为癌症药理学研究创建匹配的体内/体外患者衍生模型对 PDX 和 PDX 衍生器官

此协议可用于建立配对患者衍生的异种移植物（PDX）和相应的患者衍生器官线的匹配库。这种方法的优点是，它可以用来创建使用PDX进行体外筛查的器官，从而产生匹配的体外/体外模型对。首先收获肿瘤并处理文本手稿中描述的组织。

组织消化后，用五毫升无菌塑料移液器上下吹笛。然后将 20 毫升 AD+添加到同质化中，然后用 100 微米细胞过滤器进行过滤。用 AD+清洗两次，然后将其转移到塑料管中，然后以 450 倍 G 的离心处理，为期五分钟。

将 BME 中的细胞重新保存并保存在冰上。为了准备器官培养，将细胞悬浮物的200微升转移到六井板的每口井中，并在37摄氏度下孵育板30分钟。在每口井中加入两毫升的有机介质，并图像代表在显微镜下滴落。

将器官培养物保持在37摄氏度和5%的二氧化碳中，每三到四天发生一次中等变化，每七天以一比二的比例通过。分离器官后，通过 70 微米滤镜运行到 50 毫升塑料管中。在显微镜下数一数器官，并在冰上将其重新注入BME，最终浓度为5%，在每384井板中加入50微升的器官悬浮剂，并配有液体分配器，每口油井的播种密度为200 CR2110 PDXO。

使用数字分配器在串行稀释中将 SN38 添加到每个油井中。使用数字分配器软件工具创建板图。治疗应包括负控制车辆与100%的生存能力和积极控制五微摩尔葡萄球菌素与0%的可行性。

完成后，将经过药物处理的384井板放回37摄氏度的孵化器中。在光显微镜下，PDXO CR2110 显示了典型的囊性形态，表明 PDX 衍生器官与患者衍生器官在相同培养条件下的相似性。H&E染色组织的病理学检查表明，PDXO CR2110的组织结构和细胞类型与原始的PDX CR2110相似。

PDX 和 PDXO 的基因组特征比较表明转录体表达的相关性为 94.92%，DNA 突变的一致性为 97.67%，这表明这两个模型之间的整体基因组相似性。在384井板的PDXO CR2110上进行了药物敏感性检测。PDXO CR2110对伊里诺特坎敏感，对西斯铂具有抗药性，与PDX治疗结果一致。

匹配的体外模型和体内模型可以互相称赞体外筛查和体内验证，提高药物发现的成功率，并可能降低临床开发中的自然减员率。