Определение 45 пестицидов в сортах авокадо методом QuEChERS и газовой хроматографией-тандемной масс-спектрометрией

Резюме

В настоящем протоколе описан анализ многоклассовых остатков пестицидов в сортах авокадо с использованием метода Quick-E asy-Ch eap-E ffective-R ugged-S afe (QuEChERS) с формиатом аммония с последующей газовой хроматографией-тандемной масс-спектрометрией.

Аннотация

Газовая хроматография (ГХ) и тандемная масс-спектрометрия (МС/МС) являются выдающимся аналитическим инструментом, широко используемым для наблюдения за остатками пестицидов в пищевых продуктах. Тем не менее, эти методы уязвимы к матричным эффектам (МЭ), которые потенциально могут повлиять на точность количественного определения в зависимости от конкретной комбинации аналита и матрицы. Среди различных стратегий по снижению выбросов МЭ матричная калибровка представляет собой преобладающий подход при применении остатков пестицидов из-за его экономической эффективности и простоты реализации. В этом исследовании было проанализировано в общей сложности 45 репрезентативных пестицидов для трех различных сортов авокадо (т.е. Criollo, Hass и Lorena) с использованием метода Quick-E asy-Ch eap-E ffective-R ugged-S afe (QuEChERS) с формиатом аммония и GC-MS/MS.

С этой целью 5 г образца авокадо экстрагировали с 10 мл ацетонитрила, а затем добавляли 2,5 г формиата аммония для индуцирования фазового разделения. Затем надосадочную жидкость подвергали процессу очистки с помощью дисперсионной твердофазной экстракции с использованием 150 мг безводного MgSO₄, 50 мг первично-вторичного амина, 50 мг октадецилсилана, 10 мг графитизированного технического углерода и 60 мг сорбента на основе оксида циркония (Z-Sep+). Анализ ГХ-МС/МС был успешно проведен менее чем за 25 минут. Для оценки эффективности метода были проведены тщательные валидационные эксперименты. Изучение калибровочной кривой, согласованной с матрицей, для каждого сорта авокадо показало, что МЭ оставался относительно постоянным и составлял менее 20% (рассматриваемый как мягкий МЭ) для большинства комбинаций пестицидов/сортов. Кроме того, пределы количественного определения метода были ниже 5 г/кг для всех трех разновидностей. Наконец, значения восстановления для большинства пестицидов находились в допустимом диапазоне 70-120%, при этом относительные значения стандартного отклонения были ниже 20%.

Введение

В химическом анализе матричный эффект (МЭ) может быть определен различными способами, но общепринятое общее определение звучит следующим образом: он относится к изменению сигнала, в частности, к изменению наклона калибровочной кривой, когда матрица образца или ее часть присутствуют во время анализа конкретного аналита. В качестве критического аспекта МЭ требует тщательного исследования в процессе валидации любого аналитического метода, поскольку он напрямую влияет на точность количественного измерения целевых аналитов¹. В идеале процедура предварительной обработки образца должна быть достаточно селективной, чтобы избежать извлечения каких-либо компонентов из матрицы образца. Однако, несмотря на значительные усилия, многие из этих компонентов матрицы в большинстве случаев все же попадают в системы окончательного определения. Следовательно, такие матричные компоненты часто ставят под угрозу значения восстановления и точности, вносят дополнительный шум и увеличивают общую стоимость и трудозатраты, связанные с методом.

В газовой хроматографии (ГХ) МЭ возникает из-за наличия активных центров внутри системы ГХ, которые взаимодействуют с анализитами-мишенями посредством различных механизмов. С одной стороны, составляющие матрицы блокируют или маскируют эти активные центры, которые в противном случае взаимодействовали бы с целевыми аналитами, что приводит к частому усилению сигнала^. С другой стороны, активные центры, которые остаются беспрепятственными, могут вызывать пиковое хвостообразование или разложение аналита из-за сильных взаимодействий, что приводит к отрицательному МЭ. Тем не менее, в некоторых случаях это может принести потенциальную пользу². Важно подчеркнуть, что достижение полной инертности в системе ГХ является чрезвычайно сложной задачей, несмотря на использование высокоинертных компонентов и надлежащее техническое обслуживание. При длительном использовании накопление матричных компонентов в системе ГХ становится более выраженным, вызывая повышенный МЭ. В настоящее время широко признано, что аналиты, содержащие кислород, азот, фосфор, серу и подобные элементы, проявляют больший МЭ, поскольку они легко взаимодействуют с этими активными центрами. И наоборот, высокостабильные соединения, такие как углеводороды или галоорганические соединения, не вступают в такие взаимодействия и не проявляют наблюдаемого МЭ во время анализа ^2,3.

