Authors
Contact Us

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • النتائج
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

هنا ، نقدم بروتوكولا لفحص عدوى المبيضات عن طريق الفم في المرضى الذين يعانون من متلازمة سجوجرن الأولية ، والتي يمكن استخدامها للعلاج في الوقت المناسب ، وبعد ذلك ، تجنب المضاعفات ذات الصلة.

Abstract

متلازمة سجوجرن الأولية (pSS) هي أحد أمراض المناعة الذاتية التي تتميز بأعراض مثل جفاف الفم وجفاف العين وأعراض منهجية أخرى. بسبب نقص اللعاب الذي يعاني منه مرضى pSS ، غالبا ما يحدث دسباقتريوز الفم. المضاعفات الشائعة ل pSS هي عدوى المبيضات الفموية. في هذه المقالة ، يصف المؤلفون طرقا منهجية يمكنها تشخيص عدوى المبيضات الفموية بشكل فعال وتحديد سلالات المبيضات باستخدام اللعاب أو مسحات الغشاء المخاطي للفم أو غسول الفم من مرضى pSS. يتم استخدام أجار سكر العنب من Sabouraud (SDA) ، ومقايسة تكوين hyphal ، واختبار مسحة هيدروكسيد البوتاسيوم (KOH) ، ومقايسة تلطيخ الكالكوفلور الأبيض (CFW) لتشخيص عدوى المبيضات عن طريق الفم. يستخدم أجار تشخيص المبيضات لتحديد سلالات المبيضات . أخيرا ، يتم استخدام اختبار الحساسية للفطريات لتحديد العلاج المناسب للفطريات. يمكن أن تعزز هذه الطريقة الموحدة التشخيص والعلاج والبحث المستقبلي لعدوى المبيضات الفموية المرتبطة ب pSS. التشخيص المبكر ، باستخدام هذه الطريقة ، يمكن أن يمنع أيضا أي مضاعفات تنشأ بسبب التأخير في تلقي العلاج المناسب.

Introduction

المبيضات سببها المبيضات النيابة، والتي هي مسببات الأمراض الانتهازية. تشمل السلالات الشائعة المبيضات البيض ، المبيضات كروسي ، المبيضات غلابراتا ، المبيضات parapsilosis ، والمبيضات دبلينينسيس1. تشمل العدوى الانتهازية التي تسببها المبيضات التهابات المبيضات السطحية وداء المبيضات الغازي. داء المبيضات الغازية يحدث بشكل رئيسي في الأفراد الذين يعانون من نقص المناعة. على سبيل المثال ، في المرضى الذين يعانون من متلازمة نقص المناعة المكتسب (الإيدز) ، يمكن أن يهدد داء المبيضات الغازي بشكل كبير نوعية الحياة أو حتى العمرالافتراضي 2. عدوى المبيضات السطحية ، مثل داء المبيضات المخاطي الجلدي ، أكثر شيوعا في المرضى3.

داء المبيضات الفموي ، عدوى المبيضات السطحية ، هو العدوى الفطرية البشرية الأكثر شيوعا. المبيضات البيض هو متعايش طبيعي للفم. تم الإبلاغ عن أن معدل نقل المبيضات spp. يتراوح من 20٪ إلى 75٪ في عموم السكان دون أي أعراض4. يمكن أن يؤدي فرط نمو المبيضات إلى عدم الراحة المحلية لدى المرضى ، مثل تغير طعم الإحساس ، والإحساس بالحرقة في الفم ، وعسر البلع بسبب سوء التغذية ، وتأخر الشفاء ، والإقامة الطويلة في المستشفى. يمكن أن يؤدي داء المبيضات الفموي طويل الأمد إلى داء المبيضات الغازي الشديد ، مما يؤدي إلى مراضة ووفيات كبيرة5. داء المبيضات الفموي يمكن أن يزيد أيضا من خطر الإصابة بسرطان الفم5. ضعف وظيفة الغدد اللعابية هو من بين عوامل الخطر لداء المبيضات الفموي6. بدء العدوى هو التصاق المبيضات بجدران الخلايا الظهارية. ويلي ذلك انتشار وخيوط المبيضات وتشكيل ونضج الغشاء الحيوي7. من الصعب للغاية القضاء على الأغشية الحيوية وهي مقاومة للعلاج التقليدي المضاد للفطريات ، مما يجعل العلاج السريري تحديا لعدوى المبيضات الفموية المرتبطة بالأغشية الحيوية7.

