Bu yöntem, farklı ağrı koşulları altında hayvanların etkili veya motivasyonel durumu hakkındaki soruları cevaplamaya yardımcı olabilir. Klinik öncesi araştırmaların çevirisini geliştirmede önemli bir adımdır. Bu tekniğin temel avantajı, nispeten hızlı ve kolay bir şekilde gerçekleştirilmesi, ancak yine de ağrıyla ilgili davranışları etkileyen karmaşık motivasyonları değerlendirmesidir.
Birinci odanın yan duvarlarını, zeminini ve tavanını opak beyaz üç milimetre kalınlığında bir akrilik kullanarak inşa ederek başlayın. Ön cepheye bakan duvar için, üç milimetre kalınlığında net bir akrilik kullanın. Birinci odanın kapağını bir menteşe ile takın, böylece fareler odaya kolayca yerleştirilebilir ve odadan alınabilir.
Ardından, yaklaşık 4.800 lüks aydınlatma sağlamak için kendinden yapışkanlı ışık yayan diyot bandını kapağın iç yüzeyine takın. MCA cihazının geri kalanından odacığı kapatmak için opak bir akrilik tabakayı yerine ve dışına kaydırın. Daha sonra, 270 milimetre uzunluğunda aydınlatılmamış bir oda olan MCA test odasını, üstte menteşeli bir kapakla her tarafta yarı saydam koyu kırmızı akrilik kullanarak inşa edin.
Ardından, odanın tabanına, 0,5 milimetre çapında uçlara sahip bir dizi künt probun çıkıntı yapabileceği iki milimetre delikli 13 x 31 ızgara yerleştirin. Prob taban plakasının altına ek akrilik levhalar yerleştirerek probların yüksekliğini ayarlayın. Bu yaklaşımı kullanarak cihazı sıfır, iki ve beş milimetre prob yükseklikleriyle yapılandırın.
Körelmiş harita pimlerine veya benzeri malzemelere alternatif olarak, ikinci odanın zeminini ve prob plakasını naylon 12 plastik gibi yıkanabilir ve biyouyumlu bir malzemeyle yazdırmak için 3D yazıcı dosyalarını kullanın. Son olarak, bir ve iki numaralı odalara benzer menteşeli bir kapakla her tarafta yarı saydam koyu kırmızı akrilik kullanarak karanlık bir oda üç inşa edin. İkinci odadaki mekanik problardan karanlık bir kaçış alanı olarak hizmet etmesi için birinci odanın karşı ucuna yerleştirin.
Temel testi planlamadan bir gün önce, tüm cihazın sosyal keşfini kolaylaştırmak için fareleri kafes arkadaşlarıyla 5 ila 15 dakika boyunca MCA ünitesine alıştırmak. Birinci odadaki LED'lerin kapatıldığından, bir ve iki oda arasındaki bariyerin açık tutulduğundan ve probların ikinci odanın tabanından çıkıntı yapmadığından emin olun. Ardından, tüm MCA cihazının yandan bakan görünümüyle bir tripoda 1080 piksel çekim yapabilen bir video kamera kurun.
Görüş alanını, MCA kaydedilen görüntüyü dolduracak şekilde ayarlayın. Kayıt başladıktan sonra, videonun başlangıcını hayvanın test çalışmasıyla ilgili tanımlayıcı bilgilerle etiketlemek için kameranın saha görünümünde elde taşınan kuru silme tahtasını tutun. İlk çalıştırma için, prob yüksekliğini sıfıra ayarlayın ve test edilecek fareyi ev kafesinden bariyer kapısı yerinde olacak şekilde bir odaya aktarın.
Kaydedilen çekimde görünen bir zamanlayıcı başlatın. 10 saniye sonra, odayı bir LED'i açın. Fare 20 saniye boyunca yanan odada kaldıktan sonra, bir ve iki oda arasındaki bariyeri geri çekin.
Hayvanı iki dakika boyunca gözlemleyin ve test devam ederken gecikmeleri veya bekleme sürelerini bir kronometre ile ölçün. İkinci odaya ilk girişteki gecikmeyi, ikinci odanın yarısından fazlasını geçme gecikmesini, ikinci odadaki toplam bekleme süresini, üçüncü odaya ulaşma gecikmesini ve her odadaki toplam bekleme süresini iki dakika içinde kaydedin ve bunları oranlara dönüştürün. Test tamamlandıktan sonra, fareyi ev kafesine geri getirin.
MCA odalarını% 70 etanol ile temizleyin ve tamamen kurumasını bekleyin. Prob yüksekliği sıfıra ayarlanmış olarak kohorttaki tüm fareleri çalıştırdıktan sonra, mekanik prob taban plakasının altına üç milimetrelik bir akrilik levha yerleştirin ve çalıştırmayı iki milimetrelik bir prob yüksekliği ile tekrarlayın. Prob yüksekliği iki milimetreye ayarlanmış tüm fareleri çalıştırdıktan sonra, prob taban plakasının altına üç milimetre daha akrilik levha yerleştirin ve çalıştırmayı beş milimetrelik bir prob yüksekliği ile tekrarlayın.
Test seansının sonunda bir dezenfektan ile son bir temizlik yapın. Freund'un adjuvan kaynaklı enflamatuar ağrı modelinin tamamında, bir salin enjeksiyonu, başlangıçla karşılaştırıldığında kaçış gecikmesini değiştirmez. Adjuvan ile enjekte edilen fareler, enjeksiyondan dört gün sonra kaçış gecikmesinde önemli bir artış gösterdi, ancak yalnızca prob yüksekliği beş milimetreye yükseltildiğinde.
Bu artan gecikme, testin başlamasından 90 dakika önce karprofen alan farelerde görülmedi. Nöropatik ağrının korunmuş sinir hasarı modeli, prob yüksekliği beş milimetreye ayarlandığında taban çizgisine karşı kaçma gecikmesini önemli ölçüde arttırdı. Bu artış, testten 90 dakika önce opioid analjezik buprenorfin uygulanması ile önlendi.
Sinir hasarından önce MCA testinin temel turuna tabi tutulmayan farelerde artan kaçış gecikmesi de gözlenmiştir. Beş milimetrede korunmuş sinir hasarı farelerinde artan kaçış gecikmesi, testten 90 dakika önce uygulanan gabapentin ile önlendi. Kırık veya döküm modelinde, birinci odadan kaçma gecikmesi, yaralanmadan önce prob yüksekliği ile orantılı olarak artmıştır.
Yaralanma sonrası, gecikme sıfır milimetrede değişmeden kaldı, ancak erkekler için iki milimetre ve beş milimetre prob yüksekliğinde ve kadınlar için beş milimetre prob yüksekliğinde, taban çizgisine kıyasla önemli ölçüde arttı. Bu prosedürü denerken hatırlanması gereken en önemli şey, tüm farelerin MCA cihazına alıştığından emin olmak ve çalışma boyunca uygun randomizasyon ve körleştirmeyi sürdürmektir. Bu yöntem, von Frey veya koşullu yer tercihi dahil olmak üzere diğer ağrı duyarlılığı ölçümleriyle birlikte kullanılabilir.
