目前肝移植的问题需要实施大型动物模型。该协议描述了不使用静脉 - 静脉旁路术的猪原位肝移植技术。这种技术大大降低了程序的后勤和技术复杂性。
此外,通过在静态冷藏20小时后移植肝脏,我们的模型模拟了扩展标准供体条件。首先将麻醉的供体猪置于仰卧位,并用松紧带将四肢固定在手术台的底部。用防腐剂擦洗皮肤,并用无菌窗帘覆盖动物。
确认花瓣反射丧失后,使用单极烧灼术从剑突开始进行中线剖腹手术,并使用剪刀和双极烧灼切断镰状和三角韧带。充分进行肝脏清扫后,用剪刀将横膈膜的左侧切开 5 至 10 厘米的距离,以定位降主动脉的胸段。包围并放置 3-0 多丝结扎,不要拧紧。
用剪刀切开横膈膜的右侧部分 5 到 10 厘米的距离,并确定下腔静脉。将肠重新定位到供体的左上角,并使用剪刀在5至10厘米的距离内横向切开腹膜后空间。在腹主动脉周围放置两个 3-0 多丝结扎。
一个髂骨分叉的颅骨和一个大约 3 厘米的颅骨,没有收紧。在下肝下腔静脉周围放置另一个结扎,不要收紧。收紧腹主动脉周围位于尾部的第一结扎。
在第二个结扎的颅骨上闭塞腹主动脉后,用剪刀在两个结扎之间做一个横向切口。将套管插入切口并用剩余的结扎固定。用剪刀切断颅上下腔静脉,远离右心房。
失血约1, 500至2, 000毫升后,通过结扎交叉夹住降主动脉的胸段并开始顺行灌注。收紧放置在下肝下静脉周围的结扎。切开结扎的颅骨血管并插入手术吸引器。
在大约10至15分钟的过程中用3,500毫升保存溶液灌注后,切断供体猪下方的肝上肝静脉,然后在左肾静脉水平切断下肝下腔静脉。在两个 3-0 多丝结扎之间切断胰腺组织的胆管颅骨以避免胆汁溢出,然后切断胰腺的门静脉颅骨。钝器准备后找到乳糜泻动脉,然后沿着腹主动脉背侧。
切除相应的主动脉段以创建用于植入的贴片。切除下部超级肝静脉周围的横膈膜,并用剪刀切断剩余的粘连。取出肝脏并放在冰上。
进行胆囊切除术或收紧胆囊管周围的结扎,然后用至少 20 毫升的保存溶液冲洗胆总管。将灌注插管放入门静脉,并用500毫升保存溶液冲洗移植物。将移植物放入放在冰上的无菌碗中。
切除主动脉段和肝动脉的淋巴组织,从而用夹子、结扎或缝合线识别和闭塞动脉侧支和淋巴管。以类似的方式处理门静脉。仅在植入和植入时进行血管缩短和主动脉瓣贴片的准备,以考虑个体解剖情况。
识别下肝腔静脉,并在切除周围膈肌组织后在两条膈静脉周围缝合。将麻醉的受体猪置于仰卧位。如前所述,进入腹腔并使用剪刀和双极烧灼切断麻醉动物的镰状和三角形韧带。
充分进行肝脏清扫后,将上静脉和肝下腔静脉包围在靠近肝实质的地方。切开覆盖肝十二指肠韧带的浅表腹膜层,并在进入肝实质之前识别肝动脉。使用双相烧灼或放置夹子、结扎或缝合线进行解剖。
解剖并切断两个结扎之间的胆囊管连接处下方的胆总管。识别门静脉并靠近肝实质。切开左右膈肌之间的无血管层后识别腹主动脉。
通过切除周围组织来准备主动脉吻合术。通过将创伤性血管钳夹放在门静脉上进行受者肝切除术,并在靠近肝实质的地方切断门静脉,然后切断肝下腔静脉。将非创伤性血管钳夹放在包括周围膈肌在内的上尿腔静脉上,同时尾部回缩肝脏并切断靠近肝实质的血管。
从腹腔中取出受体肝脏。将供体肝脏放入腹腔,将供体或受体下腔静脉缩短至足够长度,同时避免吻合口扭结或张力过大。放置一条 5-0 单丝缝合线作为支撑线,适应供体和受体上肝腔静脉下部的右角。
用5-0单丝双臂跑线从血管的左角开始吻合的背侧。到达右角时取下支撑线并用夹子固定运行缝合线,然后继续吻合口的腹侧,再次从血管的左角开始。完成吻合的腹侧后,用多个结收紧缝合线,不要限制血管直径,以避免狭窄。
如前所述,使用 6-0 单丝双臂缝合线对供体和受体门静脉进行血管吻合。通过移除血管钳夹开始门静脉再灌注,阻塞受体门静脉,并在引流约 200 至 400 毫升血液后用血管钳夹闭塞供体下肝下腔静脉。慢慢移除阻塞受体上肝下腔静脉的血管钳夹,并寻找活动性出血。
缩短供体和/或受体下腔静脉。然后对供体和受体进行下肝下腔静脉的血管吻合术。夹住腹主动脉并切开以适合贴片后,在切口或贴片的颅角处用 6-0 单丝双臂跑线开始主动脉吻合术。
当到达尾角时,用夹子固定运行缝合线,并从颅角开始再次完成吻合。用多个结拧紧缝合线,并在检查所有血管吻合后慢慢取下血管夹。将导管置于胆总管中,并用单个结扎将其固定。
通过调整肌肉筋膜和皮肤,用跑步缝合线暂时关闭腹部,并用粘膜或窗帘覆盖腹部以避免热损失。平均手术时间为103.50分钟,其中平均期和肝期为27.13分钟。只有两名受者经历了超过30分钟的无肝期,而所有受者在门静脉再灌注后4小时都显示出乳酸血清浓度下降。
接受者需要在无肝期之前和整个期增加去甲肾上腺素浓度,以将平均动脉压稳定在60毫米汞柱或更高。在这个脆弱的时期,低肾上腺素浓度同时用于增加心输出量。植入后,平均动脉压和所需剂量的血管加压药保持稳定。
门静脉再灌注后6小时获得的LiMAx值与肝脏供体在器官获取前测量的值相当,除了一个无肝期为34分钟的受体。该模型作为病情检查的读数可能特别有趣,重点是缺血和再灌注损伤的机制以及扩展标准供体器官的修复。