متلازمة سجوجرن الأولية (pSS) هي أحد أمراض المناعة الذاتية التي تتميز بجفاف الفم وجفاف العين وأعراض منهجية أخرى8. جفاف الفم هو أكثر أعراض pSS شيوعا. اللعاب له وظائف فسيولوجية مهمة مضادة للفطريات. من ناحية ، يمكن أن يخفف وينظف الفم وبعد ذلك يزيل الكائنات الحية من الغشاء المخاطي. من ناحية أخرى ، يحتوي اللعاب على بروتينات مضادة للميكروبات ، مثل اللاكتوفيرين ، سيالوبيروكسيديز ، الليزوزيم ، الببتيدات الغنية بالهيستيدين ، والأجسام المضادة المضادة المضادة للفحم ، والتي يمكن أن تتفاعل مع الغشاء المخاطي للفم وتمنع فرط نمو المبيضات6. قد يؤدي انخفاض تدفق اللعاب إلى تعريض مرضى pSS لداء المبيضات الفموي. وجدت دراسة مقطعية قائمة على الملاحظة أجريت على 61 مريضا من مرضى pSS أن 13.1٪ من مرضى pSS قدموا علامات فموية لداء المبيضات ووحدة تشكيل المستعمرة (CFU) / مل من المبيضات البيض تم العثور عليها بشكل كبير وسلبي مع مستويات اللعاب الكامل غير المحفز (UWS) واللعاب الكامل المحفز (SWS) 9.

يمكن للطرق المقدمة في هذه المخطوطة تحديد عدوى المبيضات الفموية بناء على السمات المورفولوجية المميزة (على سبيل المثال ، خلايا الخيوط والخميرة) في اللطاخة المباشرة أو بعد زراعة10. يعتمد تحديد سلالة المبيضات باستخدام أجار تشخيص المبيضات على تكوين مستعمرات ملونة مختلفة ذات مورفولوجيا متنوعة ، والتي تنتج عن انقسام ركائز كروموجينية بواسطة إنزيمات خاصة بالأنواع11. في هذه المخطوطة ، يتم تقديم طرق منهجية للكشف عن عدوى المبيضات الفموية ، بما في ذلك زراعة المبيضات الفموية التقليدية والفحص السريع عن طريق اختبار مسحة هيدروكسيد البوتاسيوم (KOH) ومقايسة تلطيخ الكالكوفلور الأبيض (CFW)10. بالإضافة إلى ذلك ، تم تقديم اختبار الحساسية للفطريات ، والذي يمكن أن يوجه علاج عدوى المبيضات عن طريق الفم السريري. في الحالات الفعلية ، ليس من الضروري تنفيذ جميع الأساليب المقدمة في هذه المخطوطة. يمكن اختيار طريقة (طرق) الكشف عن المبيضات عن طريق الفم وفقا للغرض. إن فحص عدوى المبيضات الفموية وتحديد سلالات المبيضات في مرضى pSS لا يفيد علاج المرض فحسب ، بل يساعد أيضا في تقييم توصيف داء المبيضات الفموي وملامح الأنواع.

Protocol

تمت الموافقة على جميع الإجراءات الموضحة أدناه من قبل اللجنة الأخلاقية لمستشفى بكين تيانتان ، جامعة العاصمة الطبية (رقم KY2023-177-01) ، وقدم جميع المرضى المشاركين في هذه الدراسة موافقة مستنيرة.

