الهدف العام من هذا الإجراء هو إظهار الاستئصال الجراحي لخصيتي الفئران والمبيضين بطريقة سريعة وآمنة وفعالة. يتم إجراء استئصال خصية الفئران عن طريق شق خط الوسط البطني في كيس الصفن ، حيث يتم عزل الخصيتين وإزالتهما ، يليه إغلاق شق الجلد. يتم إجراء استئصال المبيض الفئران عن طريق شق ظهري جانبي في البطن حيث يتم عزل المبيض وإزالته ، يليه إغلاق شق الجلد ، مع خيار تكرار هذا الإجراء على الجانب الآخر لإجراء استئصال المبيض الثنائي.
لبدء استئصال الخصية للفأر ، ابدأ أولا بتسجيل وزن الفأر الذكر واستعد لإدارة مسكنات الألم والتخدير المناسبة وفقا لإرشادات مؤسستك. بمجرد أن يصبح الفأر تحت التخدير ، قم بتغطية العينين بجل مزلق للعين لحمايتهما من الجفاف أثناء العملية. قبل المتابعة ، تأكد من أن الماوس في مستوى التخدير المناسب عن طريق إجراء اختبار استجابة قرصة إصبع القدم.
بعد ذلك ، حلق المناطق الأربية وكيس الصفن من الماوس. باستخدام قضيب ذو رأس قطني ، ضعي طبقة رقيقة من كريم إزالة الشعر على موقع الجراحة والمناطق المحيطة بها. بعد 30 ثانية ، قم بإزالة كريم مزيل الشعر باستخدام اسفنجة الشاش النظيفة.
انقل الماوس إلى منطقة جراحية وتأكد من توفر مصدر للحرارة. استخدم شريطا لاصقا ناعما للصق أقدام الماوس بحصيرة الجراحة. إذا صعدت الخصيتان إلى البطن ، فاستخدم ضغطا لطيفا على البطن لمساعدتهما على النزول.
افرك الجلد بمحلول Betadine ، بدءا من المنتصف فوق موقع الجراحة واعمل بسهولة للخارج باتجاه حدود المنطقة المحلوقة. اتبع مقشر Betadine مع فرك الكحول بطريقة مماثلة. كرر هذه العملية ثلاث مرات لضمان تطهير الجلد بشكل صحيح.
غطي الفأر بالستارة الجراحية. أمسك الجلد وقم بعمل شق في خط الوسط يبلغ طوله حوالي 1 إلى 1 1/2 سم. عند الإمساك بالحدود المقطوعة للجلد ، استخدم أداة ذات رأس حاد لفصل الجلد عن الأنسجة الكامنة.
خذ بعض الوقت للقيام بذلك على الحدود الجانبية والعلوية والسفلية للشق. بعد ذلك ، اعزل خصية واحدة عن طريق تحريك شق الجلد لتكون فوقها مباشرة. استخدم زوجا من الملقط للإمساك بعضلة المشمرة الرفيعة والشفافة التي تحيط بالخصية.
يمكن تأكيد تحديد النسيج الصحيح من خلال شفافيته وقدرته على التحرك بشكل مستقل عن الأنسجة الكامنة المغلقة بداخله. بعد ذلك ، شق عضلة المشمرة عن طريق إجراء شق في قمة الأنسجة. ضع مشبك قفل على الحد الخلفي لعضلة المشمرة المقطوعة لتثبيت التوتر على الأنسجة.
استخدم زوجا من الملقط للإمساك بالخصية وإخراجها من غمد المشرقة. بمجرد خروج الخصية ، قم بلف الأنسجة بشكل جانبي وقم بتوطين نقطة إدخال المشمرة التي تربط عضلة المشمرة بالخصية والبربخ على الجانب الخلفي من الخصية. المشبك وتمزيق هذا النسيج لقطع هذا الاتصال.
قم بإضفاء الطابع الخارجي على وسادة الدهون الأربية عن طريق سحبها ببطء للخارج. أثناء القيام بذلك ، راقب علامات النزيف وتأكد من عدم الإضرار بأي من الأوعية الدموية في هذه العملية. بعد ذلك ، استخدم زوجا من مرقئ القفل لتثبيت الحبل المنوي والأوعية الدموية.
أثناء الاحتفاظ بتوتر طفيف على الخصية ، قم بكي الحبل المنوي والأوعية الدموية البعيدة عن مشبك مرقئ. حرر المرقئ ببطء وتأكد من أن جذع الأنسجة لديه إرقاء جيد ولا يستمر في النزيف. إن تطبيق ضغط خارجي طفيف على عضلة المشمرة سيسمح لجذع الأنسجة هذا بالتراجع إلى تجويف الجسم.
اجمع جانبي عضلة المشمرة معا. باستخدام 4-0 أو 5-0 خيوط قابلة للامتصاص ، ضع خياطة لربط طرفي عضلة المشرقة. بمجرد الانتهاء من الخيط ، قم بقص نهايات مادة الخياطة ليكون طولها 1/2 سنتيمتر.
كرر هذه العملية للخصية الأخرى عن طريق تحريك شق الجلد ليكون فوق الجانب الآخر ، واتبع نفس الخطوات المستخدمة لإزالة الخصية الأولى. بمجرد إزالة كلتا الخصيتين وخياطة جانبي المشرقة ، قم بتحريك الجلد لأعلى واستعد لتطبيق مشبك الجرح على المنطقة. تأكد من أن نهايات الخيط لن يتم القبض عليها في مشبك الجرح.
