该方法可以回答高血压和心血管疾病领域关键问题，包括CD11c阳性树突状细胞的研究，以及它们如何有效发挥高血压损伤的作用。该技术的主要优点是将CD11c阳性树突状细胞与固体器官分离，并研究它们在各种疾病状态中的生理作用。因此，这个过程可以应用于多种免疫细胞类型，包括B淋巴细胞，T淋巴细胞，单细胞和巨噬细胞。
该技术的可视化对于了解树突细胞分离至关重要，特别是采用转移过程到接受小鼠。首先，用70%乙醇喷洒安乐死小鼠的胸部和侧面。在左侧，小心地打开皮肤和腹膜腔，露出脾脏。
使用小钳子，小心地将肠子和肝脏移到小鼠的左侧。然后用小剪刀轻轻切除脾脏。将每个切除的脾脏放入一个标有 C 管的 C 管中，其中含有三毫升的 RPMI 1640 介质。
首先将胶原酶D和DNase加入准备的RPMI 1640介质中，以准备脾脏消化液。将 C 管放在半自动均质器上，并确保将管子紧紧放在旋转臂上。按均质器上的启动按钮运行脾脏 04.01 协议 60 秒。
在此之后，将管从均质器中分离出来，在 20 rpm 的连续温度下在 37 摄氏度下孵育样品 15 分钟。接下来，使用移液器将溶液通过 40 微米滤网过滤后转移到 50 毫升锥形管中。用 10 毫升 dPBS 清洗过滤器。
在300倍g和4摄氏度下将细胞离心10分钟。然后完全吸气上一个液分，在 10 毫升 dPBS 中重新悬浮颗粒，然后清洗颗粒。在300倍g和4摄氏度下将悬浮液离心10分钟。
将细胞颗粒重新悬浮在五毫升的 dPBS 中。使用血细胞计和 Trypan 蓝色排除数来计算细胞数。下一个离心机在300倍g和4摄氏度10分钟，以颗粒细胞。
完全吸制上流液，并在400毫升磁激活细胞分选缓冲液中重新悬浮颗粒。然后每1亿个细胞加入100毫升CD11c微珠。在4摄氏度的冰箱中旋转细胞悬浮液并孵育10分钟。
在此之后，加入10毫升的MC缓冲液，以300倍g和4摄氏度的温度下清洗细胞和离心机10分钟。完全吸升液，并在500毫升的MC缓冲液中重新悬浮细胞。将 LS 柱放在磁石分离器的磁场中，并在每根柱下放置一个 15 毫升的圆锥形管以收集流经。
接下来，用三毫升的缓冲液冲洗柱子。将单元格悬浮到每一列上，并收集包含未标记单元格的流。用三毫升的MC缓冲液清洗柱子，并收集通过未标记的细胞。
每次洗涤使用三毫升的 MC 缓冲液再清洗 LS 柱两次。在此之后，从磁性分离器中删除 LS 列。向每列添加五毫升的 MC 缓冲液，并立即将每根柱插入一个 15 毫升的透明圆锥管中，以冲出磁性标记的电池。
使用血细胞计和 Trypan 蓝色排除确定文本协议中概述的 CD11c 正 DC 编号。然后在0.4%Trypan蓝色溶液中一对一稀释细胞样品。首先，在直流培养培养培养中准备细胞颗粒，如文本协议中所述。
移液 900 微升直流悬浮成 24 孔平底猎鹰板。在每个井中加入100微升高盐DC培养培养剂，最终钠浓度为190毫摩尔。给盘子贴上标签，在37摄氏度的加湿二氧化碳培养箱中放置48小时。
48 小时后，将板从培养箱中取出。将细胞培养培养培养器在一个井中上下移位，以重新挂起 CD11c 阳性DC。
对镀井的每个井重复此项。将所有管以300倍g和4摄氏度离心10分钟。用 100 微升无菌 dPBS 吸升上一杯并重新悬浮直流颗粒。
接下来，将直流溶液从其中一根管子中抽入一毫升注射器，并配有 27 量表半英寸针。将天真的男性10周大的C57-黑色-6小鼠放在2%异氟以下，实现稳定的手术平面。检查麻醉水平，缺乏踏板反射。
一旦一个稳定的手术平面实现，慢慢地，小心地将针头引入反轨道空间，角度约为30度。缓慢而顺利地注入 CD11c 正直流悬架。注射完成后，小心地取出针对复古轨道空间，确保不损害眼睛。
然后将小鼠从鼻锥中取出，并在麻醉恢复过程中监测小鼠约30分钟。一个典型的血压分析显示在这里后，采用转移DC和渗透迷你泵已被植入低剂量血管紧张素II输液。应该注意的是，这种低剂量的血管紧张素II是一种抑制剂剂量，不会增加正常小鼠的血压。
接受正常盐处理CD11c阳性DC的小鼠在输液过程中维持正常血压，而接受高盐处理CD11c阳性DC的小鼠则表现出收缩压的增加。然后利用此处显示的浇注策略进行流式细胞学分析，以确定分离的 CD11c 阳性细胞的纯度。与总的飞溅细胞相比，CD11c阳性细胞的富集增加。
不同的 CD11c 微珠浓度用于对制造商的协议进行故障排除。使用100微升微升微珠的飞毛细胞的磁性分离产生约65%的CD11c阳性细胞，而使用200微升产生55%，使用300微升产生50%的FcR阻滞剂和100微升的微升。磁分离后，FcR的封锁产生约65%CD11c阳性细胞。
然后，一些飞毛细胞被孵育成100微升微升微珠，并通过LS柱进行磁分离。分离的细胞用CD11c的另外100微升孵育，并通过LS柱再次分离。这种双重隔离过程产生了92%CD11c阳性细胞。
在尝试此过程时，通过流式细胞测量确认分离细胞的纯度非常重要。在树突状细胞进行磁隔离后，可以通过蛋白质组学和单细胞测序等分子技术培养它们以确定其活化状态。自其发展以来，现在可以研究树突状细胞在高血压中的作用和具体作用。
研究人员正在探索高血压中特定的抗原。
