Luciferase Assay for the Detection of Autophagy Protease ATG4B

首先打开程序，通过单击分配器控件初始化喷油器泵，然后选择泵 2，然后单击 Init。要用离子水冲洗管道，请单击“冲洗”，然后按“下一步”。选择泵 2 并将吸头安装座设置到所需的吸头。

然后再次单击“下一步”。单击“开始”开始冲洗管子。用甲醇重复冲洗。

同时，通过将底物原液稀释 1 至 100 来制备工作底物溶液。最后，用PBS中底物原液的工作稀释液冲洗管道。将板装入酶标仪。

然后，在测量设置中，选择孔径为 384 板 US 发光孔径，然后选择板和检测器之间的距离为 0.6 毫米，测量时间为 0.5 秒。确定测量设置后，在“协议-常规设置”选项卡上，选择板类型为“384 Nunc”，然后选择“按列双向”选项作为测量模式。在“检测重复次数”选项卡中输入 1。

现在，在“点胶”选项卡上，选择所需的点胶测量值。然后将每个孔的测量时间设置为一秒，并选择所需的二手泵。点胶速度为每秒 200 微升。

并且分配体积为 50 微升。选择分配体积作为泵 2 的注射器填充体积。然后将开始点胶测量编号设置为 1。

在孔选择选项卡上，使用添加/删除样品下拉菜单并选择所需的样品类型，然后选择要测量的孔。之后，单击“运行”开始测量。DMSO的基础发光信号见第1列，ATG4B抑制剂FMK-9a存在时发光信号的减少见第24列。