マッドクラブの卵巣成熟を促進するためのアイトークアブレーション

記載されたプロトコルは、マッドクラブの眼球アブレーション中のストレスを最小限に抑え、それによって眼球アブレーションによる死亡率の発生を減少させる。時間効率は、動物へのストレスを最小限に抑えるための鍵です。手順を実行する前に、すべてが準備されていることを確認してください。

健康で活動的で時期尚早のメスのマッドクラブを塩素系水道水で洗い、破片や寄生虫を取り除くことから始めます。カニをホルムアルデヒドに30分間浸します。ホルムアルデヒド処理中は、エアストーンで継続的かつ穏やかな通気を確保してください。

次に、流れる海水を使ってカニを洗い、残留ホルムアルデヒドを取り除きます。カニの目茎の焼灼を行うには、棒が真っ赤になるまでトーチで金属棒の先端を加熱することから始めます。麻酔をかけたカニを濡れた綿タオルで覆い、滅菌した鉗子でカニの片目をかざします。

赤い熱い金属の先端をカニの目に約10〜15秒間押し付け、目茎がオレンジ色または赤みがかったオレンジ色に変わります。鉗子を70%エタノールで消毒し、滅菌ティッシュペーパーで洗浄して、カニ間の相互汚染がないことを確認します。すべてのカニにアブレーションを行った後、金属棒を水道水に浸します。

外科的アブレーションを行うには、厚い綿の手袋を使用して麻酔をかけたカニを持ち、濡れた綿タオルで覆います。滅菌鉗子を使用してカニの片目を保持し、外科用ハサミで眼球をすばやく切ります。手術後、連続通気でろ過された海水を2000分の100で表彰するオーバーヘッドタンクを準備します。

重力水流のためにフレキシブルパイプをタンクに接続します。カニをバスケットに入れ、頭上のタンクから流れる海水にさらします。カニが自発的に動くことができるまで、流れる海水の下でカニを監視します。

さらに観察するために、カニを海水の入った別の水槽に30分間個別に置きます。眼球アブレーションを受けていない新しく成熟した女性をランダムに選択します。上部の甲羅と肝膵臓を取り除いた後、カニの卵巣の成熟段階を観察して特定します。

卵巣の成熟段階は、その色に基づいて識別でき、未成熟の段階1は半透明またはクリーム色の白、初期の成熟段階2は淡黄色から淡黄色、未成熟段階3は黄色から淡橙色、完全に成熟した段階4は濃いオレンジ色から赤みがかった色です。生殖腺成熟率は,切除しなかった雌に比べて眼茎切除雌の方が高かった。ステージ3の卵巣の割合が最も高いのは、眼茎切除された雌のカニでした。

一元配置分散分析では、実験的な雌のカニの卵巣成熟段階の間に有意差が見られました。対照群は、切除群と比較して未熟な雌のカニの有病率が高かった。切除されたグループのみが、治療後30日で未熟な段階からステージ4の雌カニを生産することができました。

マッドクラブの目茎が焼灼または手術技術のいずれかの後に完全に切除されていることを確認することが重要です。アイトークアブレーションにより、甲殻類農家は卵巣の成熟と脱皮を容易に誘発することができます。また、研究者はマッドクラブの繁殖を調節する上でのアイトークの役割をさらに調査することができます。