تجلط الدم الشرياني الناجم عن كلوريد الحديديك وجمع العينات لتحليل المجهر الإلكتروني 3D

مع هذه الطريقة ، يمكن للمرء تحديد مكونات الصفائح الدموية ونظام مرقئ مهم للتخثر. بالإضافة إلى ذلك ، يمكن لهذه الطريقة تحديد كيفية تأثر نمو الخثرة والبنية على المستوى الخلوي. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنها تتيح طريقة قابلة للتكرار لدراسة العديد من مراحل تجلط الدم على المستوى الهيكلي.

يجب على الشخص الجديد في هذه التقنية تجنب الإفراط في التعامل مع الأنسجة في منطقة الجراحة. هذا يمكن أن يؤدي إلى النزيف ويمكن أن يزيد من تعقيد تحديد الشريان السباتي. ابدأ في تحديد موقع الإصابة بعد تعريض الشريان السباتي عن طريق تطويق المنطقة بشكل فضفاض بين خيطين جراحيين بحجم 0.1 ملم.

ضع المسبار تحت الشريان البعيد من الخيط السفلي. أدخل القطعة البلاستيكية تحت الشريان بين الخيطين لتحديد موقع إصابة كلوريد الحديد. خذ قياسات التدفق قبل إجراء الإصابة لملاحظة التدفق القاعدي.

قم بإجراء الإصابة عن طريق وضع ورق ترشيح منقوع بكلوريد الحديد على الشريان لمدة ثلاث دقائق. قم بإزالة ورق الترشيح بعد ثلاث دقائق لمنع المدى المتغير للإصابة ولتسهيل عد التدفق بواسطة المسبار. أضف محلول ملحي في موقع الإصابة لإزالة أي كلوريد الحديد المتبقي الزائد.

مراقبة قراءة التدفق. عندما ينخفض التدفق إلى أقل من 50٪ من القيمة الأولية ، قم بإزالة المسبار. جفف المنطقة بسرعة وأضف المثبت لإصلاح منطقة الإصابة خارجيا.

بعد ذلك ، أمسك الشريان على الفور بالقرب من منطقة الإصابة بالملقط. قطع المصب من الخيط السفلي والمنبع من الخيط العلوي. ضع المنديل على طبق زراعة الأنسجة البلاستيكية في نفس الاتجاه الذي تم جمعه وأضف بضع قطرات من المثبت.

باستخدام مشرط ، قم بتنظيف الأنسجة الزائدة حول الشريان. تأكد من تسجيل اتجاه تدفق الدم عن طريق قطع أحد طرفيه أفقيا والآخر مستدق أو مائل. ضع العينة في مادة مثبتة لمدة ساعة واحدة في درجة حرارة الغرفة ، ثم قم بتخزين العينة في 1٪ بارافورمالدهيد عند 4 درجات مئوية حتى إرسالها إلى الثلج الرطب لتحليل المجهر الإلكتروني.

تم رسم البيانات على شكل منحنى بقاء كابلان-ماير ، وهو مخطط نقطي به أشرطة توضح تدفق الدم النهائي في وقت توقف تدفق الدم أو إنهاء التجربة ، أو كرسم بياني خطي. زاد تدفق الدم فجأة في بعض الحالات بعد انخفاض تدريجي لبضع دقائق مما يشير إلى تساقط جزئي للخثرة المتنامية واعتبر حدثا للانصمام. تمت دراسة مورفولوجيا الجلطة الإطباقية باستخدام هذه الطريقة أيضا.

يعد الجمع الفوري للعينة أثناء عملية تجلط الدم أهم خطوة لأن التأخير في هذه العملية قد يؤدي إلى سوء تفسير تحليلنا الهيكلي.