小鼠重复的奥内切管插管

该协议将允许研究人员对单个小鼠的肺功能进行重复测量，减少实验变异性，减少每个实验所需的小鼠数量。该协议的主要优点是，它不需要通过口腔或颈部的创伤性解剖可视化插管。这种方法对于研究慢性和渐进性肺病（如哮喘、慢性阻塞性肺病、肺气肿和肺纤维化）的研究人员具有特别的价值。

该协议的视觉演示至关重要，因为了解如何通过腹颈皮肤识别气管是方法的核心。与安德鲁·纳尔逊一起展示这项技术的将是凯特·诺兰，一位来自我实验室的兽医。要创建插管平台，请将长度 15 到 20 厘米的 3-0 丝折成两半，并将螺纹的末端绑在三英寸三环粘结器的顶部。

选择适当尺寸和长度的导管，并在导管的端角切一个斜角。用研磨纸平滑切割表面，形成圆角，并在离斜面约一厘米的弯管中轻轻弯曲。当材料准备就绪时，确认麻醉鼠标对手趾捏没有反应，并在平台倾斜表面顶部的丝丝螺纹周围钩上切口，将鼠标悬挂在上部位置。

一旦鼠标被方形地定位在背的直卧中，轻轻抓住尾巴的底座，然后向桌子缩回尾巴。将一块胶带放在尾巴底部，以固定鼠标，并在腹颈区域涂抹脱毛霜。30 至 45 秒后，使用干纱布去除奶油，并用盐水或蒸馏水彻底冲洗皮肤。

在非显性手中使用钳子，轻轻缩回舌头，以充分张开嘴引入管。用占统治地位的手，推进管伸入嘴里，使是一个显着的端到轻微的弯曲是反对动物的嘴的屋顶。松开舌头，沿着心颈滑动闭合钳的平边，直到达到毛骨膜，横向置换唾液腺，并压平覆盖气管的肌肉。

气管将以白线作为皮经出现。如有必要，以颅骨方向旋转钳子，同时保持皮肤上的张力，使横向置换的唾液腺达到峰值，并在气管周围产生更多的对比度。用手腕的同步弯曲来提升占统治地位的手，推进管，同时使管的侧尖心尖。

如果管管已正确放置，将在气管内观察。要确认正确放置，请将肺膨胀球与管状图连接，并观察与装置并发凹陷的胸腔扩张。在不更换管管的情况下，小心地将鼠标的切口从插管平台上拔下，将鼠标转移到水平平台上，然后将插拔器连接到呼吸机上的适配器上，并在深度膨胀后，在测量呼吸阻力之前将鼠标通风 60 秒。

一旦手术完成，将鼠标转移到加热平台，通过光头或尾捏提供持续刺激，以鼓励自发呼吸。一旦观察到自发呼吸，继续目视监测动物。当呼吸速率恢复正常时，抓住轮毂水平的导管，轻轻将管颅和远离小鼠，直到从动物的嘴里完全去除导管。

一旦被挤出，将鼠标转移到一个干净的恢复笼与热支持与监测，直到完全流动。在这个具有代表性的实验中，在第0天、第3天、第10天和17日测量了呼吸阻力，使用强制振荡技术，在深度膨胀到25厘米的水后，保持5秒和60秒的机械通风。每个菌株中的任何时间点之间没有观察到测量的呼吸阻力有显著差异，这表明呼吸道系统连续四个时间点缺乏功能性显著的插管性创伤相关炎症。

这种插管程序可用于提供气管的安装实验物质和呼吸功能的序列监测。该技术允许评估肺功能，无需侵入性气管切除术，便于在同一小鼠内慢性和渐进性疾病的多个时间点的监测。