Karaciğer transplantasyonundaki güncel konular büyük hayvan modellerinin uygulanmasını gerektirmektedir. Bu protokol, veno-venöz bypass kullanılmadan domuz ortotopik karaciğer transplantasyonu tekniğini tanımlamaktadır. Bu teknik, prosedürün lojistik ve teknik karmaşıklığını önemli ölçüde azaltır.
Ayrıca, 20 saatlik statik soğuk hava deposundan sonra karaciğerleri aşılayarak, modelimiz genişletilmiş kriterli donör koşullarını simüle eder. Anestezi uygulanan donör domuzu sırtüstü pozisyona getirerek başlayın ve uzuvları ameliyat masasının tabanına elastik bantlarla sabitleyin. Cildi antiseptik bir ajanla ovalayın ve hayvanı steril örtülerle örtün.
Yaprak refleksinin kaybını doğruladıktan sonra, monopolar koter kullanarak ksifoid süreçten başlayarak bir orta hat laparotomi yapın ve makas ve bipolar koter kullanarak falsiform ve üçgen bağları kesin. Yeterli karaciğer diseksiyonundan sonra, inen aortun torasik segmentini bulmak için makas kullanarak diyaframın sol kısmını 5 ila 10 santimetrelik bir mesafeden kesin. Sıkmadan 3-0'lık bir polifilament bağını çevreleyin ve yerleştirin.
Makas kullanarak diyaframın sağ kısmını 5 ila 10 santimetrelik bir mesafeden kesin ve suprahepatik vena kava inferioru tanımlayın. Bağırsağı donörün sol üst köşesine yerleştirin ve makas kullanarak periton 5 ila 10 santimetre mesafeden transvers kesi ile retroperitoneal boşluğa girin. Abdominal aortun etrafına iki adet 3-0 polifilament ligatür yerleştirin.
İliak bifurkasyonun bir kraniyal ve bir tanesi sıkılmadan kraniyal olarak yaklaşık 3 santimetredir. Sıkmadan infrahepatik vena kava inferior etrafına başka bir bağ yerleştirin. Abdominal aort etrafındaki kaudal olarak yerleştirilmiş ilk ligatürü sıkın.
İkinci ligatürdeki abdominal aortu kraniyal olarak tıkadıktan sonra, makas kullanarak her iki ligatür arasında enine bir kesi yapın. Kanülü kesiye yerleştirin ve kalan ligatür ile sabitleyin. Makas kullanarak, suprahepatik inferior vena kavayı sağ atriyuma kraniyal olarak çok yakın bir yerde kesin.
Yaklaşık 1.500 ila 2.000 mililitre kan kaybından sonra, ligatürü bağlayarak inen aortun torasik segmentini çapraz kelepçeleyin ve antegrad perfüzyona başlayın. İnfrahepatik vena kava inferior etrafına yerleştirilen bağı sıkın. Damarı ligatürün kraniyal olarak kesin ve cerrahi aspiratörü yerleştirin.
Yaklaşık 10 ila 15 dakika boyunca 3.500 mililitre koruma çözeltisi ile perfüzyondan sonra, donör domuzun iç supra hepatik vena kavasını inferior olarak ayırın, ardından infrahepatik vena kava inferiorunu sol böbrek damarı seviyesinde ayırın. Safra dökülmesini önlemek için pankreas dokusunun safra kanalı kraniyalini iki 3-0 polifilament ligatür arasında ayırın, ardından pankreasın portal ven kraniyalini kesin. Künt preparattan sonra çölyak arterini bulun ve abdominal aortu dorsal olarak takip edin.
Engraftment için bir yama oluşturmak için ilgili aort segmentini tüketin. Süper hepatik vena kava inferior etrafındaki diyaframı tüketin ve makas kullanarak kalan yapışmaları kesin. Karaciğeri çıkarın ve buzun üzerine yerleştirin.
Bir kolesistektomi yapın veya kistik kanalın etrafındaki bir bağı sıkın, ardından ortak safra kanalını en az 20 mililitre koruma çözeltisi ile yıkayın. Perfüzyon kanülünü portal venin içine yerleştirin ve grefti 500 mililitre koruma solüsyonu ile yıkayın. Grefti buz üzerine yerleştirilmiş steril bir kaba yerleştirin.
Aort segmentinin ve hepatik arterin lenfatik dokusunu çıkarın, böylece arteriyel yan dalları ve lenfatik damarları klipsler, bağlar veya dikişlerle tanımlayın ve tıkayın. Portal damarı ile benzer şekilde ilerleyin. Damarların kısaltılmasını ve aort yamasının sadece üzerine hazırlanmasını ve bireysel anatomik koşulları dikkate almak için engraftmanı gerçekleştirin.
Süper hepatik vena kava inferiorunu tanımlayın ve çevreleyen diyafram dokusunu çıkardıktan sonra her iki diyafram damarının etrafına dikişler yerleştirin. Anestezi uygulanan alıcı domuzu sırtüstü pozisyona getirin. Karın boşluğuna girin ve daha önce gösterildiği gibi makas ve bipolar koter kullanarak anestezi uygulanan hayvanın falsiform ve üçgen bağlarını kesin.
