所描述的方案最大限度地减少了泥蟹眼柄消融过程中的压力,从而降低了由于眼柄消融而导致的死亡率。时间效率是减少动物压力的关键。在执行该过程之前,请确保一切准备就绪。
首先用氯化自来水清洗健康、活跃和早产的雌性泥蟹,以去除任何碎屑和寄生虫。将螃蟹浸泡在甲醛中30分钟。确保在甲醛处理过程中使用空气结石进行连续温和的曝气。
接下来,用流动的海水清洗螃蟹,去除残留的甲醛。要对蟹眼柄进行烧灼,首先用喷灯加热金属棒的尖端,直到杆呈鲜红色。用湿棉巾盖住麻醉的螃蟹,并用消毒的镊子握住螃蟹的一只眼睛。
将红色的热金属尖端按在螃蟹的眼睛上约 10 到 15 秒,直到眼柄变成橙色或红橙色。用70%乙醇消毒镊子,并用无菌薄纸清洁,以确保螃蟹之间没有交叉污染。对所有螃蟹进行消融后,将金属棒浸入自来水中。
要进行手术消融,请使用厚棉手套握住麻醉的螃蟹,并用湿棉毛巾盖住它。用无菌镊子握住螃蟹的一只眼睛,并用手术剪刀迅速剪断眼柄。手术后,准备一个带有千分之20过滤海水的头顶水箱,并连续曝气。
将柔性管道与水箱连接,以实现重力水流。将螃蟹放入篮子中,使其承受来自头顶水箱的流动海水。在流动的海水下监测螃蟹,直到它可以自发移动。
将螃蟹单独放入另一个有海水的水族箱中30分钟,以便进一步观察。随机选择未接受眼柄消融术的新成熟雌性。去除顶部甲壳和肝胰腺后,观察并确定蟹卵巢的成熟阶段。
卵巢成熟阶段可以根据其颜色进行识别,未成熟阶段一为半透明或乳白色,早熟阶段二为浅黄色,预成熟阶段三为黄色至浅橙色,完全成熟阶段四为深橙色至红色。相对于未消融的雌性,眼柄消融的雌性性腺成熟率更高。在眼柄消融的雌蟹中发现的三期卵巢百分比最高。
单因素方差分析显示,实验雌蟹卵巢成熟阶段间差异显著。对照组未成熟雌蟹的患病率高于消融组。只有消融组能够在处理后30天从未成熟阶段产生第四期雌蟹。
重要的是要确保泥蟹的眼柄在烧灼或手术技术后已完全消融。眼柄消融使甲壳类动物养殖者能够容易地诱导卵巢成熟和蜕皮。它还允许研究人员进一步研究眼柄在调节泥蟹繁殖中的作用。