يعد تحسين جودة رئتي المتبرعين هو المفتاح لتحسين معدل نجاح زراعة الرئة. نأمل في إنشاء نموذج حيواني بسيط وقابل للتكرار لدراسة تأثير وفرة الرئة خارج الجسم الحي ، وتحسين جودة رئتي المتبرعين. لقد ثبت أن EVLP هو إجراء تقني فعال لتحسين جودة رئتي المتبرع ، ولكن لا تزال هناك العديد من المشكلات في EVLP التي تحتاج إلى دراسة وتوضيح.
لا تزال هناك حاجة إلى استكشاف ظروف التروية ، ويجب التحقق من قدرة EVLP على تخفيف إصابة نقص التروية وإعادة التروية. مقارنة بالتقنيات والنماذج الأخرى. منصة Rat EVLP الخاصة بنا هي الأكثر بساطة وقابلية للتشغيل والتكرار وغير مكلفة وأكثر فعالية من حيث التكلفة ، مما يوفر منصة بحث فعالة للأبحاث المتعلقة ب EVLP.
يجب الانتباه إلى التأثير العلاجي لتكنولوجيا وفرة الرئة خارج الجسم الحي على رئتي المتبرع الهامشية ، والتي تشبه DCD في الصين. في الوقت نفسه ، يمكن أن توفر هذه التكنولوجيا منصة للبحث المستقبلي. للبدء ، ضع الفئران المخدرة على طاولة العمليات وثبتها بالغرز.
باستخدام مقص جراحي للقوارض ، قم بعمل شق طولي من سنتيمترين إلى ثلاثة سنتيمترات على طول خط الوسط للرقبة أمام القصبة الهوائية. قم بقص الجلد وتشريح الأنسجة العضلية أمام القصبة الهوائية لكشف القصبة الهوائية بالكامل. ثم ، باستخدام حقنة ، قم بحقن 1000 وحدة لكل كيلوغرام من الهيبارين في وريد الذيل وانتظر لمدة خمس دقائق لضمان الهيبارين الكافي للدم.
حرر المساحة خلف القصبة الهوائية. مرر خياطة 3-0 عبر القصبة الهوائية واربط عقدة فضفاضة لاستخدامها لاحقا. قم بعمل شق على شكل حرف V بطول 0.5 سم فوق العقدة في القصبة الهوائية.
أدخل أنبوب القصبة الهوائية عيار 14 في القصبة الهوائية. شد عقدة الخياطة لتأمين الأنبوب. قم بتوصيل أنبوب القصبة الهوائية بجهاز التنفس الصناعي.
قم بتشغيل جهاز التنفس الصناعي لبدء تهوية الرئتين. راقب العلامات الحيوية للفئران كل خمس دقائق وأوقف التهوية. بعد تأكيد وفاة الفئران بعد السكتة القلبية باستخدام المعلمات التالية ، أعد تشغيل التهوية الميكانيكية في وضع التحكم بالضغط والتهوية لمدة خمس دقائق.
قم بتثبيت القصبة الهوائية وإراحة رئة المتبرع بها في درجة حرارة الغرفة لمدة ساعة واحدة من الوقت الإقفاري الدافئ. بعد ذلك ، لحصاد الرئة ، اضبط طاولة العمليات على رأس مرتفع 45 درجة وقدم منخفضة مائلة. باستخدام ماكينة حلاقة الشعر ، قم بإزالة الشعر من منتصف صدر الفئران والبطن.
تطهير المنطقة الجراحية باليود ثلاث مرات ولفها بمنشفة جراحية. قم بعمل شق طولي من ستة إلى سبعة سنتيمترات على طول خط الوسط للبطن باستخدام مقص جراحي للقوارض. قطع الجلد ، وفتح جدار البطن إلى تجويف البطن ، وفضح الأعضاء.
باستخدام حقنة ، قم بحقن 1،000 وحدة لكل كيلوغرام من الهيبارين في الوريد الأجوف السفلي وانتظر لمدة خمس دقائق لضمان الهيبارين الكافي للدم. بعد ذلك ، استخدم المقص لقطع الوريد الأجوف السفلي للفئران وبدء التهوية الميكانيكية للرئتين. بعد التهوية ، استخدم الملقط لرفع عملية الخنجري وعمل شق طولي على طول القص من الأسفل إلى الأعلى.
استخدم مفرشة الأضلاع لكشف تجويف الصدر ، ثم قم بإزالة أنسجة الغدة الصعترية لكشف القلب والأوعية الدموية الرئيسية تحته. حرر الشريان الأورطي للفأر والمساحة خلف الشريان الرئوي. مرر خياطة 3-0 عبر الشريان الرئوي واربط عقدة فضفاضة لاستخدامها لاحقا.
