Bu protokol, araştırmacıların tek tek farelerde akciğer fonksiyonunun tekrar ölçümlerini yapmalarına, deneysel değişkenliği azaltmalarına ve her deney için gereken fare sayısını azaltmalarına olanak sağlayacaktır. Bu protokolün en büyük avantajı entübasyon için ağız boşluğu veya travmatik diseksiyon yoluyla trakea görselleştirme gerektirmez olmasıdır. Bu yöntem astım, KOAH, amfizem ve pulmoner fibrozis gibi kronik ve ilerleyici akciğer hastalıklarını inceleyen araştırmacılar için özel bir değer olacaktır.
Bu protokolün görsel gösterimi önemlidir, çünkü ventral boyun derisinden trakeanın nasıl belirlenebildiğini anlamak yöntemin merkezindedir. Andrew Nelson ile tekniği gösteren Kate Nolan, benim laboratuvar bir veteriner olacak. Entübasyon platformu oluşturmak için, 3-0 ipekten 15 ila 20 santimetre uzunluğunu ikiye katlayın ve ipliğin uçlarını üç inçlik üç halkalı bağlayıcının üstüne bantlayın.
Uygun boyut ve uzunlukta bir kanül seçin ve kateter distal ucunda bir yapkesin kesti. Yuvarlak bir uç oluşturmak için aşındırıcı kağıt ile kesme yüzeyini pürüzsüz leştirin ve eğimli yaklaşık bir santimetre kanülde hafifçe bükün. Malzemeler hazır olduğunda, anestezili bir faredeki parmak kıskacına yanıt eksikliğini onaylayın ve üst kesici dişleri platformun açılı yüzeyinin üst kısmındaki ipek ipliğin etrafındaki üst kesici dişleri bağlayın ve fareyi supine pozisyonunda askıya alın.
Fare dorsal recumbency kare konumlandırılmış sonra, yavaşça kuyruk tabanını kavramak ve masaya doğru kuyruk geri çekmek. Fareyi sabitlemek için kuyruğun tabanına bir parça bant yerleştirin ve ventral-servikal bölgeye tüy dökücü krem uygulayın. 30 ila 45 saniye sonra, kremi çıkarmak için kuru gazlı bez kullanın ve cildi tuzlu veya distile suyla iyice durulayın.
Baskın olmayan elde forseps kullanarak, yavaşça yeterince kanül giriş için ağız açılır bir şekilde dil geri çekmek. Baskın el ile, hafif viraj distal olan ucu hayvanın ağzının çatı karşı olacak şekilde ağız içine kanül ilerletmek. Dil bırakın ve manubrium lateral tükürük bezleri yerinden ve trakea kapsayan kas düzleştirmek için ulaşılır kadar ventral boyun boyunca caudally kapalı çalgılar düz kenarı slayt.
Nefes borusu transkutan olarak beyaz bir çizgi olarak görünür. Gerekirse, kaudal yönde bir kaudal yönde gerginlik korurken bir kraniodorsal yönde forceps döndürmek ve tepe ve trakea etrafında daha fazla kontrast oluşturmak için yanal yerinden tükürük bezleri neden. El bileğinin eşzamanlı fleksiyonu ile baskın eli supinating, aynı anda kanül ventrally distal ucu olta ise kanül ilerlemek.
Kanül düzgün yerleştirilmişse, nefes borusuna gözlenir. Uygun bir yerleşim onaylamak için, kanül bir akciğer şişirme ampul bağlayın ve cihazın eşzamanlı depresyon ile torasik genişleme gözlemlemek. Kanül yerinden olmadan, dikkatle entübasyon platformundan farenin kesici ler unhook ve yatay bir platform üzerine fare aktarın, sonra ventilatör adaptör kanül eklemek ve derin bir enflasyon aşağıdaki, solunum direnci ölçmeden önce 60 saniye boyunca fare yi ventilasyon.
İşlem tamamlandıktan sonra fareyi ısıtılmış bir platforma aktarın ve spontan solunumu teşvik etmek için ışık altı veya kuyruk çimdikleri ile sürekli uyarım sağlayın. Spontan solunum gözlendikten sonra, hayvangörsel olarak izlemeye devam edin. Solunum hızı normale döndüğünde, kanülü göbek seviyesinde tutun ve kanül hayvanın ağzından tamamen çıkarılana kadar tüpü yavaşça ve fareden çekin.
Bir kez ektübasyon, tamamen ambulatuar kadar izleme ile ısı desteği ile temiz bir kurtarma kafesine fare aktarın. Bu temsili deneyde, solunum direnci 0, 3, 10 ve 17 günlerinde ölçüldü ve 5-60 saniyelik mekanik ventilasyon için tutulan 25 santimetrelik derin bir silasyon sonrası zorunlu salınım tekniği kullanılarak ölçüldü. Ölçülen solunum direncinde her bir suş taki zaman noktaları arasında anlamlı bir fark gözlenmemiş, bu da solunum direncinde zaman içinde bir artış olmamasının solunum sisteminde art arda dört zaman puanı üzerinde fonksiyonel olarak anlamlı entübasyon travmaya bağlı inflamasyon eksikliğine işaret ettiğini düşündürmektedir.
Bu entübasyon prosedürü deneysel maddelerin kurulumu ve solunum fonksiyonunun seri izleme için trakea erişim sağlamak için kullanılabilir. Bu teknik, invaziv trakeostomi olmadan akciğer fonksiyonunun değerlendirilmesini sağlar, aynı fare içinde kronik ve ilerleyici hastalıklarda birden fazla zaman noktalarında izlenmesini kolaylaştırır.
