使用银纳米颗粒改善小鼠骨关节炎

这种方法有可能被用作膝骨关节炎的新临床策略。这种技术是安全的，局部注射简单，并且治疗在动物实验中是有效的。银纳米颗粒可能适用于其他炎症疾病，需要进一步研究。

因此，在注射小鼠的膝盖大小时要小心，确保正确的程序，这一点很重要。评估膝盖膝关节的手部填充情况，避免任何药物泄漏。首先将麻醉的小鼠放在手术台上。

用胶带粘住老鼠的四肢，然后用剃须刀剃掉皮毛。接下来，用 0.1% 碘仿和酒精交替擦洗对剃光区域进行三次消毒。使用剪刀在皮肤上切开一个切口，依次暴露皮下组织和髌骨下韧带。

用一毫升胰岛素注射器，将10单位的二型胶原酶注射到关节腔中。缝合皮下组织，然后缝合皮肤。现在用0.1%碘仿对缝合区域进行消毒。

一旦小鼠从麻醉中醒来，将小鼠放入单独通风的笼子中。首先将 400 微升 1 型胶原蛋白加入放置在冰上的 1.5 毫升微量离心管中。现在，加入 200 微升 PBX，搅拌均匀并将试管放在冰上。

向该悬浮液中加入 400 微升银纳米颗粒，使最终纳米颗粒浓度达到 1 毫摩尔。充分混合悬浮液。胶原酶注射一周后，将KOA小鼠从笼子中取出。

在注射银纳米颗粒之前，如前所述麻醉和手术制备小鼠。使用剪刀依次暴露皮肤、皮下组织和膝关节韧带。然后，使用一毫升胰岛素注射器的针头，以15度角进入关节腔，缓慢注射20微升银纳米颗粒胶原蛋白混合物。

在注射过程中，膝关节会肿胀，确保药物注射成功。如前所述缝合和消毒手术部位后，一旦麻醉消失，将小鼠放入单独通风的笼子中。对安乐死小鼠的四肢进行手术绝育和解剖。

摘取膝关节，包括股骨和胫骨，并去除肌肉组织。收集膝关节组织，包括股骨和胫骨以及周围的软韧带。将胶囊放入 10%福尔马林中用于保存和固定。

将组织固定过夜后，将切片嵌入石蜡中。使用切片机，将包埋的组织切成0.4微厚的切片。对组织进行不同的染色技术。

KOA小鼠的平均体重明显低于对照组。与KOA小鼠相比，2型胶原酶和银纳米颗粒组小鼠的平均体重更高。HE染色显示KOA组小鼠滑膜厚度明显高于对照组。

与KOA组相比，用纳米颗粒处理的组的滑膜厚度减小。在KOA组中观察到滑膜的血管增生，并且在纳米颗粒处理组中发现显着减少。Safranin-O染色显示KOA小鼠的软骨基质被破坏，而用纳米颗粒胶原蛋白混合物处理的小鼠显示出明显更好的软骨基质。

相对于对照组，胶原II处理组的形态学特征评分更高。免疫组织化学染色表明，与KOA组相比，纳米颗粒处理的小鼠滑膜区域的中性粒细胞浸润减少。在注射II型胶原酶和几种纳米颗粒时避免药物阻塞是很重要的。

几种纳米颗粒的治疗效果可以尝试在前交叉韧带损伤的动物模型上。