1. معايير إدراج المريض واستبعاده

  1. معايير التضمين: صنف المرضى كمرضى pSS إذا استوفوا معايير الكلية الأمريكية لأمراض الروماتيزم (ACR) / الرابطة الأوروبية لمكافحة الروماتيزم (EULAR)لعام 2016 12. على وجه التحديد ، قم بتأسيس معايير التصنيف النهائية على المجموع المرجح لخمسة عناصر: إيجابية الأجسام المضادة ل SSA / Ro والتهاب الغدد الليمفاوية البؤري مع درجة تركيز تبلغ ≥ 1 بؤرة / 4 مم2 ، كل منها يسجل 3 ؛ درجة تلطيخ العين غير الطبيعية ≥ 5 (أو درجة فان بيجسترفيلد ≥ 4) ، نتيجة اختبار شيرمر ≤ 5 مم / 5 دقائق ومعدل تدفق لعابي غير محفز ≤ 0.1 مل / دقيقة ، كل منها يسجل 1. الأفراد الذين يعانون من علامات و / أو أعراض توحي ب SS والذين لديهم درجة إجمالية قدرها ≥ 4 للعناصر المذكورة أعلاه يستوفون معايير pSS.
  2. معايير الاستبعاد: استبعاد المرضى الذين لا يستطيعون التعاون مع جمع العينات والمرضى الذين يتلقون العلاج من عدوى المبيضات عن طريق الفم.
    ملاحظة: من الضروري ملاحظة أن الطرق الموضحة أدناه مناسبة أيضا للتوصيف الشامل لعدوى المبيضات الفموية لدى الأفراد المصابين ب SS الثانوي.
  3. لمنع الملوثات المحتملة أثناء جمع عينات المبيضات ونقلها وزراعتها ، اتخذ احتياطات دقيقة. ويشمل ذلك التحضير التجريبي الدقيق ، واستخدام المواد ذات الاستخدام الواحد والمعقمة ، ووضع العلامات المناسبة ، والختم الآمن لأنابيب أخذ العينات ، وإجراء الإجراءات التجريبية في خزانة مهنية للسلامة الأحيائية.

2. جمع العينات

  1. جمع اللعاب: اطلب من المرضى حمل الأنبوب بقمع والسماح لتدفق اللعاب تدريجيا إلى الأنبوب على طول الشفة السفلى. في نهاية المجموعة ، اطلب من المريض أن يبصق كل اللعاب المتبقي في الفم في الأنبوب. جمع اللعاب لمدة 15 دقيقة.
  2. جمع غسول الفم والمسحات: إذا لم يكن لدى المريض تدفق لعاب غير محفز أو منخفض للغاية (أقل من 0.03 مل / دقيقة) ، فقم بمسح منطقة الغشاء المخاطي للفم مع عدوى المبيضات الفموية المشتبه بها 10x على الأقل ، ثم اطلب من المريض استخدام 5 مل من محلول ملحي مخزن بالفوسفات (PBS ؛ انظر جدول المواد) لشطف الفم لمدة 1 دقيقة. قم بتخزين غسول الفم في أنبوب معقم سعة 50 مل وضع المسحة في أنبوب غسول الفم.
    ملاحظة: بالنسبة لمرضى pSS الذين يعانون من تدفق اللعاب غير المحفز لأكثر من 0.03 مل / دقيقة ، لا يزال من الممكن استخدام الخطوة 2.2 لجمع عينات للكشف عن عدوى المبيضات عن طريق الفم.

3. معالجة العينات

  1. أضف 1 مل من PBS إلى اللعاب الذي تم جمعه. لا تضيف برنامج تلفزيوني إلى غسول الفم باستخدام برنامج تلفزيوني. يهتز أنبوب غسول الفم باستخدام دوامة لمدة 1 دقيقة.

4. ثقافة المبيضات

  1. لجعل وسط أجار سابوراند (SDA) ، قم بإذابة 70 جم SDA (انظر جدول المواد) في 1000 مل من الماء المقطر المزدوج.
  2. معقم باستخدام الأوتوكلاف عند 121 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة ، طبق 10 مل من وسط SDA هذا في طبق استزراع ميكروبيولوجي 10 سم (انظر جدول المواد) ويبرد.
  3. خذ 200 ميكرولتر من العينة المحضرة في الخطوة 3 وقم بوضعها على أطباق الاستزراع الميكروبيولوجي 10 سم المحضرة ب 10 مل من وسط SDA في الخطوة 4.2.
  4. احتضان لمدة 48 ساعة عند 37 درجة مئوية ، وسوف تنضج مستعمرة المبيضات . قم بتخزين طبق SDA مؤقتا مع مستعمرات المبيضات عند 4 درجات مئوية. يمكن تخزين مستعمرات المبيضات المستزرعة على طبق SDA لمدة 2-4 أسابيع.

