Определение 45 пестицидов в сортах авокадо методом QuEChERS и газовой хроматографией-тандемной масс-спектрометрией

Резюме

В настоящем протоколе описан анализ многоклассовых остатков пестицидов в сортах авокадо с использованием метода Quick-E asy-Ch eap-E ffective-R ugged-S afe (QuEChERS) с формиатом аммония с последующей газовой хроматографией-тандемной масс-спектрометрией.

Аннотация

Газовая хроматография (ГХ) и тандемная масс-спектрометрия (МС/МС) являются выдающимся аналитическим инструментом, широко используемым для наблюдения за остатками пестицидов в пищевых продуктах. Тем не менее, эти методы уязвимы к матричным эффектам (МЭ), которые потенциально могут повлиять на точность количественного определения в зависимости от конкретной комбинации аналита и матрицы. Среди различных стратегий по снижению выбросов МЭ матричная калибровка представляет собой преобладающий подход при применении остатков пестицидов из-за его экономической эффективности и простоты реализации. В этом исследовании было проанализировано в общей сложности 45 репрезентативных пестицидов для трех различных сортов авокадо (т.е. Criollo, Hass и Lorena) с использованием метода Quick-E asy-Ch eap-E ffective-R ugged-S afe (QuEChERS) с формиатом аммония и GC-MS/MS.

С этой целью 5 г образца авокадо экстрагировали с 10 мл ацетонитрила, а затем добавляли 2,5 г формиата аммония для индуцирования фазового разделения. Затем надосадочную жидкость подвергали процессу очистки с помощью дисперсионной твердофазной экстракции с использованием 150 мг безводного MgSO₄, 50 мг первично-вторичного амина, 50 мг октадецилсилана, 10 мг графитизированного технического углерода и 60 мг сорбента на основе оксида циркония (Z-Sep+). Анализ ГХ-МС/МС был успешно проведен менее чем за 25 минут. Для оценки эффективности метода были проведены тщательные валидационные эксперименты. Изучение калибровочной кривой, согласованной с матрицей, для каждого сорта авокадо показало, что МЭ оставался относительно постоянным и составлял менее 20% (рассматриваемый как мягкий МЭ) для большинства комбинаций пестицидов/сортов. Кроме того, пределы количественного определения метода были ниже 5 г/кг для всех трех разновидностей. Наконец, значения восстановления для большинства пестицидов находились в допустимом диапазоне 70-120%, при этом относительные значения стандартного отклонения были ниже 20%.

Введение

В химическом анализе матричный эффект (МЭ) может быть определен различными способами, но общепринятое общее определение звучит следующим образом: он относится к изменению сигнала, в частности, к изменению наклона калибровочной кривой, когда матрица образца или ее часть присутствуют во время анализа конкретного аналита. В качестве критического аспекта МЭ требует тщательного исследования в процессе валидации любого аналитического метода, поскольку он напрямую влияет на точность количественного измерения целевых аналитов¹. В идеале процедура предварительной обработки образца должна быть достаточно селективной, чтобы избежать извлечения каких-либо ....

протокол

1. Приготовление материала и рабочих растворов

ПРИМЕЧАНИЕ: В целях безопасности рекомендуется носить нитриловые перчатки, лабораторный халат и защитные очки на протяжении всего протокола.

1. Приготовьте отдельные исходные растворы каждого из 45 коммерческих стандартов пестицидов (см. Таблицу материалов) в концентрации примерно 1000 мг/л в ацетонитриле в мерных колбах объемом 10 мл.
2. Соедините вышеуказанные отдельные стоковые растворы для приготовления стокового раствора в концентрации 400 мг/л в ацетонитриле в мерной колбе объемом 25 мл.
   ПРИМЕЧАНИЕ: Этот смешанный раствор будет использова....

Результаты

Всесторонняя валидация аналитического метода была проведена в соответствии с руководящими принципами SANTE/11312/2021⁶, охватывающими оценки линейности, ME, восстановления и повторяемости.

Для оценки линейности были построены калибровочные кривые, согласованные ?.......

Обсуждение

Основное ограничение, связанное с калибровкой по матрице, возникает из-за использования пустых образцов в качестве калибровочных стандартов. Это приводит к увеличению количества образцов, подлежащих обработке для анализа, и увеличению количества компонентов матрицы в каждой аналити?.......