В целом, МЭ не может быть полностью устранена, что приводит к разработке нескольких стратегий компенсации или коррекции, когда полное удаление компонентов матрицы нецелесообразно. Среди этих стратегий использование дейтерированных внутренних стандартов (ИС), протекторов аналита, калибровка с учетом матрицы, метод стандартного добавления или модификация методов впрыска были задокументированы в научной литературе 1,2,4,5. В руководящих принципах SANTE/11312/2021 также рекомендованы эти стратегии⁶.

Что касается применения матрично-согласованной калибровки для компенсации МЭ, то последовательности образцов в практических ситуациях охватывают различные виды пищевых продуктов или различные образцы из одного и того же товара. В этом случае делается предположение, что использование любой выборки из одного и того же товара позволит эффективно компенсировать МЭ во всех образцах. Тем не менее, в существующей литературе отсутствует достаточное количество исследований, специально посвященных этому вопросу⁷.

Определение нескольких остатков пестицидов в матрицах, содержащих заметный процент жира и пигментов, представляет собой сложную задачу. Значительное количество коэкстрагированного материала может существенно повлиять на эффективность экстракции и помешать последующему хроматографическому определению, потенциально повреждая колонку, источник и детектор, что приводит к значительным МЭ ^8,9,10. Следовательно, анализ пестицидов на следовых уровнях в таких матрицах требует значительного уменьшения компонентов матрицы перед анализом при обеспечении высоких значений извлечения⁷. Получение высоких значений извлечения имеет решающее значение для обеспечения надежности, точности и соответствия нормативным стандартам анализов пестицидов. Это жизненно важно для обеспечения безопасности пищевых продуктов, защиты окружающей среды и принятия обоснованных решений в сельском хозяйстве и смежных областях.

Авокадо – фрукт высокой коммерческой ценности, выращиваемый в тропическом и средиземноморском климате по всему миру и широко потребляемый как в регионах своего происхождения, так и на многочисленных экспортных рынках. С аналитической точки зрения авокадо представляет собой сложную матрицу, содержащую значительное количество жирных кислот (т. е. олеиновой, пальмитиновой и линолевой), сходных с орехами, значительное содержание пигмента, как в зеленых листьях, а также сахаров и органических кислот, сходных с теми, что содержатся в^{других фруктах}. Из-за его жирной природы следует уделять особое внимание при использовании любого аналитического метода анализа. В то время как анализ остатков пестицидов проводился на авокадо с использованием ГХ-МС, в некоторых случаях 8,12,13,14,15,16,17,18,19,20, он был относительно менее частым по сравнению с другими матрицами. В большинстве случаев применяется вариант метода Quick-E asy-Ch eap-E ffective-R ugged-S afe (QuEChERS) ^{8,12,13,14,15,16,17,18}. Ни в одном из этих исследований не изучалась консистенция МЭ между различными сортами авокадо.

Таким образом, целью данной работы было изучение согласованности МЭ и значений восстановления для 45 репрезентативных пестицидов для различных сортов авокадо (т.е. Криолло, Хасс и Лорена) с использованием метода QuEChERS с формиатом аммония и ГХ-МС/МС. Насколько нам известно, это первый случай, когда такого рода исследования проводились на образцах жировой матрицы.

протокол

1. Приготовление материала и рабочих растворов

ПРИМЕЧАНИЕ: В целях безопасности рекомендуется носить нитриловые перчатки, лабораторный халат и защитные очки на протяжении всего протокола.