5. تحديد سلالة المبيضات

  1. لصنع الوسط ، أخرج 47.7 جم من مسحوق أجار المبيضات التشخيصي (انظر جدول المواد) ، وضعه في 1000 مل من الماء المقطر المزدوج ، وقم بتسخينه إلى 100 درجة مئوية.
  2. عندما يغلي الوسط قليلا ، ضع 10 مل في طبق استزراع ميكروبيولوجي 10 سم واتركه ليبرد.
  3. حل مستعمرات المبيضات في 500 ميكرولتر من وسط SDA (الخطوة 4) ، وتعليق وفصل عن طريق الماصة.
  4. لوحة 50 ميكرولتر من العينة مع مستعمرات المبيضات (الخطوة 5.3) على الوسط المعد في الخطوة 5.2. احتضان لمدة 48 ساعة عند 37 درجة مئوية حتى تنضج مستعمرات المبيضات .
  5. وفقا للون وأنماط مستعمرات المبيضات ، حدد سلالة (سلالات) المبيضات المكتسبة من مرضى pSS. استخدم معايير تحديد سلالة المبيضات التالية: مستعمرة الزمرد الأخضر هي المبيضات البيض ، والمستعمرة الزرقاء الرمادية هي المبيضات الاستوائية ، والمستعمرات الوردية ذات الحواف الغامضة ، والميكروفيلي هي المبيضات كروسي ، والمستعمرة الصغيرة الحمراء الأرجوانية هي المبيضات جلابراتا ، والمستعمرة البيضاء اللبنية تحتوي على عدة سلالات بما في ذلك المبيضات parapsilosis.

6. مقايسة تشكيل المبيضات بيوفيلم

  1. لجعل قاعدة نيتروجين الخميرة (YNB) -50 جلوكوز (جم) متوسطة ، تزن 1.34 جم YNB (انظر جدول المواد) و 1.98 جم D (+) - جلوكوز (انظر جدول المواد). تذوب في 200 مل من الماء المقطر المزدوج.
  2. لجعل YNB-100G متوسطا ، أخرج 1.34 جم YNB و 3.96 جم D (+) - جلوكوز وقم بإذابتهما في 200 مل من الماء المقطر المزدوج.
  3. قم بتصفية المحاليل باستخدام مرشح حقنة 0.22 ميكرومتر (انظر جدول المواد). يمكن تخزين وسيط YNB-50G و YNB-100G المصفى عند 4 درجات مئوية لمدة 3 أشهر.
  4. اختر 3 مستعمرات (أو أكثر) من نفس السلالة على الأطباق في الخطوة 5 وانقلها إلى 200 ميكرولتر من وسط YNB-50G (الخطوتان 6.1 و 6.3) في طبق من 96 بئرا (انظر جدول المواد). افعل ذلك للسلالات التي لوحظت في الطبق. استزرع بين عشية وضحاها عند 37 درجة مئوية مع الاهتزاز عند 200 دورة في الدقيقة.
  5. نضح تعليق المبيضات ، إضافة 1 مل من برنامج تلفزيوني ، والطرد المركزي لخلايا الخميرة في 1500 × غرام لمدة 5 دقائق في درجة حرارة الغرفة ، وتجاهل طاف. كرر هذه الخطوة 2x في نفس الأنبوب.
  6. أعد تعليق الخلايا في 1 مل من وسط YNB-100G وقم بإعداد تخفيفات مختلفة (1:10 و 1: 100 و 1: 1000) من الخلايا. خذ 200 ميكرولتر من تعليق الخلية المتدرجة وقم بوضعه على وسط SDA مقاس 10 سم بطريقة اللوحة الحلزونية13. يتم الطلاء باستخدام آلة تودع حجما معروفا من العينة على صفيحة أجار دوارة بكمية متناقصة باستمرار على شكل حلزوني أرخميدس. ثقافة لمدة 24-48 ساعة عند 37 درجة مئوية.
  7. احسب تركيز الخلايا في التخفيفات المختلفة وفقا لعدد وحدات CFU في لوحة SDA بناء على الطريقة القياسية13. عد لفترة وجيزة المستعمرات المنفصلة جيدا على كل لوحة. عد المستعمرات في أوكتان واحد من الحافة الخارجية باتجاه المركز حتى يتم ملاحظة 25 مستعمرة على الأقل. أيضا ، احسب ما تبقى من هذا القوس حيثحدث العد 25. احسب تركيز الخلايا بقسمة عدد المستعمرات على حجم السائل المقابل للمنطقة التي تم الحصول على عدد المستعمراتعليها 13. اضبط تركيز الخلايا على 1 × 107 خلايا / مل.
  8. ضع 100 ميكرولتر من معلق الخلية في YNB-100G في لوحة 96 بئرا واحتضانها عند 37 درجة مئوية لمدة 2 ساعة أثناء الاهتزاز عند 200 دورة في الدقيقة.
  9. أخرج بحذر المادة الطافية ، واغسل 2x باستخدام برنامج تلفزيوني ، وابتعد عن خلايا الخميرة العائمة. يتشكل الغشاء الحيوي المبيضات في الجزء السفلي من لوحة 96 بئرا.

