يقدم هذا البروتوكول إصابة دقيقة يتم التحكم فيها جراحيًا للحث على نقل الحبل الشوكي الكامل في الفئران ذات القابلية العالية للتكرار ومعدلات البقاء عالية جدًا. استخدام الحفر غرامة لإصابة العظام يقلل من الأضرار التي لحقت الأنسجة المحيطة بها، مما يسمح للإصابة والعلاج الاستجابات أن تكون على غرار مع مزيد من الدقة. لإجراء عملية استئصال لامينك، بعد التأكد من عدم الاستجابة لدواسة منعكس في تخدير ثمانية إلى 10 أسابيع أنثى C57 سوداء 6 ماوس، حلق الفراء الخلفي لفضح المنطقة الجراحية على العمود الفقري الظهري وتعقيم المنطقة الحليقة مع مسحات القطن العقيمة غارقة في السائل المطهر بوديوني اليود والروح الجراحية.
باستخدام مشرط، وجعل شق خط الوسط الرأسي في مستوى T10 الفقرات واستخدام ملقط على التوالي لرفع الجلد من اللفافة الكامنة لتسهيل وضع الداهم. لفضح العمود الفقري من T9 من خلال T11 الفقرات، واستخدام حافة حادة من مشرط لجعل شق خط الوسط الصغيرة في الأنسجة تحت الجلد والزية الكامنة واستخدام غرامة تلميح غير حادة ملقط لتشريح وتعكس اللفة. لفضح الفرمي، استخدم الطرف الحاد من المشرط لتقسيم الجذع الظهري والعضلات الطفيلية على طول العمود الفقري لـ T9 من خلال فقرات T11 واستخدم ملقطًا ناعمًا حادًا لتشريح العضلات في الطبقات لفضح لايمينا الفقرات.
استخدام نفس ملقط لجعل جيوب صغيرة حول العمليات العرضية من الفقرات T10 وربط شوكات من ملقط المنحنية تحت العمليات العرضية داخل جيوب المنشأة لتحقيق الاستقرار في الجسم الفقري T10. شطف دقيق t10 laminae مع المالحة الدافئة واستخدام مسحات القطن لمسح بلطف سطح عظمي نظيفة، مع الحرص على أن لا العضلات أو الرباط المرفقات لا تزال على طول السطح الثنائي. لكسر الصفيحة ثنائيا، استخدم قطر 0.55 ملليمتر، سبعة ملليمتر طول طول حفر طرف بت لتتبع مسار عمودي من الفضاء T9/T10 بين الفقرات إلى الفضاء بين الفقرات T10/T11 على طول كل من T10 صفح مع الحفر قبالة.
عندما تم تتبع المسار، قم بتشغيل الحفر وبطيئا وبعناية جعل خندق عمودي على اللامينا اليمنى من الفقرات T10، وذلك باستخدام ملقط المنحني للحفاظ على الفقرات مستقرة. بعد تكرار العملية على الجانب الأيسر من اللامينا، ري الأنسجة مع المالحة الدافئة لغسل أي شظايا العظام المتبقية. الحفاظ على قبضة جيدة على العمود الفقري بيد واحدة أمر ضروري لهذه الخطوة.
من المهم أيضا أن تصبح مريحة وواثقة مع استخدام الحفر. بعد ذلك، استخدم ملقط طرف رفيع الزاوية لقبضة العملية العرضية وإزالة الجزء الظهري بأكمله من الصفيحة مفصولة بالحفر الثنائي. ثم، ري ومسحة حسب الضرورة للسماح تصور واضح من الحبل الشوكي داخل نافذة استئصال لاميني.
للحث على إصابة الحبل الشوكي داخل الحبل المكشوف ، استخدم شفرة ضيقة مستديرة مستديرة لشريحة الحبل في وسط نافذة استئصال لامينك ، مع الحرص على اكتساح الاستراحة الجانبية للعمود الفقري للحث على إصابة كاملة في عملية نقل. لتأكيد اكتمال إصابة النقل، استخدم ملقط الطرف الدقيق الفظ لإزالة أي اتصالات متبقية في موقع النقل. بمجرد أن يتم تحقيق الهدسات في موقع النقل ، حرر قبضة الزلب المنحنية على فقرة T10 وإحضار حواف العضلات التشريحية معًا على طول خط الوسط لتحقيق apposition جيد.
باستخدام 5/0 البوليجليكتين 910 خياطة قابلة للامتصاص، خياطة العضلات في طبقات، والتأكد من أن انحناء الطبيعية للعمود الفقري لا يسبب أي توتر في خط خياطة أو فتح الغرز. ثم، استخدام 5/0 خياطة الحرير غير امتصاص لإغلاق الأنسجة تحت الجلد والجلد، مع الحرص على عدم وجود نزيف، جلطات، أو الحطام المتبقية تحت الجلد قبل الإغلاق. لتقييم ما إذا كانت هذه الطريقة لحفز إصابة الحبل الشوكي من نوع النقل في الفئران قابلة للتكرار ومتسقة ، يمكن تحليل الحبل الشوكي المصاب عن طريق الكيمياء المناعية ويمكن إجراء الاختبارات السلوكية على الفئران.
وضع العلامات المناعية ضد علامة الأسترويتي، البروتين البيبريل الحمضي، يسهل ترسيم حدود الحبل الشوكي السليم. في هذا المقطع الطولي، يمكن تصور موقع الإصابة الموجود بين جذوع الحبل كما هو متوقع. ويمكن أن يحدث عيب ثابت الحجم في موقع النقل مع متوسط أدنى مسافة 550.4، زائد أو ناقص 17.3 ميكرومتر.
البيانات السلوكية نشر مقياس الماوس باسو من اختبار ميداني مفتوح يظهر أن الفئران المصابة لا تظهر أي حركة الأطراف الخلفية بعد الإصابة. وهكذا، ينتج البروتوكول إصابة كاملة وموثوق بها من نوع النقل يؤدي إلى فقدان كامل للوظيفة تحت مستوى الإصابة الذي لا يؤدي إلى عكس تلقائي للشلل. الحرص على حفر في خط مستقيم مع اليد مستقرة، لأنه يمكن أن يكون صعبا جدا لإصلاح نافذة استئصال لامينكيدي مرة واحدة وقد تم حفرها بشكل غير صحيح.
بعد تحريض إصابة الحبل الشوكي، يمكن تطبيق خيارات العلاج المختلفة، بما في ذلك تسليم الأدوية وزرع الخلايا لتحديد العلاجات المحتملة التي تحسن التعافي من إصابة الحبل الشوكي.