1. Приготовьте отдельные исходные растворы каждого из 45 коммерческих стандартов пестицидов (см. Таблицу материалов) в концентрации примерно 1000 мг/л в ацетонитриле в мерных колбах объемом 10 мл.
2. Соедините вышеуказанные отдельные стоковые растворы для приготовления стокового раствора в концентрации 400 мг/л в ацетонитриле в мерной колбе объемом 25 мл.
   ПРИМЕЧАНИЕ: Этот смешанный раствор будет использоваться для подготовки рабочих растворов для экспериментов по восстановлению и калибровке.
3. Готовьте исходные растворы атразина-d₅ и трифенилфосфата (ТПП) в концентрациях 750 мг/л и 1050 мг/л соответственно в ацетонитриле в мерных колбах объемом 10 мл. Используйте атразин-d₅ в качестве процедурного внутреннего стандарта (P-IS) и TPP в качестве внутреннего стандарта для инъекций (I-IS).
   Примечание: Идеальный сценарий должен включать использование изотопно меченного внутреннего стандарта для каждого конкретного целевого аналита.
4. Готовьте исходные растворы для восстановления в ацетонитриле, содержащем 0,05% (v/v) муравьиной кислоты (для предотвращения деградации) в объемных колбах объемом 10 мл с получением образцовых эквивалентов 10, 100 и 400 мкг/кг для пестицидов и 200 мкг/кг для P-IS отдельно. Храните эти растворы во флаконах из янтарного стекла в темноте при температуре −20 °C.
5. Приготовьте калибровочные растворы пестицидов и P-IS вместе в ацетонитриле с 0,05% (v/v) муравьиной кислоты в объемных колбах объемом 10 мл с получением 5, 10, 25, 75, 200, 400 и 600 мкг/кг и 200 нг/нг соответственно и храните их в флаконах из янтарного стекла в темноте при температуре −20 °C.
   Примечание: Одни и те же растворы могут быть использованы на протяжении всей экспериментальной работы, но необходимо хранить их в указанных условиях сразу после каждого использования.
6. Приготовьте смесь протекторов аналита, содержащую 100 г/л 3-этокси-1,2-пропандиола, 10 г/л L-гулоновой кислоты γ-лактона, 10 г/л D-сорбита и 5 г/л шикимовой кислоты в соотношении 4/1 (v/v) ацетонитрила к воде с 0,5% (v/v) муравьиной кислоты.
   ПРИМЕЧАНИЕ: Эту смесь протекторов аналита следует добавлять непосредственно перед инъекцией для смягчения воздействия МЭ.

2. Забор образцов

1. Соберите образцы трех видов авокадо (например, Криолло, Хасс и Лорена), доступных в супермаркетах. Убедитесь, что каждый образец весит около 1 кг, что достаточно для проведения всех последующих исследований и соответствует Директиве 2002/63/CE²¹.
   ПРИМЕЧАНИЕ: Органические образцы отбирались в первую очередь, чтобы свести к минимуму вероятность присутствия остатков пестицидов.
2. Транспортируйте собранные образцы авокадо в лабораторию, и индивидуально гомогенизируйте их без трубки с помощью измельчителя (см. Таблицу материалов). Гомогенизированные образцы хранят в контейнерах из янтарного стекла при температуре 4 °C до анализа.
   ПРИМЕЧАНИЕ: Одни и те же образцы авокадо будут использоваться на протяжении всего исследования. Поэтому крайне важно хранить их в указанных условиях сразу после каждого использования.

3. Пробоподготовка по методу QuEChERS с формиатом аммония

ПРИМЕЧАНИЕ: На рисунке 1 показано схематическое изображение метода QuEChERS с формиатом аммония.

1. Взвесьте по 5 г каждого образца авокадо в центрифужной пробирке объемом 50 мл (см. Таблицу материалов).
2. Добавьте 50 μL раствора P-IS до получения концентрации 200 μг/кг. Для оценки восстановления также добавьте растворы пестицидов, приготовленные на этапе 1.4, до концентраций 10, 100 и 400 мкг/кг (n = 5 каждая).
3. Сделайте вихревой настройку на пробирку на 30 с, чтобы обеспечить полную интеграцию шипа в образец.
4. Добавьте в пробирку центрифуги 10 мл ацетонитрила. Встряхивайте трубку при 70 об/мин в течение 5 минут.
5. Добавьте 2,5 г формиата аммония, снова встряхните пробирку при 70 об/мин в течение 5 минут, а затем центрифугируйте при 1800 × г в течение 5 минут.
6. В центрифужную пробирку объемом 2 мл, содержащую 150 мг безводного MgSO₄, 50 мг первично-вторичного амина (ПСА), 50 мг октадецилсилана (C₁₈), 10 мг графитизированного технического углерода (GCB) и 60 мг сорбента Z-Sep+ на основе оксида циркония, добавьте 1 мл экстракта для очистки с использованием дисперсно-твердофазной экстракции (d-SPE). Пробирку переварить в течение 30 с и центрифугировать при давлении 1 800 × г в течение 5 минут.
7. Перелейте 200 мкл экстракта во флакон автосамплера, добавьте 20 мкл раствора протектора аналита, приготовленного на шаге 1.6, и добавьте 50 мкл раствора TPP.
8. Выполните инструментальный анализ с помощью системы GC-MS/MS (см. раздел 4).
9. Выполните калибровку с учетом матрицы, следуя той же процедуре, что и описанная выше, с использованием пустых экстрактов, за исключением того, что на этапе d-SPE (шаг 3.6) очистите 5 мл надосадочной жидкости в пробирках объемом 15 мл. Добавьте решения Spike и P-IS на шаге 3.7. Добавьте калибровочные стандартные растворы в пробирки автосамплера для получения 5, 10, 25, 50, 100, 200, 400 и 600 мкг/кг, а также TPP, в результате чего конечный объем составит 270 мкл.
   ПРИМЕЧАНИЕ: В целом, обязательно постройте калибровочные кривые, согласованные с матрицей, для каждого сорта авокадо, а также калибровки только по ацетонитрилу.