الماوس جاهز الآن لمواصلة المراقبة بعد العملية الجراحية. للتحضير لاستئصال المبيض الفأر ، قم بوزن أنثى فأر وإعطاء مسكنات الألم والتخدير وفقا لإرشادات مؤسستك. قم بإدارة جل العين المزلق وتحقق للتأكد من أن الماوس ليس لديه استجابة قرصة إصبع القدم.
احلق المناطق الظهرية الجانبية من ظهر الفأر لإعداد موقع الجراحة. باستخدام أداة تطبيق ذات رأس قطني ، ضعي طبقة من كريم إزالة الشعر المزيل للشعر على المنطقة المحلوقة. بعد 30 ثانية ، قم بإزالة الكريم باستخدام اسفنجة شاش نظيفة.
انقل الماوس إلى حصيرة جراحية وتأكد من توفر مصدر للحرارة. افركي الجلد بمحلول Betadine ، بدءا من المنتصف والعمل بسهولة للخارج باتجاه حدود المنطقة المحلوقة. اتبع هذا عن طريق فرك الجلد بمحلول كحول 70٪ يطبق بطريقة مماثلة.
كرر هذه العملية لما مجموعه ثلاث مرات لضمان تطهير الجلد بشكل صحيح. خطط للشق الجراحي كما هو مفصل في البروتوكول المكتوب. ضع ستارة جراحية على موقع جراحة الفأر.
أمسك الجلد بالملقط وشق الجلد بشق سنتيمتر واحد. استخدم أداة ذات رأس حاد أو زوج عادي من مرقئ لفصل الجلد عن الأنسجة الكامنة. خذ بعض الوقت للقيام بذلك على الحدود الجانبية والعلوية والسفلية للشق.
أمسك جدار البطن وشق بشق 1/2 سم. استخدم زوجا من الملقط لتحديد موقع المبيض داخل الشق وسحبه لإضفاء الطابع الخارجي عليه. بمجرد تحديد الأنسجة ، استخدم زوجا من مرقئ لربط وسحق قرن الرحم البعيد.
استخدم زوجا ثانيا من مرقئ الدم أو زوجا من الملقط لتثبيت المشبك البعيد عن المشبك الأول. امسك مرقئ القاع ، اسحب المشبك العلوي لأعلى وبعيدا عن الجسم لأداء سحق وتمزق قرن الرحم البعيد. حرر المرقئ ببطء وراقبه للتأكد من عدم وجود نزيف مفرط قادم من موقع الجراحة.
اجمع جانبي جدار البطن معا وخيط الشق مغلقا ، باستخدام خياطة واحدة مع مادة خياطة قابلة للامتصاص 4-0. بمجرد تثبيت الخيط ، قم بقص نهايات مادة الخياطة ليكون طولها 1/2 سنتيمتر. اجمع جانبي الجلد معا واستعد لوضع مشبك الجرح.
أثناء تحريك الجلد ، ضع مشبك الجرح فوق موقع الشق. الماوس جاهز الآن لمواصلة المراقبة بعد العملية الجراحية. قم بتوثيق تاريخ الإجراء ووقته وإدارة المسكنات وفقا لإرشاداتك المؤسسية.
بمجرد خضوع الفأر لاستئصال الخصية الجراحي أو استئصال المبيض ، انقله إلى قفص نظيف وساخن. بمجرد أن يستعيد الفأر الاستلقاء القصي ، ضعه في قفص نظيف ووفر طعاما رطبا وماء. أثناء التعافي ، تحقق بشكل متكرر من موقع جراحة الفأر وابحث عن أي علامات للعدوى أو النزيف.
لمنع تلف مشبك الجرح ، قم بإزالة أي موائل كوخ الإسكيمو للقوارض من قفص فأر استئصال المبيض لمدة أسبوع واحد بعد الجراحة. بعد 14 يوما ، قم بإزالة مقاطع الجرح من جلد الماوس. يوضح البروتوكول الموضح كيفية إجراء استئصال الخصية واستئصال المبيض في الفأر لإنشاء نموذج مستنفد للهرمونات الجنسية.
يتضمن ذلك إزالة الخصيتين من خلال شق خط الوسط في كيس الصفن ، يليه إضفاء الطابع الخارجي على الخصيتين وقطع الحبل المنوي في الأوعية الدموية ، مما يؤدي إلى إزالة الخصية والبربخ ومنصات الدهون الأربية. يمكن إجراء استئصال المبيض الجراحي عن طريق شق ظهري جانبي في الظهر وإضفاء الطابع الخارجي على المبيض وقناة البيض وقرن الرحم البعيد. ويتبع ذلك قطع قرن الرحم البعيد ، مما يؤدي إلى إزالة المبيض وقناة البيض.
ستؤدي التقنية الجراحية الدقيقة والرعاية المناسبة بعد العملية الجراحية إلى مواقع جراحية جيدة الشفاء. يمكن التحقق من صحة هذه العمليات الجراحية عن طريق تحليل مستويات الهرمون في عينات مصل الفئران بعد أسبوع واحد من استئصال الخصية. يمكن تأكيد استئصال المبيض من خلال ملاحظة ضمور الرحم بعد إزالة المبايض.
يتيح هذا البروتوكول الاستئصال الجراحي السريع والفعال للمبيض والخصيتين من الفئران لتوليد نموذج مستنفد للهرمونات الجنسية. يمكن أن يكون لهذا العديد من الاستخدامات لدراسة كيفية تأثير استنفاد هذه الهرمونات على مختلف الأعضاء والعمليات الفسيولوجية.