Yeterli karaciğer diseksiyonundan sonra, karaciğer parankimine yakın hem supra hem de infrahepatik vena kava inferiorunu çevreleyin. Hepatoduodenal ligamenti kaplayan yüzeysel periton tabakasını kesin ve karaciğer parankimine girmeden önce hepatik arterleri tanımlayın. Bipolar koter kullanarak veya klipsleri, bağları veya dikişleri yerleştirerek disseke edin.
İki ligatür arasındaki kistik kanal kavşağının altındaki ortak safra kanalını disseke edin ve ayırın. Portal veni tanımlayın ve karaciğer parankimine yakın çevreleyin. Sağ ve sol diyafragma kasları arasındaki avasküler tabakayı kestikten sonra abdominal aortu tanımlayın.
Çevreleyen dokunun çıkarılmasıyla aort anastomozu için aortu hazırlayın. Portal ven üzerine travmatik vasküler bir kelepçe yerleştirerek alıcı hepatektomi yapın ve portal veni karaciğer parankimine yakın bir yerde ve ardından infrahepatik vena kava ile ayırın. Suprahepatik vena kava üzerine, karaciğeri kaudal olarak geri çekerken çevreleyen diyaframı da içeren atravmatik bir vasküler kelepçe yerleştirin ve damarı karaciğer parankimine yakın bir yerde kesin.
Alıcı karaciğeri karın boşluğundan çıkarın. Donör karaciğerini karın boşluğuna yerleştirin ve anastomozda bükülmeyi veya çok fazla gerginliği önlerken, donör veya alıcı suprahepatik vena kavayı yeterli uzunluktan daha düşük bir uzunlukta kısaltın. Donör ve alıcı supra hepatik vena kava inferiorunun sağ köşesini uyarlayan destekleyici bir iplik olarak tek bir 5-0 monofilament sütür yerleştirin.
Anastomozun dorsal tarafını damarların sol köşesinden 5-0 monofilament çift kollu koşu sütürü ile başlatın. Sağ köşeye ulaşırken destek ipliğini çıkarın ve akan dikişi bir kelepçe ile sabitleyin, ardından damarların sol köşesinden başlayarak anastomozun ventral tarafı ile devam edin. Anastomozun ventral tarafını tamamladıktan sonra, darlığı önlemek için damar çapını daraltmadan sütürü çoklu düğümlerle sıkın.
Donör ve alıcı portal venin vasküler anastomozunu daha önce gösterildiği gibi 6-0 monofilament çift kollu sütür kullanarak gerçekleştirin. Portal venöz reperfüzyona vasküler kelepçeyi çıkararak, alıcı portal veni tıkayarak ve yaklaşık 200 ila 400 mililitre kan boşalttıktan sonra donör infrahepatik vena kava inferiorunu vasküler bir kelepçe ile tıkayarak başlayın. Alıcı supra hepatik vena kava inferioru tıkayan vasküler kelepçeyi yavaşça çıkarın ve aktif kanamayı arayın.
Donör ve/veya alıcı infrahepatik vena kava inferiorunu kısaltın. daha sonra donör ve alıcı infrahepatik vena kava inferiorun vasküler anastomozunu gerçekleştirin. Abdominal aortu sıkıştırdıktan ve yamaya uyacak bir kesi yaptıktan sonra, insizyonun veya yamanın kraniyal köşesinde 6-0 monofilament çift kollu koşu sütürü ile aort anastomozuna başlayın.
Kaudal köşeye ulaşırken, koşu dikişini bir kelepçe ile sabitleyin ve kraniyal köşeden başlayarak anastomozu tekrar tamamlayın. Dikişi birden fazla düğümle sıkın ve tüm vasküler anastomozları kontrol ettikten sonra vasküler kelepçeyi yavaşça çıkarın. Ortak safra kanalına bir kateter yerleştirin ve tek bir ligatür ile sabitleyin.
Kas fasyasını ve cildi akan bir dikişle uyarlayarak karnı geçici olarak kapatın ve termal kaybı önlemek için karnı yapışkan film veya perdelerle örtün. Ortalama ameliyat süresi ortalama 27.13 dakikalık hepatik faz dahil 103.50 dakika idi. Sadece iki alıcıya 30 dakikadan fazla anhepatik faz uygulanırken, tüm alıcılar portal venöz reperfüzyondan 4 saat sonra laktat serum konsantrasyonlarında azalma gösterdi.
Alıcılar, ortalama arteriyel basıncı 60 milimetre cıva veya daha yüksek bir seviyede stabilize etmek için anhepatik fazdan hemen önce ve boyunca artan norepinefrin konsantrasyonlarına ihtiyaç duyuyorlardı. Düşük epinefrin konsantrasyonları, bu hassas zaman diliminde kalp debisini arttırmak için aynı anda kullanılmıştır. Engraftmandan sonra, ortalama arteriyel basınç ve gerekli dozlarda vazopressör stabil kaldı.
Portal venöz reperfüzyondan 6 saat sonra elde edilen LiMAx değerleri, 34 dakikalık anhepatik fazı olan bir alıcı hariç tüm alıcılarda organ alımından önce karaciğer donörlerinde ölçülen değerlerle karşılaştırılabilirdi. Bu model, iskemi ve reperfüzyon hasarı mekanizmalarına ve genişletilmiş kriterli donör organların yenilenmesine odaklanan çalışmalar için bir okuma olarak özel ilgi çekici olabilir.