7. مقايسة تشكيل Hyphal

ملاحظة: فقط المبيضات التي يمكن أن تشكل خيوط (مثل المبيضات البيض) يمكن أن تحفز لتشكيل hyphal. انتقل إلى الخطوة 8 لمزيد من توصيف المبيضات التي لا يمكن أن تشكل خيوط (مثل المبيضات glabrata).

  1. أعد تعليق تعليق خلية الخميرة في الخطوة 6.6 واضبط تركيز الخلية على 1 × 106 خلايا / مل باستخدام وسيط YNB-100G.
  2. لتحضير وسط النمو الكامل RPMI 1640 ، أضف 50 مل من مصل الجنين البقري (انظر جدول المواد) إلى 450 مل من وسط RPMI 1640 (انظر جدول المواد) واحفظه عند 4 درجات مئوية لمزيد من التجارب.
  3. نقل 2 ميكرولتر من معلق خلية المبيضات المخفف في 200 ميكرولتر من وسط النمو الكامل RPMI 1640 إلى صفيحة 96 بئرا ومزرعة طوال الليل عند 37 درجة مئوية للسماح للخيوط الفطرية وخلايا الخميرة بالتكون.

8. اختبار مسحة KOH ومقايسة تلطيخ CFW

  1. أخرج 1 ميكرولتر من العينات من الخطوة 3 أو الخطوة 6 أو الخطوة 7 باستخدام حلقة مصبوبة بدقة (انظر جدول المواد) وقم بتلطيخ مساحة 1 سم × 1 سم على الشرائح الزجاجية. انتظر حتى يجف في درجة حرارة الغرفة.
  2. لصنع محلول KOH بنسبة 10٪ ، قم بوزن 10 جم من مسحوق KOH (انظر جدول المواد) وقم بإذابته في 100 مل من الماء المقطر المزدوج.
  3. سخني الشريحة قليلا باستخدام مصباح كحول حتى تذوب العينة. قم بتلطيخ الشرائح المعدة في الخطوة 8.1 بنسبة 10٪ KOH (الخطوة 8.2) ، وقم بتغطيتها بقسيمة غطاء. اضغط قليلا على انزلاق الغطاء لجعل العينة شفافة.
  4. تصور خلايا الخيوط والخميرة تحت المجهر.
  5. قم بتلطيخ الشرائح المحضرة في الخطوة 8.1 مع قطرة من CFW (انظر جدول المواد) ، وقم بتغطيتها بغطاء ، وانتظر لمدة دقيقة واحدة.
  6. تصور الخيوط باستخدام مجهر مضان عند تكبير 100x و 200x. CFW متحمس عند 355 نانومتر ويتم اكتشافه عند 300-440 نانومتر. صور الصور تحت وقت التعرض. كرر 3x لتجنب النتائج الإيجابية الخاطئة.

9. اختبار الحساسية للفطريات

ملاحظة: يتم إجراء هذا الاختبار وفقا لتعليمات الشركة المصنعة لمجموعة الحساسية الفطرية الشبيهة بالخميرة (التخفيف الدقيق ؛ انظر جدول المواد).

