활액 분석은 근골격계 증상 및 관절 삼출액이 있는 환자의 초기 평가 동안 염증 정도와 병원성 결정의 존재를 밝힐 수 있습니다. 이 기술의 가장 큰 장점은 단순성과 신뢰성입니다. 몇 단계만 거치면 임상의는 환자의 질병에 대한 중요한 진단 정보를 얻을 수 있습니다.
특정 결정의 식별은 진단 및 치료에 매우 중요합니다. 요산염 결정은 통풍을 나타내는 반면, 피로인산칼슘 및 기타 칼슘 결정은 칼슘 관련 관절병증 또는 더 심각한 형태의 골관절염을 나타냅니다. 시작하려면 환자의 부은 관절의 관절 천자 중에 수집 된 활액 샘플을 채취하십시오.
샘플의 부피를 밀리리터 단위로 주석을 달고 항응고제 EDTA가 들어있는 튜브와 첨가제가없는 다른 튜브에 별도로 옮깁니다. 감염이 의심되는 경우 미생물 검사를 위해 몇 밀리리터의 활액 샘플을 배양 병에 무균 상태로 옮깁니다. 샘플을 거시적으로 검사하려면 샘플이 들어 있는 튜브를 사용하여 옅은 노란색에서 짙은 노란색까지 샘플의 색상을 정의합니다.
혈액이 있는 경우 이를 기록하십시오. 샘플의 선명도는 백라이트에서 관찰하고 샘플이 들어 있는 튜브를 통해 인쇄된 페이지를 쉽게 읽을 수 있는지 결정하여 정의합니다. 그런 다음 일회용 피펫에서 샘플을 떨어 뜨려 샘플의 점도를 평가하십시오.
긴 액체 끈의 모양은 높은 점도를 나타내지만 방울의 형성은 낮은 점도를 나타냅니다. 조직 조각이나 피브린을 포함한 미립자 물질의 존재에 대해 배경에 빛이 있는 튜브를 통해 샘플을 관찰하십시오. 총 백혈구 수를 측정하려면 Malassez-Potain 피펫을 사용하여 EDTAA가 들어 있는 튜브에서 0.5마이크로리터의 샘플을 채취합니다.
동일한 피펫을 사용하여 9.5마이크로리터의 0.1% 메틸렌 블루 용액을 채취합니다. 부드러운 반전으로 피펫에 있는 샘플과 메틸렌 블루 용액을 혼합합니다. 혼합물을 혈구계의 계수 챔버에 붓기 전에 처음 몇 방울을 버리십시오.
이제 9 개 중 2 개의 연속 사각형으로 셀을 세고 얻은 숫자에 100을 곱합니다. 총 백혈구 수를 입방 밀리미터당 백혈구 수로 표현합니다. 첨가제 없이 튜브의 활액 샘플을 사용하여 활액 샘플의 차등 백혈구 수를 결정합니다.
supravital 염색을 사용하여 감별 세포 수를 측정하려면 크리스탈 바이올렛과 메틸렌 블루로 미리 코팅된 즉시 사용 가능한 슬라이드를 가져와서 슬라이드 중앙에 작은 샘플 한 방울을 떨어뜨립니다. 다음으로, 샘플 방울을 커버슬립으로 덮고 현미경 침지 오일 한 방울을 커버슬립에 놓습니다. 감별 세포 수를 추정하기 위해 기존 염색을 사용하려면 먼저 깨끗한 슬라이드 끝에 샘플을 작은 방울로 떨어뜨립니다.
이제 두 번째 슬라이드 또는 커버슬립을 사용하여 앞으로 움직여 슬라이드를 따라 드롭을 펼칩니다. 얼룩을 공기 중에서 말리십시오. 공기 건조 도말이 포함된 슬라이드를 1, 000X 오일 침지 대물렌즈로 검사합니다.
다형핵 세포, 단핵구 및 림프구를 서로 구별하면서 100개의 연속 세포를 계수하여 차등 세포 수를 추정합니다. 에탄올을 흡수한 광학 또는 부드러운 종이로 유리 슬라이드를 청소하십시오. 유리 슬라이드에 첨가제와 혼합되지 않은 샘플을 작은 방울로 바르고 슬라이드를 현미경 아래에 놓기 전에 커버슬립으로 덮습니다.
저전력 배율 대물렌즈를 사용하여 현미경으로 슬라이드의 초점을 맞추고 40X 대물렌즈로 명시야 아래에서 주의 깊게 검사합니다. 세포 내부와 외부를 살펴보고 마름모꼴, 바늘 모양 또는 막대 모양일 수 있는 크기와 모양에 따라 결정을 식별합니다. 그런 다음 광원과 시편 사이에 편광 필터를 삽입합니다.
어두운 배경을 만들려면 광축이 분석기에 수직이 될 때까지 편광판을 돌립니다. 복굴절 결정이 확인되면 편광판과 시편 사이에 보정기를 삽입하고 결정의 광축에 평행 또는 수직으로 이동합니다. 크리스탈에 의해 드러난 색을 관찰하십시오.
Alizarin Red 염색의 경우, 활액 샘플 한 방울을 깨끗한 슬라이드에서 이전에 준비된 동일한 양의 Alizarin Red 용액과 혼합합니다. 슬라이드를 커버슬립으로 덮고 현미경으로 400X 배율로 검사하여 결정을 식별합니다. 활액 샘플의 거시적 특성은 염증의 정도를 나타냅니다.
옅은 노란색과 더 선명한 샘플은 일반적으로 골관절염과 같은 비염증성 상태와 관련이 있습니다. 반면에 짙은 노란색과 탁한 외관을 가진 샘플은 염증성 삼출액과 관련된 세포, 파편, 히알루론산 및 피브린 조각의 존재를 나타냅니다. 골관절염 환자의 활액 샘플에서 관찰된 백혈구는 대부분 단핵구와 활액막과 같은 다른 단핵 세포였습니다.
칼슘 피로인산염 결정은 활액 샘플에서 검출되었으며, 이는 상대적으로 더 높은 수준의 염증성 사이토카인을 나타냅니다. 또한, 양성 Alizarin Red 염색은 샘플에서 염기성 인산 칼슘 결정의 존재를 밝혀 냈습니다. 결정을 찾을 때 일반 조명 아래에서 슬라이드를 주의 깊게 검사하는 것이 매우 중요합니다.
피로인산염 결정은 종종 복굴절이 약하고 편광된 빛 아래에서 놓칠 수 있음을 기억하십시오. 활액에 칼슘 결정이 존재하고 더 심각한 형태의 질병과의 연관성으로 인해 연구자들은 골관절염의 발병 기전과 진행에 대한 새로운 메커니즘을 탐구하게 되었습니다.
