Detección de fármacos basados en células para inhibidores de la 4B cisteína peptidasa relacionada con la autofagia

El objetivo principal de la investigación en mi laboratorio es comprender la regulación de la autofagia y, en particular, del proteico cisteína ATG4 y utilizar este conocimiento para desarrollar inhibidores de moléculas pequeñas que se dirijan a esta vía, en particular para enfermedades como el cáncer de páncreas. Utilizamos tecnologías de cribado de alto contenido y alto rendimiento para identificar dianas farmacológicas, así como candidatos a fármacos, y nos centramos en la familia de la cisteína proteasa ATG4 porque creemos que es una muy buena diana farmacológica para diversas formas de cáncer. Hemos estado estudiando a los miembros de la familia ATG4 durante bastante tiempo.

Hicimos descubrimientos significativos sobre la disfunción de esta familia de proteínas y células. También hemos identificado nuevos mecanismos postraduccionales de regulación de los miembros de la familia ATG4 y actualmente estamos desarrollando inhibidores de moléculas pequeñas y también activadores de la familia ATG4 para enfermedades como el cáncer y la neurodegeneración. No hay muchos ensayos para monitorizar la actividad de la proteasa ATG4 en las células.

Así que fuimos uno de los primeros en desarrollar un ensayo basado en luciferasa para monitorizar esta actividad. Y nuestro ensayo es bastante inusual porque utiliza frases secretadas, digamos, por lo que no necesitamos licenciar las células y podemos adaptar este protocolo fácilmente a los métodos de detección de alto rendimiento y a la automatización del laboratorio. Nos hemos centrado en la proteasa de la proteína B ATG4 desde hace bastante tiempo.

Hemos generado líneas celulares knockout de los miembros de la familia ATG4. Hemos identificado nuevos mecanismos de regulación postraduccional de ATG4 y, en última instancia, también hemos identificado varios compuestos novedosos de moléculas pequeñas que podrían inhibir e incluso activar la proteasa ATG4 B. En el futuro, nos gustaría continuar trabajando con los miembros de la familia ATG4.

Creemos que es mucho lo que se desconoce actualmente y que aún queda por descubrir. Por ejemplo, actualmente no se comprende por completo cómo estas proteínas regulan la autofagia en las neuronas. También nos gustaría centrar nuestro trabajo en la validación de estos compuestos de moléculas pequeñas que hemos identificado y, potencialmente, utilizar activadores en enfermedades neurodegenerativas.