollo, Hass ve Lorena) 45 temsili pestisit için ME'lerin tutarlılığını ve geri kazanım değerlerini incelemekti. Bildiğimiz kadarıyla, bu tür yağlı matris örnekleri üzerinde bu tür bir çalışma ilk kez gerçekleştirilmektedir.

Protokol

1. Stok ve çalışma solüsyonlarının hazırlanması

NOT: Güvenlik nedeniyle, protokol boyunca nitril eldiven, laboratuvar önlüğü ve koruyucu gözlük takılması tavsiye edilir.

1. 45 ticari pestisit standardının her birinin (Malzeme Tablosuna bakınız) 10 mL hacimsel şişelerde asetonitril içinde yaklaşık 1.000 mg / L'de ayrı stok çözeltileri hazırlayın.
2. 25 mL'lik hacimsel bir şişede asetonitril içinde 400 mg/L'lik bir stok çözeltisi hazırlamak için yukarıdaki bireysel stok çözeltilerini birleştirin.
   NOT: Bu karışık çözelti, geri kazanım ve kalibrasyon deneyleri için çalışma çözeltilerini hazırlamak için kullanılacaktır.
3. 10 mL hacimsel şişelerde asetonitril içinde sırasıyla 750 mg / L ve 1.050 mg / L konsantrasyonlarda atrazin-d₅ ve trifenil fosfat (TPP) stok çözeltileri hazırlayın. Atrazin-d_5'i prosedürel bir iç standart (P-IS) ve TPP'yi bir enjeksiyon iç standardı (I-IS) olarak kullanın.
   NOT: İdeal senaryo, her bir spesifik hedef analit için izotopik olarak etiketlenmiş bir dahili standardın kullanılmasını içerecektir.
4. Pestisitler için 10, 100 ve 400 μg/kg numune eşdeğerleri ve P-IS için ayrı ayrı 200 μg/kg numune eşdeğeri elde etmek için 10 mL hacimsel şişelerde %0,05 (h/h) formik asit (bozunmayı önlemek için) içeren asetonitrilde stok geri kazanım solüsyonları hazırlayın. Bu solüsyonları amber cam şişelerde karanlıkta -20 °C'de saklayın.
5. Pestisitlerin ve P-IS'nin kalibrasyon çözeltilerini asetonitril içinde 10 mL hacimsel şişelerde %0,05 (h/h) formik asit ile birlikte sırasıyla 5, 10, 25, 75, 200, 400 ve 600 μg/kg ve 200 ng/ng verecek şekilde hazırlayın ve bunları -20 °C'de karanlıkta amber cam şişelerde saklayın.
   NOT: Deneysel çalışma boyunca aynı çözeltiler kullanılabilir, ancak her kullanımdan hemen sonra belirtilen koşullar altında saklanması esastır.
6. 100 g/L 3-etoksi-1,2-propandiol, 10 g/L L-gulonik asit γ-lakton, 10 g/L D-sorbitol ve 5 g/L şikimik asit içeren bir analit koruyucu karışımı hazırlayın 4/1 (h/h) asetonitrilin suya oranı %0.5 (h/h) formik asit ile.
   NOT: Bu analit koruyucu karışımı, ME'yi hafifletmek için enjeksiyondan hemen önce eklenmelidir.

2. Örnek toplama

1. Süpermarketlerde bulunan üç avokado türünden (örneğin, Criollo, Hass ve Lorena) örnekler toplayın. Her bir numunenin yaklaşık 1 kg ağırlığında olduğundan emin olun, bu sonraki tüm çalışmaları yürütmek için yeterlidir ve 2002/63/CE²¹ Direktifi ile uyumludur.
   NOT: Pestisit kalıntılarının bulunma olasılığını en aza indirmek için organik numuneler tercihen seçilmiştir.
2. Toplanan avokado örneklerini laboratuvara taşıyın ve bir doğrayıcı kullanarak boru olmadan tek tek homojenize edin (bkz. Malzeme Tablosu). Homojenize edilmiş numuneleri amber cam kaplarda analize kadar 4 °C'de saklayın.
   NOT: Tüm çalışma boyunca aynı avokado örnekleri kullanılacaktır. Bu nedenle, her kullanımdan hemen sonra belirtilen koşullar altında saklanması çok önemlidir.

