פקקת עורקים המושרה על ידי ברזל כלוריד ואיסוף דגימות לניתוח מיקרוסקופ אלקטרונים תלת ממדי

בשיטה זו ניתן לקבוע אילו מרכיבים של טסיות הדם והמערכת ההמוסטטית חשובים לפקקת. בנוסף, שיטה זו יכולה לקבוע כיצד צמיחת פקקת וארכיטקטורה מושפעים ברמה התאית. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שהיא מאפשרת דרך לשחזור ללמוד שלבים רבים של פקקת ברמה המבנית.

אדם חדש בטכניקה זו צריך להימנע מטיפול יתר ברקמה באזור הניתוח. זה יכול להוביל לדימום והוא יכול לסבך יתר על המידה את זיהוי עורק התרדמה. יש להתחיל לסמן את מקום הפגיעה לאחר חשיפת עורק התרדמה על ידי הקפת האזור באופן רופף בין שני חוטים כירורגיים בגודל 0.1 מילימטר.

הניחו את הבדיקה מתחת לעורק הדיסטלי מהחוט התחתון. הכנס את חתיכת הפלסטיק מתחת לעורק בין שני החוטים כדי לסמן את האתר לפגיעה בברזל כלורי. בצע מדידות זרימה לפני ביצוע פציעה כדי לציין את הזרימה הבסיסית.

בצע את הפציעה על ידי הנחת נייר סינון ספוג ברזל כלורי על העורק במשך שלוש דקות. הסר את נייר הסינון לאחר שלוש דקות כדי למנוע את ההיקף המשתנה של הפציעה ולהקל על ספירת הזרימה על ידי הבדיקה. יש להוסיף מי מלח במקום הפציעה כדי להסיר עודפי ברזל כלורי.

עקוב אחר קריאת הזרימה. כאשר הזרימה יורדת מתחת ל-50% מהערך ההתחלתי, הסר את הבדיקה. יבשו במהירות את האזור והוסיפו את הקיבוע כדי לתקן את אזור הפציעה חיצונית.

לאחר מכן, מיד להחזיק את העורק ליד אזור הפציעה עם מלקחיים. חותכים במורד הזרם של החוט התחתון ובמעלה הזרם של החוט העליון. שים את הרקמה על צלחת תרבית רקמת פלסטיק באותו כיוון כפי שהוא נאסף ולהוסיף כמה טיפות של קיבוע.

בעזרת אזמל, נקו את הרקמה הנוספת סביב העורק. הקפד לרשום את כיוון זרימת הדם על ידי חיתוך קצה אחד אופקי והשני מתחדד או אלכסוני. הניחו את הדגימה בקיבוע למשך שעה אחת בטמפרטורת החדר, ולאחר מכן אחסנו את הדגימה ב-1% פרפורמלדהיד בטמפרטורה של 4 מעלות צלזיוס עד לשליחתה בקרח רטוב לניתוח מיקרוסקופ אלקטרונים.

הנתונים שורטטו כעקומת הישרדות קפלן-מאייר, תרשים נקודתי עם עמודות המראות את זרימת הדם הסופית בזמן הפסקת זרימת הדם או סיום ניסוי, או כגרף קווי. זרימת הדם התגברה באופן פתאומי בחלק מהמקרים בעקבות ירידה הדרגתית למשך מספר דקות המעידה על נשירה חלקית של פקקת הגידול ונחשבה לאירוע אמבוליזציה. מורפולוגיה של פקקת חסימה נחקרה גם בשיטה זו.

איסוף מהיר של הדגימה במהלך תהליך פקקת הוא השלב החשוב ביותר שכן עיכוב בתהליך זה עלול להוביל לפרשנות שגויה של הניתוח המבני שלנו.