4. Инструментальный анализ с помощью ГХ-МС/МС

1. Проводите анализы с использованием системы ГХ-МС/МС с тройным квадруполем (TQ), оснащенным электронно-ионизационным интерфейсом (−70 эВ) и автосамплером (см. Таблицу материалов).
2. Используйте колонку MS GC (Silica Bond длиной 30 м, внутренним диаметром 0,25 мм, толщиной пленки 0,25 мкм) вместе с гелием сверхвысокой чистоты в качестве газа-носителя при постоянной скорости потока 1,2 мл/мин.
3. Перед началом работы оборудования необходимо проверить следующие параметры:
   1. Убедитесь, что давление газа правильное: гелий при 140 фунтах на квадратный дюйм и аргон при 65 фунтах на квадратный дюйм.
   2. Проверьте состояние масла роторного насоса, чтобы убедиться, что оно прозрачное и находится на соответствующем уровне.
   3. Убедитесь, что на шприце для инъекций нет препятствий от предыдущих инъекций.
   4. Убедитесь, что промывочные флаконы содержат достаточное количество каждого растворителя.
   5. Проверьте, чтобы счетчик расходных материалов (перегородка, вкладыш) не достиг своего предела.
4. Включите основной переключатель GC, расположенный на передней панели, и включите переключатель MS, расположенный сзади.
5. Откройте программное обеспечение GCMS Real Time Analysis, которое контролирует все параметры системы GC-MS/MS.
   ПРИМЕЧАНИЕ: Приборная система по умолчанию включает в себя программное обеспечение GCMS Real Time Analysis.
6. Нажмите на Управление вакуумом | Продвинутый | Роторный насос 1 для запуска вакуумной системы.
   ПРИМЕЧАНИЕ: В этом окне следите за давлением, чтобы определить оптимальные значения вакуума, которые должны быть ниже 9,0 Па. Это займет примерно 12 часов.
7. Нажмите « Пуск », чтобы включить турбомолекулярный насос 1 и турбомолекулярный насос 2.
8. Нажмите « Пуск » для опции «Нагреватель ионного источника ».
   ПРИМЕЧАНИЕ: По истечении рекомендуемого времени в 1 час проверьте вакуум в системе, чтобы убедиться, что рекомендуемое значение ниже 1,6e-3 Па.
9. Установите температуру интерфейса MS на 250 °C , а температуру ионного источника на 300 °C.
10. Поддерживайте первоначальную температуру духовки GC 50 °C в течение 1 минуты, затем увеличьте ее до 180 °C со скоростью 25 °C/мин. Затем увеличьте температуру до 230 °C при 5 °C/мин , а затем до 290 °C при 25 °C/мин. Наконец, поддерживайте постоянную температуру на уровне 290 °C в течение 6 минут. Общее время анализа составляет 24,6 мин.
11. Нажмите « Закрыть», как только все эти системы будут включены.
12. Нажмите на опцию «Настройка» в аналитическом программном обеспечении и нажмите на «Просмотр пикового монитора », чтобы выполнить первоначальную проверку условий масс-спектрометра.
    ПРИМЕЧАНИЕ: При необходимости выполните автонастройку.
13. Нажмите «Получение», а в открывшемся окне нажмите «Загрузить исходные параметры». Убедитесь, что оборудование готово GC и готово MS.

