기증자 폐의 질을 개선하는 것이 폐 이식의 성공률을 높이는 열쇠입니다. 우리는 생체 외 폐 풍부의 효과를 연구하기 위해 간단하고 재현 가능한 동물 모델을 확립하여 기증자 폐의 질을 개선하기를 희망합니다. EVLP는 기증자 폐의 질을 개선하기 위한 효과적인 기술 측정으로 입증되었지만, EVLP에는 여전히 연구되고 명확화되어야 할 많은 문제가 있습니다.
관류 조건은 여전히 연구가 필요하며, 허혈-재관류 손상을 감쇠시키는 EVLP의 능력은 추가로 검증되어야 합니다. 다른 기술 및 모델과 비교. 당사의 RAT EVLP 플랫폼은 가장 간단하고, 작동 가능하고, 재현 가능하고, 저렴하고, 훨씬 비용 효율적이며, EVLP 관련 연구를 위한 효율적인 연구 플랫폼을 제공합니다.
중국의 DCD와 유사한 한계 기증자 폐에 대한 체외 폐 증식 기술의 치료 효과에 주목해야 합니다. 동시에 이 기술은 향후 연구를 위한 플랫폼을 제공할 수 있습니다. 먼저 마취된 쥐를 누운 자세로 수술대에 올려놓고 봉합사로 고정합니다.
설치류 수술용 가위를 사용하여 기관 앞 목 정중선을 따라 2-3cm 길이로 절개합니다. 피부를 절개하고 기관 앞의 근육 조직을 절개하여 기관을 완전히 노출시킵니다. 그런 다음, 주사기를 사용하여 꼬리 정맥에 헤파린 킬로그램 당 1, 000 단위를 주입하고 혈액의 적절한 헤파린화를 보장하기 위해 5분 동안 기다립니다.
기관 뒤의 공간을 확보합니다. 기관을 통해 3-0 봉합사를 통과시키고 나중에 사용할 수 있도록 느슨한 매듭을 묶습니다. 기관의 매듭 위로 0.5cm 높이의 V자 절개를 만듭니다.
14게이지 기관 튜브를 기관에 삽입합니다. 봉합사 매듭을 조여 튜브를 고정합니다. 기관 튜브를 인공호흡기에 연결합니다.
인공호흡기를 켜서 폐 환기를 시작하십시오. 5 분마다 쥐의 활력 징후를 모니터링하고 환기를 중지하십시오. 다음 매개변수를 사용하여 심정지 후 쥐의 사망을 확인한 후 압력 제어 모드에서 기계 환기를 다시 시작하고 5분 동안 환기를 합니다.
기관을 고정하고 기증자의 폐를 실온에서 1시간 동안 따뜻한 허혈 시간 동안 휴지시킵니다. 다음으로, 폐를 적출하기 위해 수술대를 머리 높이 45도, 발 낮게 기울어진 위치로 조정합니다. 면도기를 사용하여 쥐의 가슴과 복부 중앙의 털을 제거합니다.
수술 부위에 요오드를 3회 소독하고 수술용 수건으로 덮습니다. 설치류 수술 용 가위로 복부의 정중선을 따라 6-7cm 길이의 절개를 만듭니다. 피부를 절개하고 복벽을 복강까지 열고 장기를 노출시킵니다.
주사기를 사용하여 하대정맥에 헤파린 킬로그램당 1, 000단위를 주입하고 혈액의 적절한 헤파린화를 보장하기 위해 5분 동안 기다립니다. 그런 다음 가위를 사용하여 쥐의 하대정맥을 자르고 폐의 기계적 환기를 시작합니다. 인공호흡 후 집게를 사용하여 xiphoid 과정을 들어 올리고 흉골을 따라 아래에서 위로 세로로 절개합니다.
갈비뼈 스프레더를 사용하여 흉강을 노출시킨 다음 흉선 조직을 제거하여 심장과 그 아래의 주요 혈관을 노출시킵니다. 쥐의 대동맥과 폐동맥 뒤의 공간을 비운다. 폐동맥을 통해 3-0 봉합사를 통과시키고 나중에 사용할 수 있도록 느슨한 매듭을 묶습니다.