3. Amonyum format ile QuEChERS yöntemini kullanarak numune hazırlama

NOT: Şekil 1 , amonyum format ile QuEChERS yönteminin şematik bir temsilini göstermektedir.

1. 50 mL'lik bir santrifüj tüpünde her bir avokado örneğinden 5 g tartın (Malzeme Tablosuna bakınız).
2. 200 μg/kg'lık bir konsantrasyon elde etmek için 50 μL P-IS çözeltisi ekleyin. Geri kazanım değerlendirmesi için, 10, 100 ve 400 μg/kg (her biri n = 5) konsantrasyonlar elde etmek için adım 1.4'te hazırlanan pestisit solüsyonlarını da ekleyin.
3. Sivri ucun numuneye tam olarak entegrasyonunu sağlamak için tüpü 30 saniye boyunca vorteksleyin.
4. Santrifüj tüpüne 10 mL asetonitril ekleyin. Tüpü 70 rpm'de 5 dakika çalkalayın.
5. 2,5 g amonyum format ekleyin, tüpü tekrar 70 rpm'de 5 dakika çalkalayın ve ardından 5 dakika boyunca 1.800 × g'da santrifüjleyin.
6. 150 mg susuz MgS04, 50 mg birincil-ikincil amin (PSA), 50 mg oktadesilsilsen (C₁₈), 10 mg grafitleştirilmiş karbon siyahı (GCB) ve 60 mg zirkonyum oksit bazlı sorbent Z-Sep + içeren 2 mL'lik bir santrifüj tüpüne, dağıtıcı-katı faz ekstraksiyonu (d-SPE) kullanılarak saflaştırma için 1 mL ekstrakt ekleyin. Tüpü 30 saniye boyunca vorteksleyin ve 5 dakika boyunca 1.800 × g'da santrifüjleyin.
7. Ekstraktın 200 μL'sini bir otomatik örnekleyici şişesine aktarın, 20 μL'lik analit koruyucu solüsyonu adım 1.6'da hazırlayın ve 50 μL'lik TPP solüsyonu ekleyin.
8. Bir GC-MS/MS sistemi kullanarak enstrümantal analiz yapın (bkz. bölüm 4).
9. D-SPE adımı (adım 3.6) sırasında, 15 mL'lik tüplerde 5 mL süpernatanı temizlemek dışında, boş ekstraktlar kullanarak yukarıda tarif edilenle aynı prosedürü izleyerek matris uyumlu kalibrasyon gerçekleştirin. Adım 3.7'de spike ve P-IS çözümlerini ekleyin. TPP ile birlikte 5, 10, 25, 50, 100, 200, 400 ve 600 μg/kg elde etmek için kalibrasyon standart çözeltilerini otomatik numune alma cihazı şişelerine ekleyin ve 270 μL'lik bir nihai hacim elde edin.
   NOT: Genel olarak, her avokado çeşidi için matris uyumlu kalibrasyon eğrileri ve yalnızca asetonitril kalibrasyonları oluşturduğunuzdan emin olun.

4. GC-MS/MS kullanarak enstrümantal analiz

1. Analizleri, bir elektron iyonizasyon arayüzü (-70 eV) ve bir otomatik örnekleyici ile donatılmış üçlü dört kutuplu (TQ) bir GC-MS/MS sistemi kullanarak gerçekleştirin (bkz. Malzeme Tablosu).
2. 1,2 mL/dk sabit akış hızında taşıyıcı gaz olarak ultra yüksek saflıkta Helyum ile birlikte bir MS GC kolonu (30 m uzunluk, 0,25 mm iç çap, 0,25 μm film kalınlığı silika Bağı) kullanın.
3. Ekipmanın çalışmasına devam etmeden önce aşağıdaki parametreleri doğrulayın:
   1. Gaz basınçlarının doğru olduğundan emin olun: 140 psi'de helyum ve 65 psi'de Argon.
   2. Berrak ve uygun seviyede olduğundan emin olmak için döner pompa yağının durumunu kontrol edin.
   3. Enjeksiyon şırıngasının önceki enjeksiyonlardan herhangi bir engeli olmadığından emin olun.
   4. Yıkama şişelerinin her bir çözücüden yeterli miktarda içerdiğini onaylayın.
   5. Sarf malzemesi sayacının (septum, astar) sınırına ulaşmadığını kontrol edin.
4. Ön panelde bulunan ana GC anahtarını açın ve arkada bulunan MS anahtarını açın.
5. GC-MS/MS sisteminin tüm parametrelerini kontrol eden GCMS Gerçek Zamanlı Analiz yazılımını açın.
   NOT: Cihaz sistemi varsayılan olarak GCMS Gerçek Zamanlı Analiz yazılımını içerir.
6. Vakum Kontrolüne Tıklayın | İleri Düzey | Vakum sistemini başlatmak için Döner Pompa 1.
   NOT: Bu pencerede, 9.0 Pa'dan düşük olması gereken optimum vakum değerlerini belirlemek için basıncı izleyin. Yaklaşık 12 saat sürecektir.
7. Turbo moleküler pompa 1 ve turbo moleküler pompa 2'yi açmak için Başlat'a tıklayın.
8. İyon Kaynaklı Isıtıcı seçeneği için Başlat'a tıklayın.
   NOT: Önerilen 1 saatlik bir süre sonra, önerilen değerin ^1.6e-3 Pa'dan düşük olduğunu doğrulamak için sistemin vakumunu kontrol edin.
9. MS arayüz sıcaklığını 250 °C'ye ve iyon kaynağı sıcaklığını 300 °C'ye ayarlayın.
10. GC fırını 1 dakika boyunca 50 °C'lik bir başlangıç sıcaklığında tutun, ardından 25 °C/dk hızında 180 °C'ye yükseltin. Ardından, sıcaklığı 5 °C/dk'da 230 °C'ye ve ardından 25 °C/dk'da 290 °C'ye yükseltin. Son olarak, sıcaklığı 6 dakika boyunca 290 °C'de sabit tutun. Toplam analiz süresi 24,6 dakikadır.
11. Tüm bu sistemler açıldıktan sonra Kapat'a tıklayın.
12. Analiz yazılımından Ayarlama seçeneğine tıklayın ve kütle spektrometresi koşullarının ilk doğrulamasını gerçekleştirmek için Peak Monitor View'a tıklayın.
    NOT: Gerekirse, otomatik ayarlama gerçekleştirin.
13. Edinim'e tıklayın ve görüntülenen pencereden İlk Parametreleri İndir'e tıklayın. Ekipmanın GC ve MS'ye hazır olduğunu doğrulayın.

5. Veri toplama

1. Yazılımdan Yeni Toplu İş Dosyası'na tıklayın ve örnek adı, örnek kimliği, yöntem dosyası, veri dosyası, enjeksiyon hacmi ve ayarlama dosyası gibi bilgileri içeren bir dizi oluşturun. Gerektiği gibi satırlar ekleyin ve Kaydet'e tıklayın.
2. Toplu Başlat'a tıklayın ve enjeksiyon işleminin başlamasına izin verin.
3. Enjeksiyonu 250 °C'de, bölünmez modda, 1 μL'lik bir enjeksiyon hacmini koruyarak gerçekleştirin. Enjeksiyonu takip ettikten 1 dakika sonra, bölmeyi açın.
   NOT: Enjeksiyonlar arasında, 10 μL'lik şırıngayı metanol, etil asetat ve asetonitril ile her çözücü ile tek bir durulama kullanarak temizlediğinizden emin olun. Tüm enjeksiyonlar üç kopya halinde gerçekleştirilir.
4. TQ'lu MS/MS sistemlerinde kullanılan standart mod olan çoklu reaksiyon izleme (MRM) modunu kullanarak analitleri analiz edin.
   NOT: Tablo 1 , çok sınıflı pestisitler, P-IS ve I-IS için alıkonma sürelerini (dakika cinsinden) ve niceleyici ve niteleyici geçişlerini sağlar. Kantitatif analiz, kantitasyon iyonunun tepe alanının P-IS iyonuna oranına dayanır. I-IS, enjeksiyon sırasında kalite kontrol için kullanılır. Ek Dosya 1 , analiz edilen 45 pestisitin tümü için kromatogramlar içerir.
5. Veri analizi için Postrun Analysis yazılımını açın.
   NOT: Cihaz sistemi varsayılan olarak GCMS Postrun Analysis yazılımını içerir.
6. Analiz edilecek enjeksiyona tıklayın, analitleri içeren tabloda gezinin ve ilgilenilen zirveyi seçin.
7. Kromatogramı görselleştirmek için zirveye veya ilgilenilen bölgeye tıklayın. En yüksek entegrasyonları gözden geçirin ve gerekirse manuel entegrasyon gerçekleştirin. Gerekli hesaplamaları ve yöntem değerlendirmesini gerçekleştirmek için tüm analitlerin alanlarını doğrulayın.

