这项工作是由一个转化医学和治疗学研究所的奖学金，并从医学和工程（T32HL007954）研究所的培训补助金，在美国宾夕法尼亚大学和马琳L.科恩和Jerome H. Fleisch学者格兰特在康涅狄格大学卫生中心（LHS）和国立卫生研究院NS - 029331（一汽）。

1。制备设备<ol><li>擦拭的立体框架，用75％乙醇和泵，以尽量减少细菌污染。 </li><li>消毒汉密尔顿注射器和熔融石英针。 注意：如果使用化学灭菌，使用前一定要在无菌水冲洗数次。 </li><li>石蜡纸的表面，并用75％乙醇擦拭，晾干。 </li></ol> 2。制备注射鼠标注意：有交付给你的动物设施在手术前至少7天，让他们适应环境，以新的环境和减轻压力的小鼠。 <ol><li>权衡手术前的基线象征。 </li><li>与氧气30％，70％的一氧化二氮和4％，直到响应尾巴捏异氟醚诱导麻醉</li><li>注射丁丙诺啡为0.1mg/kg腹腔手术后镇痛的鼠标</li><li>剃的头皮</li><li>用无菌凡士林大衣的眼睛</li><li>准备与x 3优碘擦拭头皮，然后让头皮干燥</li><li>设为1厘米中线矢状切开头皮，使用无菌手术手术刀 注：一位慷慨的切口，将允许头骨的标志性建筑的完整曝光。 </li><li>剃须开始从底部1厘米的尾巴腹面1厘米，并准备与优碘× 3湿巾</li><li>将鼠标放置在立体框架 注：重要的是要确保鼠标的安全与颅骨表面平行框架的基础框架与优秀暴露前囟和至少3毫米的前囟权。 </li></ol> 3。脑出血手术注：鼠标在整个手术麻醉，30％的氧气，70％的一氧化二氮，和1-3％异氟醚，连续保持在37 ± 0.5 ° C程序中使用的热敏电阻控制的电热垫和直肠体温计的监测。 <ol><li>装上1帧40cc的注射器无菌27克针。 </li><li>调整立体的手臂，直到针，完全超过前囟。 </li><li>调整臂，使针头在2.5毫米，外侧，前囟门和颅骨表面是。 </li><li>手动旋转注射器同时应用帧照顾温柔向下运动并不能完全穿孔头骨，颅骨表面的毛刺孔。 </li><li>手动删除针和完整的毛刺孔用注射器/针 注：通过手工完成的毛刺孔立即承认允许当你有穿孔的头骨和风险降至最低无意中推入脑实质针内表。 </li><li>腹尾部使用无菌手术刀片表面上横切口，并允许动脉血2-3大滴掉落到石蜡纸。然后迅速停止出血，用无菌纱布压力。 </li><li>撤柜17μL到汉密尔顿在泵的注射器和注射器的地方血液。 </li><li>调整立体ARM点5 °，内侧相对垂直轴。 </li><li>仔细调整立体臂，使针尖在毛刺孔头骨，然后低针3.5毫米。 </li><li>等待2分钟，然后退出针0.5毫米（这样的提示是3毫米深） </li><li>等待5分钟，让大脑重新展开周围的针和减少血液回流在注射针插入轨道的风险。 </li><li>注入7.5μL的血1微升/分钟。 </li><li>等待5分钟，让最初的血液凝固和组织的变化发生，以减低颅内压力升高。 </li><li>余下的7.5μL注入1μL/分钟</li><li>允许针保持25分钟到位，让血液凝固 注：不退出针时，等待会导致血液凝固的血液回流针插入部位</li><li>慢慢地退出针，并立即用热水冲洗，以防止凝血任何残血针，确保针重用。 </li><li>从框架中取出鼠标和密切与兽医外科胶尾巴和头皮切口。 </li><li>关闭麻醉。 </li><li>允许鼠标唤醒免费访问蘸食品不断升温而。 </li><li>返回鼠标笼窝时完全清醒。放在笼底湿的食物颗粒，以帮助动物获取食物。 </li></ol> 4。代表性的成果： <img src="/files/ftp_upload/2618/2618fig1.jpg" alt="图1"/> 图1脑出血手术15分钟后鼠脑冠状切面。大脑的非物质文化遗产成功的基础上针插入部位在冠状断面总检查检查后立即牺牲。出血，追查了过去的胼胝体，或入脑室针跟踪大脑底部，被视为不成功，老鼠是从消除所有分析。总体ICH的帅客SS率分别为75％-85％0％的死亡率在50只。 <img src="/files/ftp_upload/2618/2618fig2.jpg" alt="图2"/> 图2。缸测试演示后，右侧基底节脑出血左侧偏瘫。 （一）样本脑出血手术后的鼠标后部。注意筒壁只有右前肢的位置后，左基底节脑出血。 （二）缸测试图1结果从队列后的小鼠脑出血手术治疗（N = 5）相比，假手术组（n = 4）。深水小鼠血液的注入（针插入到大脑）之外的所有程序。每个鼠标被放置在一个直径12厘米的透明玻璃圆筒，并观察20后轮。每后方取得筒壁的前肢的初始位置。随后的动作（如横向探索）没有进球，直到鼠标返回到地面和未来后方得分。偏侧指数计算公式为（＃右前肢拆放圆柱体的侧面 - ＃左前肢配售）/（＃右+左+＃两者），其中0表示没有前肢的偏好和1表示只有右前肢。

