El protocolo descrito minimiza el estrés durante la ablación ocular de los cangrejos de fango, reduciendo así la aparición de mortalidad debido a la ablación del tallo ocular. La eficiencia del tiempo es la clave para minimizar el estrés de los animales. Asegúrese de que todo esté preparado antes de realizar el procedimiento.
Comience lavando los cangrejos de fango hembras saludables, activos y prematuros con agua del grifo clorada para eliminar cualquier residuo y parásito. Remoje los cangrejos en formaldehído durante 30 minutos. Asegurar la aireación continua y suave con piedras de aire durante el tratamiento con formaldehído.
A continuación, use agua de mar que fluye para lavar los cangrejos para eliminar cualquier formaldehído residual. Para realizar la cauterización del tallo ocular del cangrejo, comience calentando la punta de una varilla de metal con un soplete hasta que la varilla esté de color rojo brillante. Cubra un cangrejo anestesiado con una toalla de algodón húmeda y sostenga un ojo del cangrejo con fórceps esterilizados.
Presione la punta de metal rojo caliente sobre el ojo del cangrejo durante unos 10 a 15 segundos hasta que el tallo ocular se vuelva de color naranja o naranja rojizo. Desinfecte las pinzas con etanol al 70% y límpielas con papel de seda estéril para garantizar que no haya contaminación cruzada entre cangrejos. Después de realizar la ablación en todos los cangrejos, sumerja la varilla de metal en agua del grifo.
Para realizar la ablación quirúrgica, sostenga el cangrejo anestesiado con guantes gruesos de algodón y cúbralo con una toalla de algodón húmeda. Use fórceps estériles para sostener un ojo del cangrejo y corte rápidamente el tallo ocular con tijeras quirúrgicas. Después de la cirugía, prepare un tanque superior con agua de mar filtrada de 20 partes por mil con aireación continua.
Conecte una tubería flexible con el tanque para el flujo de agua gravitacional. Coloque el cangrejo en una canasta y sométalo al agua de mar que fluye desde el tanque superior. Controle el cangrejo bajo el agua de mar que fluye hasta que pueda moverse espontáneamente.
Coloque los cangrejos individualmente en otro acuario con agua de mar durante 30 minutos para una mayor observación. Seleccione al azar hembras recién maduras que no se hayan sometido a ablación ocular. Después de retirar el caparazón superior y el hepatopáncreas, observe e identifique la etapa de maduración del ovario de cangrejo.
Las etapas de maduración ovárica se pueden identificar en función de su coloración, siendo la etapa inmadura uno translúcida o blanca cremosa, la etapa de maduración temprana dos siendo de color amarillo pálido a amarillo claro, la etapa de premaduración tres siendo amarilla a naranja claro, y la etapa cuatro completamente madura siendo de color naranja oscuro a rojizo. La tasa de maduración de las gónadas fue mayor en las hembras ablacionadas con tallo ocular en relación con las que no fueron ablacionadas. El mayor porcentaje de ovarios en etapa tres se encontró en cangrejos hembra ablacionados por el tallo ocular.
El análisis unidireccional de la varianza mostró diferencias significativas entre las etapas experimentales de maduración ovárica de los cangrejos hembra. El grupo de control tuvo una mayor prevalencia de cangrejos hembras inmaduras en relación con los grupos ablacionados. Solo los grupos ablacionados pudieron producir cangrejos hembras en etapa cuatro desde una etapa inmadura 30 días después del tratamiento.
Es importante asegurarse de que el tallo ocular del cangrejo de fango se haya ablacionado completamente después de la cauterización o la técnica quirúrgica. La ablación del tallo ocular permite a los criadores de crustáceos inducir la maduración ovárica y la muda fácilmente. También permite a los investigadores investigar más a fondo el papel del tallo ocular en la regulación de la reproducción del cangrejo de fango.