우심실 유출로의 앞쪽 표면에 2-3mm V자 모양의 절개를 만듭니다. 절개 부위를 통해 폐동맥에 캐뉼라를 삽입하고 미리 묶인 봉합사를 조여 캐뉼라를 고정합니다. 쥐 심장 끝을 자르고 지혈 겸자를 좌심실에 삽입합니다.
좌심실과 심방 사이의 판막을 파괴하여 좌심방 유출로가 깨끗한지 확인합니다. 다음으로, 폐동맥 캐뉼러를 관류 회로에 연결하고 15ml의 저칼륨 용액을 사용하여 분당 0.6-1ml의 유속으로 잔류 혈액을 세척합니다. 심장 뒤에 봉합사를 놓고 심실을 둘러쌉니다.
좌심실의 절개 부위를 통해 캐뉼라를 삽입하고 예쁜 봉합사를 조여 캐뉼라를 고정합니다. 이제 기관 튜브 위의 기관을 잘라냅니다. 기관을 들어 올리고 가위를 사용하여 기관 뒤의 결합 조직을 횡격막까지 아래쪽으로 분리합니다.
그런 다음 하대정맥과 횡격막 위의 주요 폐동맥을 절단합니다. 심장과 폐를 분리하십시오. 폐를 팽창시킨 상태로 유지하려면 흡입이 끝날 때 즉시 기관의 아래쪽 1/3을 조입니다.
심장과 폐를 모아 보존을 위해 저칼륨 용액에 넣으십시오. 심장과 폐를 생체 외 폐 관류 또는 EVLP 회로의 지정된 위치에 놓고 좌심실 캐뉼라를 관류 회로에 연결합니다. EVLP 설정을 조립한 후 기포가 폐로 유입되는 것을 방지하기 위해 충분한 양의 폐 관류 복구 용액으로 버블 트랩을 채웁니다.
심폐 유닛을 장기실에 놓고 EVLP 장치에 연결합니다. 그런 다음 인공호흡기와 연동 펌프를 켭니다. 목표 유속의 20%에서 폐 관류를 시작합니다.
목표 유량을 계산한 후 1시간 이내에 목표 유량까지 유량을 점차적으로 높입니다. 폐 온도를 섭씨 40도로 유지하려면 열교환기를 섭씨 37.5도로 설정하십시오. 20분 동안 관류한 후 기관내 클램프를 제거하고 다음 매개변수를 사용하여 기계적 환기를 시작합니다.
그런 다음 저산소 가스의 흐름을 시작하십시오. 관류 용액을 유지하기 위해 환기 중에 동시에 35mm에서 45mm 사이에 폐동맥으로 들어가는 이산화탄소의 분압. 관류 중에는 관류 용액 유속, 동정맥압, 기도 최고 압력 및 폐 기능 매개변수를 지속적으로 모니터링합니다.
DCD 기증자 폐의 폐 이식 산소 농도와 혈관 저항은 안정적으로 유지되었으며, 4시간의 관류 기간 동안 유의미한 차이는 없었다. DCD 기증자 폐의 동적 순응도는 4시간의 관류 기간 동안 점차 감소했습니다. DCD 기증자 폐의 관류액 내 포도당 수치는 4시간 관류 내내 꾸준히 감소했습니다.
나트륨과 칼륨을 포함한 전해질 수치는 4시간 관류 동안 그룹 간에 일관되게 유지되었습니다. DCD 기증자 그룹에서 다른 그룹에 비해 훨씬 더 많은 수의 세포사멸 세포가 검출되었으며, 저온 보존 그룹이 EVLP 그룹보다 더 많은 양성 세포를 보였습니다. 폐 손상 점수는 EVLP 그룹에서 냉간 정전기 보존 및 대조 그룹에 비해 유의하게 낮았습니다.
폐포 벽이 두꺼워지고 폐포 출혈이 4시간 저온 정전기 보존 그룹에서 두드러진 반면, 정상적인 폐포 구조는 EVLP 그룹에서 두드러졌습니다.