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	<li>Hua, Y., Schallert, T., Keep, R. F., Wu, J., Hoff, J. T., Xi, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+Tests+After+Intracerebral+Hemorrhage+in+the+Rat.">Behavioral Tests After Intracerebral Hemorrhage in the Rat.</a> Stroke. 33, 2478-2484 (2002).</li><li>James, M., Warner, D., Laskowitz, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preclinical+Models+of+Intracerebral+Hemorrhage:+A+Translational+Perspective.">Preclinical Models of Intracerebral Hemorrhage: A Translational Perspective.</a> Neurocritical Care. 9, 139-152 (2008).</li><li>Foerch, C., Arai, K., Jin, G., Park, K. -. P., Pallast, S., van Leyen, K., Lo, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+Model+of+Warfarin-Associated+Intracerebral+Hemorrhage.">Experimental Model of Warfarin-Associated Intracerebral Hemorrhage.</a> Stroke. 39, 3397-3404 (2008).</li><li>Nakamura, T., Xi, G., Hua, Y., Schallert, T., Hoff, J. T., Keep, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intracerebral+hemorrhage+in+mice:+model+characterization+and+application+for+genetically+modified+mice.">Intracerebral hemorrhage in mice: model characterization and application for genetically modified mice.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 24, 487-494 (2004).</li><li>Rynkowski, M. A., Kim, G. H., Komotar, R. J., Otten, M. L., Ducruet, A. F., Zacharia, B. E., Kellner, C. P., Hahn, D. K., Merkow, M. B., Garrett, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+mouse+model+of+intracerebral+hemorrhage+using+autologous+blood+infusion.">A mouse model of intracerebral hemorrhage using autologous blood infusion.</a> Nat. Protocols. 3, 122-128 (2008).</li><li>Wang, J., Fields, J., Dor&#233;, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+development+of+an+improved+preclinical+mouse+model+of+intracerebral+hemorrhage+using+double+infusion+of+autologous+whole+blood.">The development of an improved preclinical mouse model of intracerebral hemorrhage using double infusion of autologous whole blood.</a> Brain Research. 1222, 214-221 (2008).</li><li>Zhao, X., Sun, G., Zhang, J., Strong, R., Song, W., Gonzales, N., Grotta, J. C., Aronowski, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hematoma+resolution+as+a+target+for+intracerebral+hemorrhage+treatment:+Role+for+peroxisome+proliferator-activated+receptor+&#947;+in+microglia/macrophages.">Hematoma resolution as a target for intracerebral hemorrhage treatment: Role for peroxisome proliferator-activated receptor &#947; in microglia/macrophages.</a> Annals of Neurology. 61, 352-362 (2007).</li></ol>

没有利益冲突的声明。

这在小鼠的自发性基底节出血重现模型中使用自体尾动脉的血液结果脑出血的手术模型。在小鼠的脑出血模型提供的转基因动物研究病理生理学的可用性的优势，但其体积小，使神经外科手术技术上更比在较大的动物困难。 胶原酶模型和自体血液的注入模型实验性脑出血的两个行之有效的模型。虽然胶原酶模型提供了一个简单的过程和高度重现性出血 2，使用细菌蛋?...

鼠标神经外科立体定向框架（51925 Stoelting，） Microinfusion泵和处理器（UMP - 3和Micro4，世界精密仪器，萨拉索塔，佛罗里达州） 鼠标温暖（50300 Stoelting，） 鼠标吸入性麻醉（布伦特里科学，EZ - AF9000） 25μL，气密性高硼硅汉密尔顿涂层柱塞注射器和无针 （汉密尔顿公司，里诺，内华达州，1702RN注射器：765401，套圈：30949，垫片：30946） 熔融石英针切成2厘米长（汉密尔顿，17739） *注汉密尔顿注射器和熔融石英针可以重复使用多次手术，如果每次手术前消毒。这些材料是至关重要的，以避免血液凝固。 无菌手术手套手术衣，帽子和口罩优碘 75％的乙醇克针（一次性使用无菌27日） 无菌1毫升注射器（一次性使用） 无菌手术刀片 CIDEX 无菌水丁丙诺啡和异氟醚无菌纱布石蜡纸广场兽医外科胶（Vetbond，3M，明尼苏达州圣保罗）

autologous blood injection to model spontaneous intracerebral hemorrhage in mice

Investigation of the pathophysiology of injury after intracerebral
hemorrhage (ICH) requires a reproducible animal model. While ICH
accounts for 10-15% of all strokes, there remains no specific
effective therapy. The autologous blood injection model in mice
involves the stereotaxic injection of arterial blood into the basal
ganglia mimicking a spontaneous hypertensive hemorrhage in man. The
response to hemorrhage can then be studied in vivo and the
neurobehavioral deficits quantified, allowing for description of the
ensuing pathology and the testing of potential therapeutic agents. The
procedure described in this protocol uses the double injection
technique to minimize risk of blood reflux up the needle track, no
anticoagulants in the pumping system, and eliminates all dead space
and expandable tubing in the system.

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Autologous Blood Injection to Model Spontaneous Intracerebral Hemorrhage in Mice

自体血注射在本议定书中所描述的小鼠脑出血模型，采用双色注塑技术，以最大限度地减少了针轨道，在泵送系统中没有抗凝血剂的血液回流的风险，并消除了所有死在空间和系统扩展的油管。

自体血液的注入模型小鼠自发性脑出血

Investigation of the pathophysiology of injury after intracerebral
hemorrhage (ICH) requires a reproducible animal model.  While ICH
accounts for 10-15% ...

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Neuroscience

14.6K 次观看.  University of Connecticut Health Center. 自体血注射在本议定书中所描述的小鼠脑出血模型，采用双色注塑技术，以最大限度地减少了针轨道，在泵送系统中没有抗凝血剂的血液回流的风险，并消除了所有死在空间和系统扩展的油管。