Le protocole décrit minimise le stress lors de l’ablation oculaire des crabes de boue, réduisant ainsi l’occurrence de la mortalité due à l’ablation de la tige oculaire. L’efficacité du temps est la clé pour minimiser le stress des animaux. Assurez-vous que tout est préparé avant d’effectuer la procédure.
Commencez par laver les crabes de vase femelles en bonne santé, actives et prématurées avec de l’eau du robinet chlorée pour éliminer les débris et les parasites. Faire tremper les crabes dans du formaldéhyde pendant 30 minutes. Assurer une aération continue et douce avec des pierres d’air pendant le traitement au formaldéhyde.
Ensuite, utilisez de l’eau de mer courante pour laver les crabes afin d’éliminer tout formaldéhyde résiduel. Pour effectuer la cautérisation de la tige oculaire du crabe, commencez par chauffer la pointe d’une tige métallique avec un chalumeau jusqu’à ce que la tige soit rouge vif. Couvrez un crabe anesthésié avec une serviette en coton humide et tenez un œil du crabe avec une pince stérilisée.
Appuyez sur la pointe en métal rouge chaud sur l’œil du crabe pendant environ 10 à 15 secondes jusqu’à ce que le pédoncule de couleur orange ou orange rougeâtre. Désinfectez les pinces avec de l’éthanol à 70 % et nettoyez-les avec du papier de soie stérile pour éviter toute contamination croisée entre les crabes. Après avoir effectué l’ablation sur tous les crabes, trempez la tige métallique dans l’eau du robinet.
Pour effectuer une ablation chirurgicale, tenez le crabe anesthésié à l’aide de gants de coton épais et couvrez-le d’une serviette en coton humide. Utilisez des pinces stériles pour tenir un œil du crabe et coupez rapidement le pédoncule oculaire avec des ciseaux chirurgicaux. Après la chirurgie, préparez un réservoir aérien avec 20 parties par millier d’eau de mer filtrée avec une aération continue.
Connectez un tuyau flexible avec le réservoir pour l’écoulement gravitationnel de l’eau. Placez le crabe dans un panier et soumettez-le à l’eau de mer qui coule du réservoir supérieur. Surveillez le crabe sous l’eau de mer qui coule jusqu’à ce qu’il puisse se déplacer spontanément.
Placez les crabes individuellement dans un autre aquarium avec de l’eau de mer pendant 30 minutes pour une observation plus approfondie. Choisir au hasard les femelles nouvellement matures qui n’ont pas subi d’ablation du pédoncule oculaire. Après avoir enlevé la carapace supérieure et l’hépatopancréas, observer et identifier le stade de maturation de l’ovaire du crabe.
Les stades de maturation ovarienne peuvent être identifiés en fonction de leur coloration, le premier stade immature étant translucide ou blanc crème, le stade deux précoce étant jaune à jaune clair, le stade trois pré-maturation étant jaune à orange clair et le stade quatre complètement mature étant de couleur orange foncé à rougeâtre. Le taux de maturation des gonades était plus élevé chez les femelles ablées par la tige oculaire que chez celles qui n’avaient pas été ablées. Le pourcentage le plus élevé d’ovaires de stade trois a été trouvé chez les crabes femelles ablés de la tige oculaire.
L’analyse unidirectionnelle de la variance a montré des différences significatives entre les stades expérimentaux de maturation ovarienne des crabes femelles. Le groupe témoin avait une prévalence plus élevée de crabes femelles immatures par rapport aux groupes ablés. Seuls les groupes ablés ont été en mesure de produire des crabes femelles de stade quatre à partir d’un stade immature 30 jours après le traitement.
Il est important de s’assurer que le pédoncule oculaire du crabe de vase a été complètement enlevé à la suite d’une cautérisation ou d’une technique chirurgicale. L’ablation oculaire permet aux producteurs de crustacés d’induire facilement la maturation ovarienne et la mue. Il permet également aux chercheurs d’étudier plus en détail le rôle de la tige oculaire dans la régulation de la reproduction du crabe de vase.
