تتطلب المشكلات الحالية في زراعة الكبد تنفيذ نماذج حيوانية كبيرة. يصف هذا البروتوكول تقنية زرع الكبد التقويمي الخنازير دون استخدام المجازة الوريدية. هذه التقنية تقلل بشكل كبير من التعقيد اللوجستي والتقني للإجراء.
علاوة على ذلك ، من خلال نقش الكبد بعد 20 ساعة من التخزين البارد الثابت ، يحاكي نموذجنا شروط المانحين ذات المعايير الممتدة. ابدأ بوضع الخنزير المانح المخدر في وضع ضعيف وثبت الأطراف في قاعدة طاولة العمليات بأشرطة مرنة. فرك الجلد بعامل مطهر وتغطية الحيوان بستائر معقمة.
بعد التأكد من فقدان منعكس البتلة ، قم بإجراء بضع البطن في خط الوسط بدءا من عملية الخنجري باستخدام الكي أحادي القطب وقطع الأربطة المنجلية والأربطة المثلثة باستخدام المقص والكي ثنائي القطب. بعد تسلخ الكبد بشكل كاف، قم بشق الجزء الأيسر من الحجاب الحاجز على مسافة 5 إلى 10 سنتيمترات باستخدام مقص لتحديد الجزء الصدري من الشريان الأورطي النازل. تطويق ووضع الرباط 3-0 polyfilament دون شد.
شق الجزء الأيمن من الحجاب الحاجز على مسافة 5 إلى 10 سنتيمترات باستخدام المقص وتحديد الوريد الأجوف فوق الكبدي السفلي. انقل الأمعاء إلى أعلى يسار المتبرع وادخل إلى الفضاء خلف الصفاق عن طريق شق عرضي للبريتوني على مسافة 5 إلى 10 سم باستخدام المقص. ضع اثنين من الأربطة متعددة الشعيرات 3-0 حول الشريان الأورطي البطني.
جمجمة واحدة من التشعب الحرقفي وواحدة حوالي 3 سم في الجمجمة دون شد. ضع رباطا آخر حول الوريد الأجوف تحت الكبدي السفلي دون شد. شد الرباط الأول الموجود ذيليا حول الشريان الأورطي البطني.
بعد انسداد الشريان الأورطي البطني بشكل قحفي من الرباط الثاني ، قم بعمل شق عرضي بين كل من الأحرف المركبة باستخدام المقص. أدخل القنية في الشق وقم بتثبيتها بالرباط المتبقي. باستخدام المقص ، قم بقطع الوريد الأجوف السفلي فوق الكبدي بالقرب من الأذين الأيمن.
بعد فقدان الدم من حوالي 1،500 إلى 2،000 ملليلتر ، عبر المشبك الجزء الصدري من الشريان الأورطي الهابط عن طريق ربط الرباط والبدء في التروية antigrade. تشديد الرباط وضعت حول الوريد الأجوف تحت الكبدي السفلي. شق الوعاء القحفي للرباط وأدخل الشافطة الجراحية.
بعد التروية مع 3،500 ملليلتر من محلول الحفظ على مدار حوالي 10 إلى 15 دقيقة ، قم بقطع الوريد الأجوف فوق الكبدي السفلي السفلي للخنزير المانح ، ثم اقطع الوريد الأجوف تحت الكبدي السفلي على مستوى الوريد الكلوي الأيسر. قطع القحف القناة الصفراوية من أنسجة البنكرياس بين اثنين من الأربطة 3-0 خيوط لتجنب انسكاب الصفراء ، ثم قطع الجمجمة الوريد البابي للبنكرياس. حدد موقع الشريان البطني بعد التحضير الحاد واتبع ظهريا إلى الشريان الأورطي البطني.
استئصال الجزء الأبهر المعني لإنشاء رقعة للنقش. استئصال الحجاب الحاجز حول الوريد الأجوف الكبدي الفائق السفلي وقطع الالتصاقات المتبقية باستخدام المقص. استخراج الكبد ومكان على الجليد.
قم بإجراء استئصال المرارة أو شد الرباط حول القناة الكيسية ، ثم اغسل القناة الصفراوية المشتركة بما لا يقل عن 20 ملليلتر من محلول الحفظ. ضع قنية التروية في الوريد البابي واغسل الكسب غير المشروع ب 500 مل من محلول الحفظ. ضع الكسب غير المشروع في وعاء معقم يوضع على الثلج.
إزالة الأنسجة اللمفاوية للجزء الأبهري والشريان الكبدي ، وبالتالي تحديد وانسداد الفروع الجانبية الشريانية والأوعية اللمفاوية إما بالمشابك أو الأربطة أو الغرز. تابع بالمثل مع الوريد البوابة. إجراء تقصير الأوعية وإعداد رقعة الأبهر فقط على و engraftment لمراعاة الظروف التشريحية الفردية.
تحديد الوريد الأجوف الكبدي الفائق السفلي ووضع الغرز حول كل من الأوردة الحجاب الحاجز بعد إزالة أنسجة الحجاب الحاجز المحيطة. ضع الخنزير المتلقي المخدر في وضع ضعيف. أدخل تجويف البطن وقطع الأربطة المنجلية والمثلثة للحيوان المخدر باستخدام المقص والكي ثنائي القطب كما هو موضح سابقا.
بعد تشريح الكبد الكافي ، تطويق كل من الوريد الأجوف فوق وتحت الكبد السفلي بالقرب من حمة الكبد. شق الطبقة البريتونية السطحية التي تغطي الرباط الكبدي الاثني عشر وتحديد الشرايين الكبدية قبل دخول حمة الكبد. تشريح باستخدام الكي ثنائي القطب أو وضع المشابك أو الأربطة أو الغرز.