Материалы

Name	Company	Catalog Number	Comments
3-Ethoxy-1,2-propanediol	Sigma Aldrich	260428-1G
Acetonitrile	Merk	1006652500
Ammonium formate	Sigma Aldrich	156264-1KG
AOAC 20i/s autosampler	Shimadzu	221-723115-58
Automatic shaker MX-T6-PRO	SCILOGEX	8.23222E+11
Balance	OHAUS	PA224
Centrifuge tubes, 15 mL	Nest	601002
Centrifuge tubes, 2 mL	Eppendorf	4610-1815
Centrifuge tubes, 50 mL	Nest	602002
Centrifuge Z206A	MERMLE	6019500118
Choper 2L	Oster	2114111
Column SH-Rxi-5sil MS, 30 m x 0.25 mm, 0.25 µm	Shimadzu	221-75954-30	MS GC column
Dispensette 5-50 mL	BRAND	4600361
DSC-18	Sigma Aldrich	52600-U
D-Sorbitol	Sigma Aldrich	240850-5G
Ethyl acetate	Merk	1313181212
GCMS-TQ8040	Shimadzu	211552
Graphitized carbon black	Sigma Aldrich	57210-U
Injection syringe	Shimadzu	LC2213461800
L-Gulonic acid γ-lactone	Sigma Aldrich	310301-5G
Linner splitless	Shimadzu	221-4887-02
Magnesium sulfate anhydrus	Sigma Aldrich	M7506-2KG
Methanol	Panreac	131091.12.12
Milli-Q ultrapure (type 1) water	Millipore	F4H4783518
Pipette tips 10 - 100 µL	Biologix	200010
Pipette tips 100 - 1000 µL	Brand	541287
Pipette tips 20 - 200 µL	Brand	732028
Pipettes Pasteur	NORMAX	5426023
Pippette Transferpette S variabel 10 - 100 µL	BRAND	704774
Pippette Transferpette S variabel 100 - 1000 µL	BRAND	704780
Pippette Transferpette S variabel 20 - 200 µL	SCILOGEX	7.12111E+11
Primary-secondary amine	Sigma Aldrich	52738-U
Shikimic acid	Sigma Aldrich	S5375-1G
Syringe Filter PTFE/L 25 mm, 0.45 µm	NORMAX	FE2545I
Triphenyl phosphate (QC)	Sigma Aldrich	241288-50G
Vials with fused-in insert	Sigma Aldrich	29398-U
Z-SEP+	Sigma Aldrich	55299-U	zirconium oxide-based sorbent
Pesticides			CAS registry number
4,4´-DDD	Sigma Aldrich	35486-250MG	72-54-8
4,4´-DDE	Sigma Aldrich	35487-100MG	72-55-9
4,4´-DDT	Sigma Aldrich	31041-100MG	50-29-3
Alachlor	Sigma Aldrich	45316-250MG	15972-60-8
Aldrin	Sigma Aldrich	36666-25MG	309-00-2
Atrazine	Sigma Aldrich	45330-250MG-R	1912-24-9
Atrazine-d5 (IS)	Sigma Aldrich	34053-10MG-R	163165-75-1
Buprofezin	Sigma Aldrich	37886-100MG	69327-76-0
Carbofuran	Sigma Aldrich	32056-250-MG	1563-66-2
Chlorpropham	Sigma Aldrich	45393-250MG	101-21-3
Chlorpyrifos	Sigma Aldrich	45395-100MG	2921-88-2
Chlorpyrifos-methyl	Sigma Aldrich	45396-250MG	5598-13-0
Deltamethrin	Sigma Aldrich	45423-250MG	52918-63-5
Dichloran	Sigma Aldrich	45435-250MG	99-30-9
Dichlorvos	Sigma Aldrich	45441-250MG	62-73-7
Dieldrin	Sigma Aldrich	33491-100MG-R	60-57-1
Diphenylamine	Sigma Aldrich	45456-250MG	122-39--4
Endosulfan A	Sigma Aldrich	32015-250MG	115-29-7
Endrin	Sigma Aldrich	32014-250MG	72-20-8
EPN	Sigma Aldrich	36503-100MG	2104-64-5
Esfenvalerate	Sigma Aldrich	46277-100MG	66230-04-4
Ethion	Sigma Aldrich	45477-250MG	563-12-2
Fenamiphos	Sigma Aldrich	45483-250MG	22224-92-6
Fenitrothion	Sigma Aldrich	45487-250MG	122-14-5
Fenthion	Sigma Aldrich	36552-250MG	55-38-9
Fenvalerate	Sigma Aldrich	45495-250MG	51630-58-1
HCB	Sigma Aldrich	45522-250MG	118-74-1
Iprodione	Sigma Aldrich	36132-100MG	36734-19-7
Lindane	Sigma Aldrich	45548-250MG	58-89-9
Malathion	Sigma Aldrich	36143-100MG	121-75-5
Metalaxyl	Sigma Aldrich	32012-100MG	57837-19-1
Methidathion	Sigma Aldrich	36158-100MG	950-37-8
Myclobutanil	Sigma Aldrich	34360-100MG	88671-89-0
Oxyfluorfen	Sigma Aldrich	35031-100MG	42874-03-3
Parathion-methyl	Sigma Aldrich	36187-100MG	298-00-0
Penconazol	Sigma Aldrich	36189-100MG	66246-88-6
Pirimiphos-methyl	Sigma Aldrich	32058-250MG	29232-93-7
Propiconazole	Sigma Aldrich	45642-250MG	60207-90-1
Propoxur	Sigma Aldrich	45644-250MG	114-26-1
Propyzamide	Sigma Aldrich	45645-250MG	23850-58-5
Pyriproxifen	Sigma Aldrich	34174-100MG	95737-68-1
Tolclofos-methyl	Sigma Aldrich	31209-250MG	5701804-9
Triadimefon	Sigma Aldrich	45693-250MG	43121-43-3
Triflumizole	Sigma Aldrich	32611-100MG	68694-11-1
α-HCH	Sigma Aldrich	33377-50MG	319-86-8
β-HCH	Sigma Aldrich	33376-100MG	319-85-7