  1. قم بإعداد مستعمرات المبيضات (الخطوة 4) التي يقل عمرها عن 4 أيام باستخدام أمبولة كلوريد الصوديوم 0.85٪ (انظر جدول المواد) والحصول على التعليق الذي له تعكر يعادل 2 McFarland. حدد التعكر وفقا لمجموعة معايير McFarland (انظر جدول المواد). استخدم تعليق المبيضات المحضر على الفور.
  2. ماصة 135 ميكرولتر من وسط ATB F2 في المجموعة التي تحتوي على 3 × 104 خلايا خميرة / مل في كل قبة في شريط الاختبار ووضع الغطاء. ضع شريط الاختبار في حاوية مغلقة. ثقافة لمدة 24 ساعة عند 35 درجة مئوية.
  3. مراقبة نمو المبيضات مع التفسير البصري (الرجوع إلى دليل المستخدم). للحصول على القيمة المرجعية (النطاق المرجعي)، راجع دليل المستخدم. تحقق مما إذا كانت فتحة التحكم تنمو بشكل كاف. إذا كان نمو فتحة التحكم غير كاف أو لا ينمو ، فلا يمكن قراءة النتائج وتحتاج إلى 24 ساعة أخرى من الزراعة.

النتائج

في هذه الدراسة ، تم اختيار 12 مريضا يعانون من pSS كمرضى تمثيليين وتم فحصهم بحثا عن عدوى المبيضات الفموية (الجدول 1). من بين هؤلاء المرضى ، أظهر بعض المرضى آفات فموية نموذجية لعدوى المبيضات ، بما في ذلك التهاب الشفة الزاوي (الذي يتميز بتشققات في زوايا الفم ، والتقشر ، واحتقان ?...

Discussion

في المخطوطة الحالية ، نقدم سلسلة من الطرق المنهجية والبسيطة والممكنة للكشف عن عدوى المبيضات الفموية ، وتحديد سلالات المبيضات ، واختبار الحساسية المضادة للفطريات للأدوية شائعة الاستخدام في المرضى الذين يعانون من pSS.

في الإعدادات العملية ، ليست كل الطرق المقدمة ف?...

Disclosures

ليس لدى المؤلفين أي تضارب في المصالح للإعلان عنه.

Acknowledgements

تم دعم هذا البحث من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (82201084) ، ومؤسسة علوم ما بعد الدكتوراه الصينية (2022M722232) ، ومؤسسة بكين لأبحاث ما بعد الدكتوراه (2023-ZZ-020) ، ومشروع مياوبو لمستشفى بكين تيانتان ، وجامعة العاصمة الطبية (2023MP10) وصندوق البحوث العامة ، مجلس هونغ كونغ لمنح البحوث (27111820 و 17116521).

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
0.22 µm Syringe FilterMERCKSLGV004SL
1.5 mL Centrifuge TubeaxygenMCT-150-C-S
10 cm Microbiological Culture DishesJet Bio-Filtration Co. LtdTCD000100
15 mL Centrifuge TubeJet Bio-Filtration Co., LtdCFT011150
50 mL Centrifuge TubeCorning430290
96-well MicroplatesCorning3599
API 0.85% NaCl ampuleBIOMERIEUX20070
Calcofluor White StainSigma-Aldrich18909-100ML-F
CHROMagar CandidaCHROMagarP002860Candida diagnostic agar
D(+)-Glucose MonohydrateSinopharm Chemical Reagent Co.,Ltd10010518
Fetal Bovine Serum Gibco26170035
McFarland Standards KitBIOMERIEUX70900
Nunc precision molded loops ThermoFisher Scientific254399
Phosphate Buffered SalineGibcoC10010500BT
Potassium HydroxideAladdinP112284-500g
PowerSoil DNA Isolation Kit MO BIO12888-50
RPMI 1640 MediumGibco11875119
Sabourand's Agar MediumSolarbioS9710
Yeast Nitrogen Base Without Amino acidsSolarbioY8040
Yeast-like Fungal Susceptibility Kit (Microdilution)BIOMERIEUX14204