تشريح وقطع القناة الصفراوية المشتركة أسفل تقاطع القناة الكيسية بين اثنين من الأربطة. تحديد الوريد البابي وتطويقه بالقرب من حمة الكبد. تحديد الشريان الأورطي البطني بعد شق الطبقة اللاوعائية بين عضلات الحجاب الحاجز اليمنى واليسرى.
تحضير الشريان الأورطي لمفاغرة الأبهر عن طريق إزالة الأنسجة المحيطة. إجراء استئصال الكبد المتلقي عن طريق وضع مشبك الأوعية الدموية الرضحية على الوريد البابي وقطع الوريد البابي بالقرب من حمة الكبد تليها الوريد الأجوف تحت الكبد. ضع مشبكا وعائيا غير رضحي على الوريد الأجوف فوق الكبدي بما في ذلك الحجاب الحاجز المحيط أثناء سحب الكبد ذيليا وقطع الوعاء بالقرب من حمة الكبد.
إزالة الكبد المتلقي من تجويف البطن. ضع كبد المتبرع في تجويف البطن وقم بتقصير الوريد الأجوف فوق الكبدي للمتبرع أو المتلقي أدنى من طول مناسب مع تجنب الالتواء أو الكثير من التوتر على المفاغرة. ضع خيطا واحدا من الشعيرات الأحادية 5-0 كخيط داعم يتكيف مع الزاوية اليمنى للمتبرع والمتلقي فوق الوريد الأجوف فوق الكبدي السفلي.
ابدأ الجانب الظهري من مفاغرة من الزاوية اليسرى للأوعية بخياطة جري مزدوجة الذراع 5-0. قم بإزالة الخيط الداعم عند الوصول إلى الزاوية اليمنى وتأمين خياطة الجري بمشبك ، ثم تابع مع الجانب البطني من مفاغرة ، مرة أخرى ، بدءا من الزاوية اليسرى للأوعية. بعد الانتهاء من الجانب البطني من المفاغرة ، شد الخيط بعقدة متعددة دون تضييق قطر الوعاء لتجنب التضيق.
إجراء مفاغرة وعائية للوريد البابي للمتبرع والمتلقي كما هو موضح سابقا باستخدام خياطة أحادية الذراع مزدوجة الشعيرات 6-0. ابدأ إعادة التروية الوريدية البابية عن طريق إزالة المشبك الوعائي ، وسد الوريد البابي المتلقي وسد الوريد الأجوف تحت الكبدي المانح السفلي بمشبك وعائي بعد تصريف ما يقرب من 200 إلى 400 ملليلتر من الدم. قم بإزالة المشبك الوعائي ببطء الذي يسد المتلقي فوق الكبد الوريد الأجوف السفلي وابحث عن نزيف نشط.
تقصير المتبرع و / أو المتلقي الوريد الأجوف تحت الكبدي السفلي. ثم إجراء مفاغرة الأوعية الدموية من المتبرع والمتلقي تحت الكبد الوريد الأجوف السفلي. بعد تثبيت الشريان الأورطي البطني وإجراء شق ليناسب الرقعة ، ابدأ مفاغرة الأبهر بخياطة جري مزدوجة الذراع أحادية 6-0 في الزاوية القحفية من الشق أو الرقعة.
عند الوصول إلى الزاوية الذيلية ، قم بتأمين خياطة الجري بمشبك وأكمل مفاغرة مرة أخرى بدءا من الزاوية القحفية. شد الخيط بعقدة متعددة وقم بإزالة المشبك الوعائي ببطء بعد فحص جميع مفاغرة الأوعية الدموية. ضع قسطرة في القناة الصفراوية المشتركة وقم بتثبيتها برباط واحد.
أغلق البطن مؤقتا عن طريق تكييف اللفافة العضلية والجلد بخياطة جارية وقم بتغطية البطن بغشاء أو ستائر متشبثة لتجنب الخسارة الحرارية. كان متوسط وقت التشغيل 103.50 دقيقة بما في ذلك المرحلة المتوسطة والكبدية 27.13 دقيقة. خضع اثنان فقط من المتلقين لمرحلة انكبدية لأكثر من 30 دقيقة بينما أظهر جميع المتلقين انخفاضا في تركيزات مصل اللاكتات بعد 4 ساعات من إعادة التروية الوريدية البابية.
احتاج المتلقون إلى تركيزات متزايدة من النورإبينفرين مباشرة قبل وطوال المرحلة الكبدية لتثبيت متوسط الضغط الشرياني عند 60 ملليمتر من الزئبق أو أعلى. تم استخدام تركيزات الإبينفرين المنخفضة في وقت واحد لزيادة النتاج القلبي في هذه الفترة الزمنية الضعيفة. بعد النقش ، ظل متوسط الضغط الشرياني والجرعات المطلوبة من مثبطات الأوعية مستقرة.
كانت قيم LiMAx التي تم الحصول عليها بعد 6 ساعات من إعادة التروية الوريدية البابية قابلة للمقارنة مع القيم المقاسة في المتبرعين بالكبد قبل شراء الأعضاء في جميع المتلقين باستثناء واحد مع مرحلة كبدية مدتها 34 دقيقة. يمكن أن يكون هذا النموذج ذا أهمية خاصة كقراءات للفحوصات التي تركز على آليات نقص التروية وإصابة إعادة التروية وإعادة تكييف الأعضاء المانحة ذات المعايير الموسعة.