5. Сбор данных

1. Нажмите « Новый пакетный файл » в программном обеспечении и создайте последовательность, содержащую такую информацию, как имя образца, идентификатор образца, файл метода, файл данных, объем впрыска и файл настройки. При необходимости добавьте строки и нажмите « Сохранить».
2. Нажмите « Запустить пакет» и дайте начать процесс впрыска.
3. Выполняйте впрыск при температуре 250 °C в режиме без разделения, поддерживая объем впрыска 1 μл. Через 1 минуту после инъекции откройте шпагат.
   ПРИМЕЧАНИЕ: Между инъекциями обязательно очищайте шприц объемом 10 мкл метанолом, этилацетатом и ацетонитрилом, используя одно полоскание каждым растворителем. Все инъекции выполняются в трех экземплярах.
4. Анализируйте аналиты в режиме мониторинга множественных реакций (MRM), который является стандартным режимом, используемым в системах MS/MS с TQ.
   ПРИМЕЧАНИЕ: В таблице 1 приведены времена удержания (в мин) и переходы квантификаторов и квалификаторов для многоклассовых пестицидов, P-I и I-IS. Количественный анализ основан на отношении пиковой площади количественного иона к иону P-IS. I-IS используется для контроля качества во время впрыска. Дополнительный файл 1 содержит хроматограммы для всех 45 проанализированных пестицидов.
5. Откройте программное обеспечение Postrun Analysis для анализа данных.
   ПРИМЕЧАНИЕ: Система приборов по умолчанию включает в себя программное обеспечение GCMS Postrun Analysis.
6. Нажмите на инъекцию, которую нужно анализировать, перейдите по таблице, содержащей аналиты, и выберите пик интереса.
7. Нажмите на пик или область интереса, чтобы визуализировать хроматограмму. Просмотрите пиковые интеграции и, при необходимости, выполните интеграцию вручную. Проверьте площади всех аналитов для выполнения необходимых расчетов и оценки метода.

Результаты

Всесторонняя валидация аналитического метода была проведена в соответствии с руководящими принципами SANTE/11312/2021⁶, охватывающими оценки линейности, ME, восстановления и повторяемости.

Для оценки линейности были построены калибровочные кривые, согласованные ?...

Обсуждение

Основное ограничение, связанное с калибровкой по матрице, возникает из-за использования пустых образцов в качестве калибровочных стандартов. Это приводит к увеличению количества образцов, подлежащих обработке для анализа, и увеличению количества компонентов матрицы в каждой аналити?...