قم بعمل شق على شكل حرف V من ملليمترين إلى ثلاثة ملليمترات على السطح الأمامي لقناة تدفق البطين الأيمن. أدخل قنية الشريان الرئوي في الشريان الرئوي من خلال الشق وشد الخيط المسبق لتأمين القنية. اقطع طرف قلب الجرذ وأدخل ملقطا مرقئا في البطين الأيسر.
قم بتعطيل الصمامات بين البطين الأيسر والأذين لضمان خلو مسار تدفق الأذين الأيسر. بعد ذلك ، قم بتوصيل قنية الشريان الرئوي بدائرة التروية واستخدم 15 مل من محلول منخفض البوتاسيوم لطرد الدم المتبقي بمعدل تدفق يتراوح من 0.6 إلى مليلتر واحد في الدقيقة. ضع خياطة خلف القلب وأطوق البطين.
أدخل القنية من خلال شق البطين الأيسر وشد الخيط الجميل لتأمين القنية. الآن ، قم بقطع القصبة الهوائية فوق أنبوب القصبة الهوائية. ارفع القصبة الهوائية واستخدم المقص لفصل النسيج الضام خلف القصبة الهوائية لأسفل إلى الحجاب الحاجز.
ثم اقطع الوريد الأجوف السفلي والشريان الرئوي الرئيسي فوق الحجاب الحاجز. افصل القلب عن الرئتين. للحفاظ على الرئتين منتفختين ، قم على الفور بتثبيت الثلث السفلي من القصبة الهوائية في نهاية الاستنشاق.
اجمع القلب والرئتين وضعهما في محلول منخفض البوتاسيوم لحفظهما. ضع القلب والرئتين في الموضع المحدد لتروية الرئة خارج الجسم الحي، أو دائرة EVLP، وقم بتوصيل قنية البطين الأيسر بدائرة التروية. بعد تجميع إعداد EVLP ، املأ مصيدة الفقاعات بكمية كافية من محلول إصلاح تروية الرئة لمنع الفقاعات من دخول الرئتين.
ضع وحدة القلب والرئة في حجرة العضو وقم بتوصيلها بجهاز EVLP. ثم قم بتشغيل جهاز التنفس الصناعي والمضخة التمعجية. ابدأ تروية الرئة بنسبة 20٪ من معدل التدفق المستهدف.
بعد حساب معدل التدفق المستهدف ، قم بزيادة معدل التدفق تدريجيا إلى معدل التدفق المستهدف في غضون ساعة واحدة. اضبط المبادل الحراري على 40 درجة مئوية للحفاظ على درجة حرارة الرئة 37.5 درجة مئوية. بعد 20 دقيقة من التروية ، قم بإزالة المشبك الرغامي ، وباستخدام المعلمات التالية ، ابدأ التهوية الميكانيكية.
ثم ابدأ تدفق الغاز الناجم عن نقص الأكسجة. للحفاظ على محلول التروية ، الضغط الجزئي لثاني أكسيد الكربون الذي يدخل الشريان الرئوي بين 35 و 45 ملم في وقت واحد أثناء التهوية. أثناء التروية ، راقب باستمرار معدل تدفق محلول التروية ، والضغط الشرياني الوريدي ، وضغط ذروة مجرى الهواء ، ومعلمات وظائف الرئة.
ظلت مستويات أكسجة الطعم الرئوي ومقاومة الأوعية الدموية في رئتي المتبرعين DCD مستقرة ، مع عدم وجود فروق ذات دلالة إحصائية خلال فترة التروية التي استمرت أربع ساعات. انخفض الامتثال الديناميكي لرئتي المتبرعين DCD تدريجيا خلال فترة التروية التي استمرت أربع ساعات. انخفضت مستويات الجلوكوز في نفحف رئتي المتبرعين DCD بشكل مطرد طوال فترة التروية التي استمرت أربع ساعات.
ظلت مستويات الإلكتروليت ، بما في ذلك الصوديوم والبوتاسيوم ، ثابتة عبر المجموعات خلال التروية التي استمرت أربع ساعات. تم اكتشاف عدد أعلى بكثير من الخلايا المبرمجة في المجموعة المانحة DCD مقارنة بالمجموعات الأخرى ، حيث أظهرت مجموعة الحفاظ على البرد خلايا إيجابية أكثر من مجموعة EVLP. كانت درجة إصابة الرئة أقل بشكل ملحوظ في مجموعة EVLP مقارنة بمجموعات الحفظ والتحكم الساكنة الباردة.
كان سماكة الجدار السنخي والنزيف السنخي بارزا في مجموعة الحفاظ على الكهرباء الساكنة الباردة لمدة أربع ساعات ، بينما تم الحفاظ على البنية السنخية الطبيعية في مجموعة EVLP.