References

  1. Wang, X., et al. Microbiota dysbiosis in primary Sjögren's syndrome and the ameliorative effect of hydroxychloroquine. Cell Rep. 40 (11), 111352 (2022).
  2. Humphrey, S. P., Williamson, R. T. A review of saliva: normal composition, flow, and function. J Prosthet Dent. 85 (2), 162-169 (2001).
  3. Marsh, P. D., Do, T., Beighton, D., Devine, D. A. Influence of saliva on the oral microbiota. Periodontol 2000. 70 (1), 80-92 (2016).
  4. Vila, T., Rizk, A. M., Sultan, A. S., Jabra-Rizk, M. A. The power of saliva: Antimicrobial and beyond. PLoS Pathog. 15 (11), e1008058 (2019).
  5. Serrano, J., et al. Risk factors related to oral candidiasis in patients with primary Sjögren's syndrome. Med Oral Patol Oral Cir Bucal. 25 (5), e700-e705 (2020).
  6. Napeñas, J. J., Rouleau, T. S. Oral complications of Sjögren's syndrome. Oral Maxillofac Surg Clin North Am. 26 (1), 55-62 (2014).
  7. Mathews, S. A., Kurien, B. T., Scofield, R. H. Oral manifestations of Sjögren's syndrome. J Dent Res. 87 (4), 308-318 (2008).
  8. Leung, K. C. M., McMillan, A. S., Cheung, B. P. K., Leung, W. K. Sjögren's syndrome sufferers have increased oral yeast levels despite regular dental care. Oral Dis. 14 (2), 163-173 (2008).
  9. Lundstrom, I. M., Lindstrom, F. D. Subjective and clinical oral symptoms in patients with primary Sjögren's syndrome. Clin Exp Rheumatol. 13 (6), 725-731 (1995).
  10. Alam, M. Z., et al. Candida identification: a journey from conventional to molecular methods in medical mycology. World J Microbiol Biotechnol. 30 (5), 1437-1451 (2014).
  11. Bauters, T. G., Nelis, H. J. Comparison of chromogenic and fluorogenic membrane filtration methods for detection of four Candida species. J Clin Microbiol. 40 (5), 1838-1839 (2002).
  12. Soto-Rojas, A. E., Villa, A. R., Sifuentes-Osornio, J., Alarcón-Segovia, D., Kraus, A. Oral candidiasis and Sjögren's syndrome. J Rheumatol. 25 (5), 911-915 (1998).
  13. Gilchrist, J. E., Campbell, J. E., Donnelly, C. B., Peeler, J. T., Delaney, J. M. Spiral plate method for bacterial determination. Appl Microbiol. 25 (2), 244-252 (1973).
  14. Biomerieux. ATB FUNGUS 3 Sensitivity test for yeast-like fungi. REF 14204. Biomerieux. , (2014).
  15. Zhang, L., et al. The widely used ATB FUNGUS 3 automated readings in China and its misleading high MICs of Candida spp. to Azoles: Challenges for developing countries' clinical microbiology labs. PLoS One. 9 (12), e114004 (2014).
  16. Hu, L., Zhou, P., Zhao, W., Hua, H., Yan, Z. Fluorescence staining vs. routine KOH smear for rapid diagnosis of oral candidiasis-A diagnostic test. Oral Dis. 26 (5), 941-947 (2020).
  17. Samaranayake, L. P. Candida krusei infections and fluconazole therapy. Hong Kong Med J. 3 (3), 312-314 (1997).
  18. Lee, Y., Puumala, E., Robbins, N., Cowen, L. E. Antifungal drug resistance: Molecular mechanisms in Candida albicans and beyond. Chem Rev. 121 (6), 3390-3411 (2021).
  19. Rihab, B., Lina, E. H., Noémie, S. T., Jean, S., Marjolaine, G. The experience of dry mouth and screening for Sjogren's syndrome by the dentist: patient-reported experiences. BMC Oral Health. 23 (1), 1010 (2023).
  20. Panpetch, W., et al. Oral Candida administration in a Clostridium difficile mouse model worsens disease severity but is attenuated by Bifidobacterium. PLoS One. 14 (1), e210798 (2019).
  21. Alwaily, E. R., Abood, M. S., Al Uobody, R. M. Diagnosis of oral candidiasis in patients under 12 years: 18S rRNA as a marker of molecular characterization of Candida tropicalis. Arch Razi Inst. 78 (1), 475-483 (2023).
  22. Chen, C. L., et al. Candida infection as an early sign of subsequent Sjögren's syndrome: A population-based matched cohort study. Front Med (Lausanne). 8, 796324 (2022).

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

205

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Contact Us

Recommend to library

JoVE NEWSLETTERS

Research

Education

Authors

Librarians

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved