Exame de Infecção Oral por Candida em Pacientes com Síndrome de Sjögren Primária

Resumo

Aqui, apresentamos um protocolo para o exame da infecção oral por Candida em pacientes com síndrome de Sjögren primária, que pode ser usado para tratamento oportuno e, posteriormente, evitando complicações relacionadas.

Resumo

A síndrome de Sjögren primária (SSp) é uma doença autoimune caracterizada por sintomas como boca seca, olhos secos e outros sintomas sistemáticos. Devido à hipossalivação experimentada por pacientes com SSP, freqüentemente ocorre disbacteriose oral. Uma complicação comum da SSp é a infecção oral por Candida . Neste artigo, os autores descrevem métodos sistemáticos que podem diagnosticar efetivamente a infecção oral por Candida e identificar as cepas de Candida usando saliva, esfregaços de mucosa oral ou enxaguatório bucal de pacientes com SSP. O ágar dextrose de Sabouraud (SDA), o ensaio de formação de hifas, o teste de esfregaço de hidróxido de potássio (KOH) e o ensaio de coloração branca de calcofluor (CFW) são usados para o diagnóstico de infecção oral por Candida . Um ágar diagnóstico de Candida é usado para a identificação de cepas de Candida . Finalmente, o teste de suscetibilidade antifúngica é usado para determinar o tratamento adequado com medicamentos antifúngicos. Este método padronizado pode melhorar o diagnóstico, o tratamento e a pesquisa futura de infecções orais por Candida relacionadas à SSp. O diagnóstico precoce, usando este método, também pode prevenir quaisquer complicações decorrentes do atraso no tratamento adequado.

Introdução

A candidíase é causada por Candida spp., que são patógenos oportunistas. As cepas comuns incluem Candida albicans, Candida krusei, Candida glabrata, Candida parapsilosis e Candida dubliniensis¹. As infecções oportunistas causadas por Candida spp. incluem infecções superficiais por Candida e candidíase invasiva. A candidíase invasiva ocorre principalmente em indivíduos imunocomprometidos; por exemplo, em pacientes com síndrome da imunodeficiência adquirida (AIDS), a candidíase invasiva pode ameaçar significativamente a qualidade de vida ou mesmo a expectativa de vida². A infecç....

Protocolo

Todos os procedimentos descritos abaixo foram aprovados pelo Comitê de Ética do Beijing Tiantan Hospital, Capital Medical University (NO. KY2023-177-01), e todos os pacientes envolvidos neste estudo forneceram consentimento informado.

1. Critérios de inclusão e exclusão de pacientes

1. Critérios de inclusão: Classificar os pacientes como pacientes com SSp se eles preencherem os critérios de 2016 do American College of Rheumatology (ACR)/European League Against Rheumatism (EULAR)¹². Especificamente, basear os critérios de classificação final na soma ponderada de cinco itens: positividade de ant....

Discussão

No presente manuscrito, fornecemos uma série de métodos sistemáticos, simples e viáveis para detectar infecções orais por Candida , identificar cepas de Candida e testar a suscetibilidade antifúngica de medicamentos comumente usados em pacientes com SSP.

Em ambientes práticos, nem todos os métodos apresentados neste manuscrito são necessários. O(s) método(s) de detecção oral de Candida pode(m) ser escolhido(s) com base na finalidade específica. Os tes.......

Materiais

Name	Company	Catalog Number	Comments
0.22 µm Syringe Filter	MERCK	SLGV004SL
1.5 mL Centrifuge Tube	axygen	MCT-150-C-S
10 cm Microbiological Culture Dishes	Jet Bio-Filtration Co. Ltd	TCD000100
15 mL Centrifuge Tube	Jet Bio-Filtration Co., Ltd	CFT011150
50 mL Centrifuge Tube	Corning	430290
96-well Microplates	Corning	3599
API 0.85% NaCl ampule	BIOMERIEUX	20070
Calcofluor White Stain	Sigma-Aldrich	18909-100ML-F
CHROMagar Candida	CHROMagar	P002860	Candida diagnostic agar
D(+)-Glucose Monohydrate	Sinopharm Chemical Reagent Co.,Ltd	10010518
Fetal Bovine Serum	Gibco	26170035
McFarland Standards Kit	BIOMERIEUX	70900
Nunc precision molded loops	ThermoFisher Scientific	254399
Phosphate Buffered Saline	Gibco	C10010500BT
Potassium Hydroxide	Aladdin	P112284-500g
PowerSoil DNA Isolation Kit	MO BIO	12888-50
RPMI 1640 Medium	Gibco	11875119
Sabourand's Agar Medium	Solarbio	S9710
Yeast Nitrogen Base Without Amino acids	Solarbio	Y8040
Yeast-like Fungal Susceptibility Kit (Microdilution)	BIOMERIEUX	14204