滑液分析以识别骨关节炎

滑液分析可在初始评估有肌肉骨骼症状和关节积液的患者期间揭示炎症程度和致病晶体的存在。这种技术的主要优点是其简单性和可靠性。通过几个步骤，临床医生可以获得有关患者疾病的重要诊断信息。

特定晶体的鉴定对于诊断和治疗至关重要。尿酸盐晶体提示痛风，而焦磷酸钙和其他钙晶体提示钙相关的关节病或更严重的骨关节炎。首先，取在患者肿胀关节穿刺术期间收集的滑液样本。

以毫升为单位注释样品的体积，并将其分别转移到含有抗凝剂EDTA的管和另一个不含任何添加剂的管中。在疑似感染病例中，无菌地将几毫升滑液样品转移到培养瓶中进行微生物检测。要从宏观角度检查样品，请取一个装有样品的试管并定义样品的颜色，其范围可以从浅黄色到深黄色。

记录血液的存在（如果有的话）。通过在背光中观察样品并确定通过包含样品的管读取打印页面的难易程度来定义样品的清晰度。然后通过从一次性移液器滴入样品来评估样品的粘度。

虽然一长串液体的出现表明高粘度，但液滴的形成表明低粘度。通过试管观察样品，背景中的光是否存在任何颗粒材料，包括组织碎片或纤维蛋白。要确定总白细胞计数，请使用Malassez-Potain移液管从含有EDTAA的管中抽取0.5微升样品。

使用相同的移液器吸取9.5微升0.1%亚甲蓝溶液。通过轻轻倒置在移液器中混合样品和亚甲蓝溶液。在将混合物倒入血细胞计数器的计数室之前丢弃前几滴。

现在，从九中计算两个连续正方形中的单元格，然后将获得的数字乘以100。将总白细胞计数表示为每立方毫米的白细胞数量。使用不含任何添加剂的管中的滑液样本来确定滑液样本的白细胞计数差异。

为了使用活体上染色确定差异细胞计数，取一张预涂有结晶紫和亚甲蓝的即用型载玻片，并将一小滴样品放在载玻片的中心。接下来，用盖玻片盖住样品液滴，并在盖玻片上滴一滴显微镜浸油。要使用传统染色来估计差异细胞计数，首先将一小滴样品放在干净的载玻片末端。

现在使用第二张载玻片或盖玻片沿载玻片向前移动液滴。让涂抹物在空气中干燥。在1， 000X油浸物镜下检查含有风干涂片的载玻片。

通过计数 100 个连续细胞来估计差异细胞计数，同时区分多形核细胞、单核细胞和淋巴细胞。用吸收了乙醇的光学纸或软纸清洁载玻片。在载玻片上涂抹一小滴未与任何添加剂混合的样品，并在将载玻片置于显微镜下之前用盖玻片盖住。

使用低倍放大倍率物镜将载玻片聚焦在显微镜下，并在具有40倍物镜的明场下仔细检查。观察细胞内部和外部，根据晶体的大小和形状识别晶体，可以是菱形、针状或棒状。然后将偏振滤光片插入光源和标本之间。

要创建深色背景，请旋转偏振片，直到其光轴垂直于分析仪。一旦确定了双折射晶体，将补偿器插入偏振器和试样之间，并将其平行或垂直于晶体的光轴移动。观察水晶显示的颜色。

对于茜素红染色，在干净的载玻片上将一滴滑液样品与等体积的先前制备的茜素红溶液混合。用盖玻片盖住载玻片，并在显微镜下以400X放大倍率检查以识别晶体。滑液样本的宏观特征表明炎症程度。

具有淡黄色和更清晰的样本通常与非炎症性疾病（如骨关节炎）有关。另一方面，具有深黄色和浑浊外观的样品表明存在与炎性积液相关的细胞、碎片、透明质酸和纤维蛋白碎片。在骨关节炎患者的滑液样本中观察到的白细胞主要是单核细胞和其他单核细胞，如滑膜细胞。

在滑液样品中检测到焦磷酸钙晶体，表明炎症细胞因子水平相对较高。此外，茜素红染色阳性显示样品中存在碱性磷酸钙晶体。在寻找晶体时，在普通光线下仔细检查载玻片非常重要。

请记住，焦磷酸盐晶体通常是弱双折射的，在偏振光下可能会被遗漏。滑液中钙晶体的存在及其与更严重形式的疾病的关联促使研究人员探索骨关节炎发病机制和进展的新机制。