يمكن تنفيذ هذه النماذج لتقييم جوانب مختلفة من استجابة التئام الجروح، بما في ذلك الحركية الخلوية والسيكتوكين وإغلاق الجروح. يسمح نموذج الإسفنج PVA باستعادة الملايين من الكريات البيض للهروخ للتحليلات الظاهرية والوظيفية ، في حين أن نموذج استئصال الجلد الذيل يسمح بالتصور السهل للجروح البطيئة. يمكن استخدام الإسفنج PVA ونماذج الجرح الذيل الختانية بالاقتران مع الحالات المرضية المصاحبة، مثل مرض السكري أو الالتهاب الرئوي، لفهم تأثيرها على التئام الجروح.
إظهار الإجراءات مع (ميريديث كرين) سيكون (بيل هنري) مساعد أبحاث من مختبري قبل البدء في التجربة، استخدم مقصًا لقطع صفائح من الإسفنج PVA إلى ثمانية في ثمانية في أربعة ملليمترات. إعادة هيدرات القطع الاسفنج في برنامج تلفزيوني معقمة في منقار لمدة 10 دقائق قبل الأوتوكلاف تعقيم الإسفنج في برنامج تلفزيوني.
عندما يكون الإسفنج قد برد، وتخزين الإسفنج المغمورة في برنامج تلفزيوني في أربع درجات مئوية. في يوم الإجراء ، ضع ستة إسفنجات لكل تجريبي في طبق ثقافة معقمة في غطاء تدفق لارينار معقمة ، وتأكد من عدم الاستجابة لقرصة إصبع القدم في تخدير ، يبلغ من العمر ثمانية إلى 12 أسبوعًا ، ذكرًا ، فأر C57-Black/6. وقد مساعد استخدام مقص لإزالة الشعر على طول dorsum والشاش العقيم لتطبيق حل بوديوني اليود إلى منطقة حلق مرتين، تليها تطبيق واحد الإيثانول 70٪.
وينبغي أن مساعد ثم نقل الماوس على الستائر الجراحية العقيمة وضعت على وسادة ساخنة. ارتداء قفازات معقمة، واستخدام ملقط لسحب الجلد الظهري بعيدا عن الأنسجة الكامنة، واستخدام مقص الجراحية العقيمة لجعل شق سنتيمترين على طول خط الوسط الظهري ما يقرب من سنتيمترين في الجزء الأمامي من قاعدة الذيل. عقد شق مفتوح مع ملقط العقيمة، واستخدام معقمة، منحنية، مقص الجراحية حادة الرؤوس لتشكيل جيب تحت الجلد على طول dorsum في واحدة من المواقف كما هو مبين في الشكل.
مرة واحدة وقد تم إدراج مقص، وفتح وإغلاق النصائح مرتين لتشكيل جيب كبير بما يكفي لعقد الاسفنج المدرجة. عندما تم إنشاء الجيب، واستخدام مقص الجراحية المعقمة للضغط بلطف واحدة الإسفنج PVA في طبق الثقافة لإزالة برنامج تلفزيوني الزائدة. المقبل، ورفع الاسفنج من زاوية واحدة، ويؤدي مع الزاوية التي عقدت من قبل مقص، ووضع الاسفنج في الجيب تحت الجلد.
عندما تم وضع جميع الإسفنج الستة كما هو موضح ، استخدم ملقطًا معقمة لقرص الجلد الظهري المشقوق معًا ، وإغلاق الشق مع مقطعين من جروح الفولاذ المقاوم للصدأ. لعزل السوائل الإسفنجية PVA، من يوم إلى 14 يوما بعد الزرع، وإزالة المواد الغذائية الجراحية، وفتح شق مع ملقط مسنن. استخدم المقص لتمديد الشق على طول خط الوسط الظهري، واستخدم ملقط لاستخراج إسفنجة واحدة من جيبه تحت الجلد.
ضع الاسفنج في فوهة حقنة من خمسة ملليلتر متداخلة في أنبوب ثقافة 16 ملليلتر على الجليد ، واستخدم المقص لفصل أي نسيج الضام الذي يبقى متمسكًا بسطح الإسفنج ، حسب الضرورة. عندما تم استخراج جميع الإسفنج ونقل كما هو موضح، الطرد المركزي أنبوب الثقافة لجمع السائل الجرح. لعزل الخلايا من الإسفنج PVA، بعد جمع الإسفنج كما أظهرت للتو، ووضعها في أنبوب مخروطي 15 ملليلتر تحتوي على خمسة ملليلتر من هبيرس لجمع المتوسطة.