Материалы

Name	Company	Catalog Number	Comments
3-Ethoxy-1,2-propanediol	Sigma Aldrich	260428-1G
Acetonitrile	Merk	1006652500
Ammonium formate	Sigma Aldrich	156264-1KG
AOAC 20i/s autosampler	Shimadzu	221-723115-58
Automatic shaker MX-T6-PRO	SCILOGEX	8.23222E+11
Balance	OHAUS	PA224
Centrifuge tubes, 15 mL	Nest	601002
Centrifuge tubes, 2 mL	Eppendorf	4610-1815
Centrifuge tubes, 50 mL	Nest	602002
Centrifuge Z206A	MERMLE	6019500118
Choper 2L	Oster	2114111
Column SH-Rxi-5sil MS, 30 m x 0.25 mm, 0.25 µm	Shimadzu	221-75954-30	MS GC column
Dispensette 5-50 mL	BRAND	4600361
DSC-18	Sigma Aldrich	52600-U
D-Sorbitol	Sigma Aldrich	240850-5G
Ethyl acetate	Merk	1313181212
GCMS-TQ8040	Shimadzu	211552
Graphitized carbon black	Sigma Aldrich	57210-U
Injection syringe	Shimadzu	LC2213461800
L-Gulonic acid γ-lactone	Sigma Aldrich	310301-5G
Linner splitless	Shimadzu	221-4887-02
Magnesium sulfate anhydrus	Sigma Aldrich	M7506-2KG
Methanol	Panreac	131091.12.12
Milli-Q ultrapure (type 1) water	Millipore	F4H4783518
Pipette tips 10 - 100 µL	Biologix	200010
Pipette tips 100 - 1000 µL	Brand	541287
Pipette tips 20 - 200 µL	Brand	732028
Pipettes Pasteur	NORMAX	5426023
Pippette Transferpette S variabel 10 - 100 µL	BRAND	704774
Pippette Transferpette S variabel 100 - 1000 µL	BRAND	704780
Pippette Transferpette S variabel 20 - 200 µL	SCILOGEX	7.12111E+11
Primary-secondary amine	Sigma Aldrich	52738-U
Shikimic acid	Sigma Aldrich	S5375-1G
Syringe Filter PTFE/L 25 mm, 0.45 µm	NORMAX	FE2545I
Triphenyl phosphate (QC)	Sigma Aldrich	241288-50G
Vials with fused-in insert	Sigma Aldrich	29398-U
Z-SEP+	Sigma Aldrich	55299-U	zirconium oxide-based sorbent
Pesticides			CAS registry number
4,4´-DDD	Sigma Aldrich	35486-250MG	72-54-8
4,4´-DDE	Sigma Aldrich	35487-100MG	72-55-9
4,4´-DDT	Sigma Aldrich	31041-100MG	50-29-3
Alachlor	Sigma Aldrich	45316-250MG	15972-60-8
Aldrin	Sigma Aldrich	36666-25MG	309-00-2
Atrazine	Sigma Aldrich	45330-250MG-R	1912-24-9
Atrazine-d5 (IS)	Sigma Aldrich	34053-10MG-R	163165-75-1
Buprofezin	Sigma Aldrich	37886-100MG	69327-76-0
Carbofuran	Sigma Aldrich	32056-250-MG	1563-66-2
Chlorpropham	Sigma Aldrich	45393-250MG	101-21-3
Chlorpyrifos	Sigma Aldrich	45395-100MG	2921-88-2
Chlorpyrifos-methyl	Sigma Aldrich	45396-250MG	5598-13-0
Deltamethrin	Sigma Aldrich	45423-250MG	52918-63-5
Dichloran	Sigma Aldrich	45435-250MG	99-30-9
Dichlorvos	Sigma Aldrich	45441-250MG	62-73-7
Dieldrin	Sigma Aldrich	33491-100MG-R	60-57-1
Diphenylamine	Sigma Aldrich	45456-250MG	122-39--4
Endosulfan A	Sigma Aldrich	32015-250MG	115-29-7
Endrin	Sigma Aldrich	32014-250MG	72-20-8
EPN	Sigma Aldrich	36503-100MG	2104-64-5
Esfenvalerate	Sigma Aldrich	46277-100MG	66230-04-4
Ethion	Sigma Aldrich	45477-250MG	563-12-2
Fenamiphos	Sigma Aldrich	45483-250MG	22224-92-6
Fenitrothion	Sigma Aldrich	45487-250MG	122-14-5
Fenthion	Sigma Aldrich	36552-250MG	55-38-9
Fenvalerate	Sigma Aldrich	45495-250MG	51630-58-1
HCB	Sigma Aldrich	45522-250MG	118-74-1
Iprodione	Sigma Aldrich	36132-100MG	36734-19-7
Lindane	Sigma Aldrich	45548-250MG	58-89-9
Malathion	Sigma Aldrich	36143-100MG	121-75-5
Metalaxyl	Sigma Aldrich	32012-100MG	57837-19-1
Methidathion	Sigma Aldrich	36158-100MG	950-37-8
Myclobutanil	Sigma Aldrich	34360-100MG	88671-89-0
Oxyfluorfen	Sigma Aldrich	35031-100MG	42874-03-3
Parathion-methyl	Sigma Aldrich	36187-100MG	298-00-0
Penconazol	Sigma Aldrich	36189-100MG	66246-88-6
Pirimiphos-methyl	Sigma Aldrich	32058-250MG	29232-93-7
Propiconazole	Sigma Aldrich	45642-250MG	60207-90-1
Propoxur	Sigma Aldrich	45644-250MG	114-26-1
Propyzamide	Sigma Aldrich	45645-250MG	23850-58-5
Pyriproxifen	Sigma Aldrich	34174-100MG	95737-68-1
Tolclofos-methyl	Sigma Aldrich	31209-250MG	5701804-9
Triadimefon	Sigma Aldrich	45693-250MG	43121-43-3
Triflumizole	Sigma Aldrich	32611-100MG	68694-11-1
α-HCH	Sigma Aldrich	33377-50MG	319-86-8
β-HCH	Sigma Aldrich	33376-100MG	319-85-7