وضع مسبار دوبلر ليزر حول الحجاج لمراقبة تدفق الدم الدماغي قبل انسداد الشريان الدماغي الأوسط في نماذج القوارض

Summary

يتم عرض إجراء جراحي طفيف التوغل هنا ، والذي يتضمن وضع مسبار دوبلر بالليزر على الجمجمة فوق المنطقة البعيدة من الشريان الدماغي الأوسط (MCA) ، وهو موقع حول الحجاج مناسب للفئران والفئران ، لتقييم تدفق الدم أثناء انسداد MCA العابر.

Abstract

انسداد الشريان الدماغي الأوسط (MCAO) هو الطريقة القياسية الذهبية للنمذجة قبل السريرية للسكتة الدماغية الإقفارية في القوارض. ومع ذلك ، فإن الانسداد الناجح غير مضمون حتى من قبل أمهر الأيدي الجراحية. تحدث الأخطاء في المقام الأول عندما لا يتم وضع الفتيل في العمق الصحيح وتشمل حالات عدم وجود احتشاء أو ثقب في الأوعية الدموية ، مما قد يتسبب في الوفاة. قياس تدفق دوبلر بالليزر (LDF) هو تقنية موثوقة توفر ملاحظات في الوقت الفعلي حول تدفق الدم الدماغي الموضعي (CBF) أثناء إجراء MCAO. نوضح هنا تقنية سريعة للتنسيب حول الحجاج لمسبار دوبلر ليزر لقياس CBF في كل من الفئران والجرذان. كان الأساس المنطقي لدينا هو تبسيط تنفيذ LDF ، وتشجيع الاستخدام الواسع النطاق لتحسين الموثوقية الجراحية. تلغي هذه التقنية الحاجة إلى ترقق الجمجمة والمعدات المتخصصة ، مع وضعها في المنطقة المحيطة بالحجاج بدلا من التنسيب الظهري ، مما يعزز الكفاءة وسهولة التبني. يشمل البروتوكول الموصوف هنا الاستعدادات قبل الجراحة ، ووضع مسبار دوبلر حول الحجاج ، ورعاية ما بعد الجراحة. تتضمن النتائج التمثيلية صورا مرئية للعناصر الإجرائية جنبا إلى جنب مع تتبع LDF التمثيلي الذي يوضح جراحات MCAO الناجحة ، مع حالات وضع الخيوط غير الناجحة التي تؤدي إلى مضاعفات. يوضح البروتوكول LDF في تأكيد وضع الخيوط بشكل صحيح ويقدم إجراء مبسطا مقارنة بالطرق البديلة.

Introduction

تم استخدام طريقة انسداد الشريان الدماغي الأوسط (MCAO) على نطاق واسع في القوارض منذ تقديمها إلى المجتمع العلمي لتطبيقها على الفئران في عام 1986¹ مع تكيف Longa الموصوف في عام 1990² ، والتكيفات مع الفئران بعد فترة وجيزة³. على الرغم من عدم وصفه في منشور لونجا ، إلا أن استخدام إشارة قياس التدفق بالليزر دوبلر (LDF) لتأكيد وضع الفتيل سرعان ما تم وصفه في الأدبيات⁴. يظهر توظيف LDF أثناء إجراء MCAO بشكل بارز في الأدبيات ولكن تم تعيينه كخطوة اختيارية في الإجراءات التشغيلية القياسية الحالية لشبكات التقييم قبل السريري للسكتة الدماغية (SPAN)

Protocol

تم استخدام الفئران والجرذان البالغة لتوضيح هذا البروتوكول (25 جم ، C57BL / 6J ، مختبرات جاكسون ؛ 250 جم ، Sprague Dawley ، Envigo). تم تنفيذ التعامل مع والإجراءات التجريبية بموافقة والامتثال للجنة رعاية المؤسسي بجامعة أريزونا والقوانين الوطنية ووفقا لمبادئ رعاية المختبر¹¹. تم إيواء الفئران والفئران بجدول ضوئي / مظلم لمدة 12 ساعة (7 صباحا - 7 مساء) مع توفر الطعام والماء المتاح.

1. التحضير قبل الجراحة

ملاحظة: عادة ما يتم إجراء جراحة MCAO في القوارض كجراحة للبقاء على قيد الحياة ، مما يستلزم استخدام تقنية جراحية معقمة أو نصائح فقط ، كما....

النتائج

تم تصوير وضع مسبار دوبلر بالليزر في منطقة MCA بصريا في الشكل 1 ، حيث يقدم صورة تخطيطية للأوعية الدموية ويعمل كدليل مرئي من المنظورات السهمية والظهرية. يلخص الشكل 2 الخطوات الحاسمة لوضع مسبار دوبلر بالليزر والنتائج في الماوس. يقد?.......

Discussion

MCAO هو الإجراء القياسي الذهبي لنمذجة انسداد الشريان الدماغي وإعادة التروية في القوارض وكان حجر الزاوية في أبحاث السكتة الدماغية قبل السريرية ، مما مكن من تحريض نقص التروية البؤري في القوارض لتقليد الفيزيولوجيا المرضية للسكتة الدماغية البشرية. إنه إجراء جراحي صارم مع تب.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
curved spring scissors	Castroviejo	1501710
forceps #5	Fine science tools	11250-20
forceps #5/45	Fine science tools	1151-35
Forcepts Cautery tool	Conmed	M18019-01
Laboratory tape	Fisherbrand Labeling Tape	15-950
Laser Doppler Monitor	Moore Instruments	MOORVMS-LDF
LDF software	Perisoft for Windows or moorSOFT	NA
Mouse clippers	Philips Norelco	MG7910
Periflux System 4000, probe 407	Perimed	equipment no longer available
plastic wrap	Glad	press n seal
Rat clippers	oster	A5 or similar
Small rodent anesthesia	JD Medical	custom order
small scissors	excelta	362 Sissors or similar
Temperature monitor system with probe	Physitemp	TCAT-2AC Controller