عندما تم جمع كل من الإسفنج، decant تعليق الاسفنج في حقيبة خلاط 80 ملليلتر، وشنق الحقيبة من فتحة خلاط مجداف بحيث المجاذيف سوف تضرب الإسفنج والمتوسطة. تعيين خلاط مجداف لتشغيل على ارتفاع لمدة 60 ثانية، واضغط على بدء. عندما يتوقف الخلاط، اضغط على الإسفنج في الحقيبة لتحرير الوسط تمامًا، واستخدم ماصة لنقل الوسيط من حقيبة الخلاط مرة أخرى إلى أنبوب 15 ملليلتر.
ضبط إعدادات خلاط مجداف لتشغيل لمدة 30 ثانية على ارتفاع، وإضافة خمسة ملليلتر من المتوسطة إلى حقيبة الخلاط. كرر عملية المعدة مرتين أكثر قبل الطرد المركزي أنبوب من المتوسطة التي تم جمعها. وينبغي أن تكون هناك بيليه حمراء من الخلايا وخلايا الدم الحمراء مرئية في الجزء السفلي من أنبوب المخروطية.
مزيج 900 ميكرولترات من الماء المقطر مع الخلايا لمدة ثلاث إلى خمس ثوان قبل تحييد تحلل مع 100 ميكرولترات من برنامج تلفزيوني 10x وأربعة ملليلتر من 1X PBS. جمع الخلايا عن طريق الطرد المركزي، وإعادة تعليق بيليه الخلية البيضاء في الوسط المناسب لتحليل المصب. لإنشاء جرح جلد الذيل، بعد التأكد من عدم وجود استجابة لقرصة إصبع القدم في التخدير، ثمانية إلى 12 أسبوعا، ذكر، C57-Black/6 الماوس، واستخدام الشاش المعقم لتطبيق حل بوديوني اليود مرتين إلى موقع الجراحة، تليها تطبيق واحد من 70٪الإيثانول.
باستخدام علامة دائمة وقالب مسبق ، تتبع مقطع 10 في ثلاثة ملليمترات على السطح الظهري للذيل ، 10 ملليمترات من قاعدة الذيل ، ووضع الماوس على الستائر الجراحية العقيمة. ارتداء قفازات جراحية معقمة، واستخدام شفرة مشرط معقمة لجعل شق كامل سمك على طول اليمين، وأسفل، والحافات اليسرى من منطقة الجرح. باستخدام ملقط معقمة، قشر الجلد مختف بعيدا عن الذيل، واستخدام مقص الجراحية العقيمة لقطع بعيدا الحافة العليا لمنطقة الجرح.
استخدم شاشًا معقّمًا لممارسة الضغط على الجرح لوقف النزيف، وطبق فيلم حاجز رش على سرير الجرح. ثم، تصوير الجروح من مسافة ثابتة في فترات زمنية منتظمة، وتحليل الصور بواسطة تحليل القياس لتحديد قياسات منطقة الجرح. عملية زرع الإسفنج PVA يولد استجابة التهابية النظامية، كما يتضح من تحريض IL-6 في البلازما بعد يوم واحد من الجرح.
عدد الخلايا التي يمكن استردادها من الجروح الإسفنج PVA يزيد مع مرور الوقت، مع العدلات، أحادية، و الضامة التي تضم السكان الخلوية الأولية المتسللة داخل الإسفنج. يتم تحديد العدلات على أنها خلايا Ly6G إيجابية، سيغليك-F-سالبة. الخلايا الإيجابية السيجلج-F هي في المقام الأول الحمضات.
الغاء على Ly6G السلبية، Siglec-F-سالبة الخلايا يسمح تحديد الخلايا أحادية وضامة إيجابية F4/80. يمكن تمييز الخلايا الإيجابية F4/80 بشكل أكبر من خلال تعبير Ly6C للتمييز بين أحاديات Ly6C العالية والزامة المشتقة من أحادية الوليست منخفضة Ly6C. نموذج الجلد الذيل الختان يوفر بديلا لطريقة خزعة لكمة الجلد الظهرية لدراسة إغلاق الجرح في الجلد شركة تفتقر إلى الفراء الكثيف.
ويمكن قياس حجم إغلاق الجرح عن طريق قياس مساحة سرير الجرح مع مرور الوقت. ويمكن أيضا أن يلاحظ الجرح الذيل الجلد في المقطع عرضية عن طريق تحليل النسيجية عن طريق H و E وماسون تلطيخ ثلاثية الألوان. في هذه الصور، يتم الإشارة إلى الهوامش الجانبيّة للجلد المُكّن بواسطة رؤوس الأسهم على السطح الظهريّ للذيل.
لفهم التئام الجروح ثابتة الحالة ، يمكن أيضًا اختبار المركبات العلاجية أو التدخلات من خلال حقنها مباشرة في الإسفنج PVA أو من خلال التسليم إلى سرير جرح الذيل.