Sonuçlar

Analitik yöntemin kapsamlı doğrulaması, doğrusallık, ME, geri kazanım ve tekrarlanabilirlik değerlendirmelerini kapsayan SANTE/11312/2021 yönergelerine^6'ya göre gerçekleştirilmiştir.

Doğrusallık değerlendirmesi için, matris eşleştirilmiş kalibrasyon eğrileri, çoklu konsantrasyon seviyelerinde (5 ila 600 μg/kg arasında değişen) çivili boş numuneler kullanılarak oluşturulmuştur. Seçilen pestisitlerin çoğu için belirleme katsayılarının...

Tartışmalar

Matris eşleştirmeli kalibrasyon ile ilişkili birincil sınırlama, kalibrasyon standartları olarak boş numunelerin kullanılmasından kaynaklanmaktadır. Bu, analiz için işlenecek numune sayısının artmasına ve her analitik dizide matris bileşenlerinin daha fazla enjeksiyonuna yol açarak potansiyel olarak daha yüksek cihaz bakım taleplerine yol açar. Bununla birlikte, bu strateji, her numune için bir kalibrasyon eğrisi gerçekleştirme ihtiyacı nedeniyle enjekte edilecek çok daha fazla sayıda numune ?...

Malzemeler

Name	Company	Catalog Number	Comments
3-Ethoxy-1,2-propanediol	Sigma Aldrich	260428-1G
Acetonitrile	Merk	1006652500
Ammonium formate	Sigma Aldrich	156264-1KG
AOAC 20i/s autosampler	Shimadzu	221-723115-58
Automatic shaker MX-T6-PRO	SCILOGEX	8.23222E+11
Balance	OHAUS	PA224
Centrifuge tubes, 15 mL	Nest	601002
Centrifuge tubes, 2 mL	Eppendorf	4610-1815
Centrifuge tubes, 50 mL	Nest	602002
Centrifuge Z206A	MERMLE	6019500118
Choper 2L	Oster	2114111
Column SH-Rxi-5sil MS, 30 m x 0.25 mm, 0.25 µm	Shimadzu	221-75954-30	MS GC column
Dispensette 5-50 mL	BRAND	4600361
DSC-18	Sigma Aldrich	52600-U
D-Sorbitol	Sigma Aldrich	240850-5G
Ethyl acetate	Merk	1313181212
GCMS-TQ8040	Shimadzu	211552
Graphitized carbon black	Sigma Aldrich	57210-U
Injection syringe	Shimadzu	LC2213461800
L-Gulonic acid γ-lactone	Sigma Aldrich	310301-5G
Linner splitless	Shimadzu	221-4887-02
Magnesium sulfate anhydrus	Sigma Aldrich	M7506-2KG
Methanol	Panreac	131091.12.12
Milli-Q ultrapure (type 1) water	Millipore	F4H4783518
Pipette tips 10 - 100 µL	Biologix	200010
Pipette tips 100 - 1000 µL	Brand	541287
Pipette tips 20 - 200 µL	Brand	732028
Pipettes Pasteur	NORMAX	5426023
Pippette Transferpette S variabel 10 - 100 µL	BRAND	704774
Pippette Transferpette S variabel 100 - 1000 µL	BRAND	704780
Pippette Transferpette S variabel 20 - 200 µL	SCILOGEX	7.12111E+11
Primary-secondary amine	Sigma Aldrich	52738-U
Shikimic acid	Sigma Aldrich	S5375-1G
Syringe Filter PTFE/L 25 mm, 0.45 µm	NORMAX	FE2545I
Triphenyl phosphate (QC)	Sigma Aldrich	241288-50G
Vials with fused-in insert	Sigma Aldrich	29398-U
Z-SEP+	Sigma Aldrich	55299-U	zirconium oxide-based sorbent
Pesticides			CAS registry number
4,4´-DDD	Sigma Aldrich	35486-250MG	72-54-8
4,4´-DDE	Sigma Aldrich	35487-100MG	72-55-9
4,4´-DDT	Sigma Aldrich	31041-100MG	50-29-3
Alachlor	Sigma Aldrich	45316-250MG	15972-60-8
Aldrin	Sigma Aldrich	36666-25MG	309-00-2
Atrazine	Sigma Aldrich	45330-250MG-R	1912-24-9
Atrazine-d5 (IS)	Sigma Aldrich	34053-10MG-R	163165-75-1
Buprofezin	Sigma Aldrich	37886-100MG	69327-76-0
Carbofuran	Sigma Aldrich	32056-250-MG	1563-66-2
Chlorpropham	Sigma Aldrich	45393-250MG	101-21-3
Chlorpyrifos	Sigma Aldrich	45395-100MG	2921-88-2
Chlorpyrifos-methyl	Sigma Aldrich	45396-250MG	5598-13-0
Deltamethrin	Sigma Aldrich	45423-250MG	52918-63-5
Dichloran	Sigma Aldrich	45435-250MG	99-30-9
Dichlorvos	Sigma Aldrich	45441-250MG	62-73-7
Dieldrin	Sigma Aldrich	33491-100MG-R	60-57-1
Diphenylamine	Sigma Aldrich	45456-250MG	122-39--4
Endosulfan A	Sigma Aldrich	32015-250MG	115-29-7
Endrin	Sigma Aldrich	32014-250MG	72-20-8
EPN	Sigma Aldrich	36503-100MG	2104-64-5
Esfenvalerate	Sigma Aldrich	46277-100MG	66230-04-4
Ethion	Sigma Aldrich	45477-250MG	563-12-2
Fenamiphos	Sigma Aldrich	45483-250MG	22224-92-6
Fenitrothion	Sigma Aldrich	45487-250MG	122-14-5
Fenthion	Sigma Aldrich	36552-250MG	55-38-9
Fenvalerate	Sigma Aldrich	45495-250MG	51630-58-1
HCB	Sigma Aldrich	45522-250MG	118-74-1
Iprodione	Sigma Aldrich	36132-100MG	36734-19-7
Lindane	Sigma Aldrich	45548-250MG	58-89-9
Malathion	Sigma Aldrich	36143-100MG	121-75-5
Metalaxyl	Sigma Aldrich	32012-100MG	57837-19-1
Methidathion	Sigma Aldrich	36158-100MG	950-37-8
Myclobutanil	Sigma Aldrich	34360-100MG	88671-89-0
Oxyfluorfen	Sigma Aldrich	35031-100MG	42874-03-3
Parathion-methyl	Sigma Aldrich	36187-100MG	298-00-0
Penconazol	Sigma Aldrich	36189-100MG	66246-88-6
Pirimiphos-methyl	Sigma Aldrich	32058-250MG	29232-93-7
Propiconazole	Sigma Aldrich	45642-250MG	60207-90-1
Propoxur	Sigma Aldrich	45644-250MG	114-26-1
Propyzamide	Sigma Aldrich	45645-250MG	23850-58-5
Pyriproxifen	Sigma Aldrich	34174-100MG	95737-68-1
Tolclofos-methyl	Sigma Aldrich	31209-250MG	5701804-9
Triadimefon	Sigma Aldrich	45693-250MG	43121-43-3
Triflumizole	Sigma Aldrich	32611-100MG	68694-11-1
α-HCH	Sigma Aldrich	33377-50MG	319-86-8
β-HCH	Sigma Aldrich	33376-100MG	319-85-7