Tarif edilen protokol, çamur yengeçlerinin göz konuşması ablasyonu sırasında stresi en aza indirir, böylece göz konuşması ablasyonuna bağlı ölüm oluşumunu azaltır. Zaman verimliliği, hayvanlar üzerindeki stresi en aza indirmenin anahtarıdır. İşlemi gerçekleştirmeden önce her şeyin hazırlandığından emin olun.
Herhangi bir enkaz ve paraziti gidermek için sağlıklı, aktif ve prematüre dişi çamur yengeçlerini klorlu musluk suyuyla yıkayarak başlayın. Yengeçleri formaldehitte 30 dakika bekletin. Formaldehit işlemi sırasında hava taşlarıyla sürekli ve nazik havalandırma sağlayın.
Daha sonra, kalan formaldehitleri gidermek için yengeçleri yıkamak için akan deniz suyunu kullanın. Yengeç gözlerinin koterizasyonunu gerçekleştirmek için, çubuk parlak kırmızı olana kadar metal bir çubuğun ucunu bir üfleme meşalesi ile ısıtarak başlayın. Anestezi uygulanmış bir yengeci ıslak pamuklu bir havluyla örtün ve yengecin bir gözünü sterilize forsepsle tutun.
Kırmızı sıcak metal ucu, göz konuşması turuncu veya kırmızımsı turuncu bir renge dönene kadar yengeç gözüne yaklaşık 10 ila 15 saniye boyunca bastırın. Forsepsleri %70 etanol ile dezenfekte edin ve yengeçler arasında çapraz kontaminasyon olmaması için steril doku kağıdı ile temizleyin. Tüm yengeçlerde ablasyon yaptıktan sonra, metal çubuğu musluk suyuna batırın.
Cerrahi ablasyon yapmak için, anestezi uygulanan yengeci kalın pamuklu eldivenler kullanarak tutun ve ıslak pamuklu bir havluyla örtün. Yengecin bir gözünü tutmak için steril forseps kullanın ve göz konuşmasını cerrahi makasla hızla kesin. Ameliyat sonrası, sürekli havalandırma ile binde 20 parça filtrelenmiş deniz suyu içeren bir havai tank hazırlayın.
Yerçekimi suyu akışı için tanka esnek bir boru bağlayın. Yengeci bir sepete yerleştirin ve baş üstü tanktan akan deniz suyuna maruz bırakın. Yengeci akan deniz suyu altında kendiliğinden hareket edene kadar izleyin.
Daha fazla gözlem için yengeçleri ayrı ayrı 30 dakika boyunca deniz suyuyla başka bir akvaryuma yerleştirin. Göz konuşması ablasyonu geçirmemiş yeni olgun kadınları rastgele seçin. Üst kabuk ve hepatopankreası çıkardıktan sonra, yengeç yumurtalıklarının olgunlaşma aşamasını gözlemleyin ve tanımlayın.
Yumurtalık olgunlaşma aşamaları, olgunlaşmamış aşama birincisi yarı saydam veya kremsi beyaz, erken olgunlaşma aşaması iki soluk ila açık sarı, olgunlaşma öncesi aşama üç sarıdan açık turuncuya ve tamamen olgun aşama dördüncüsü koyu turuncu ila kırmızımsı renkte olmak üzere renklenmelerine göre tanımlanabilir. Gonad olgunlaşma oranı, göz sapı ablatlı kadınlarda, ablat olmayanlara göre daha yüksekti. Üçüncü aşama yumurtalıkların en yüksek yüzdesi göz sapı ablatlı dişi yengeçlerde bulundu.
Varyansın tek yönlü analizi, deneysel dişi yengeçlerin yumurtalık olgunlaşma aşamaları arasında önemli farklılıklar göstermiştir. Kontrol grubu, ablated gruplara göre olgunlaşmamış dişi yengeç prevalansına sahipti. Sadece ablated gruplar, tedaviden 30 gün sonra olgunlaşmamış bir aşamadan dördüncü aşama dişi yengeçler üretebildiler.
Çamur yengecinin göz konuşmasının koterizasyon veya cerrahi tekniği takiben tamamen ablatlandığından emin olmak önemlidir. Göz sapı ablasyonu, kabuklu çiftçilerin yumurtalık olgunlaşmasını ve kolayca erimesini sağlar. Ayrıca, araştırmacıların çamur yengeç üremesini düzenlemede göz konuşmasının rolünü daha fazla araştırmalarına olanak tanır.
