הפרוטוקול המתואר ממזער את הלחץ במהלך אבלציה של סרטני בוץ, ובכך מפחית את התרחשות התמותה כתוצאה מאבלציה של דיבור עיניים. יעילות בזמן היא המפתח למזעור הלחץ לבעלי החיים. ודא שהכל מוכן לפני ביצוע ההליך.
התחילו בשטיפת סרטני הבוץ הבריאים, הפעילים והפגים במי ברז עם כלור כדי להסיר פסולת וטפילים. משרים את הסרטנים בפורמלדהיד למשך 30 דקות. יש להקפיד על אוורור רציף ועדין עם אבני אוויר במהלך הטיפול בפורמלדהיד.
לאחר מכן, השתמשו במי ים זורמים כדי לשטוף את הסרטנים כדי להסיר שאריות פורמלדהיד. כדי לבצע צריבה של עיני הסרטן, התחל על ידי חימום קצה של מוט מתכת עם blowtorch עד המוט הוא אדום בוהק. מכסים סרטן מורדם במגבת כותנה רטובה ומחזיקים עין אחת של הסרטן במלקחיים מעוקרים.
לחצו על קצה המתכת האדום והחם על עין הסרטן למשך כ-10 עד 15 שניות עד שצבע העיניים יהפוך לכתום או כתום אדמדם. יש לחטא את המלקחיים באתנול 70% ולנקות אותם בנייר טישו סטרילי כדי להבטיח שאין זיהום צולב בין סרטנים. לאחר ביצוע אבלציה על כל הסרטנים, טובלים את מוט המתכת במי ברז.
לביצוע אבלציה כירורגית, החזיקו את הסרטן המורדם באמצעות כפפות כותנה עבות וכסו אותו במגבת כותנה רטובה. השתמשו במלקחיים סטריליים כדי להחזיק עין אחת של הסרטן וגזרו במהירות את העיניים עם מספריים כירורגיים. לאחר הניתוח, להכין מיכל תקורה עם 20 חלקים לאלף מי ים מסוננים עם אוורור רציף.
חבר צינור גמיש עם המיכל לזרימת מים כבידתית. הכניסו את הסרטן לסלסלה וחשפו אותו למי ים זורמים מהמיכל שמעליו. עקבו אחר הסרטן תחת מי ים זורמים עד שהוא יכול לנוע באופן ספונטני.
הניחו את הסרטנים בנפרד באקווריום אחר עם מי ים למשך 30 דקות לתצפית נוספת. בחר באופן אקראי נקבות בוגרות חדשות שלא עברו אבלציה של דיבור עיניים. לאחר הסרת השריון העליון ואת hepatopancreas, להתבונן ולזהות את שלב ההתבגרות של השחלה סרטנים.
ניתן לזהות את שלבי ההבשלה של השחלות על פי צבען, כאשר השלב הראשון הלא בוגר הוא לבן שקוף או שמנת, שלב ההבשלה המוקדמת השני הוא חיוור עד צהוב בהיר, שלב שלוש לפני ההבשלה הוא צהוב עד כתום בהיר, והשלב הרביעי הבוגר לחלוטין הוא בצבע כתום כהה עד אדמדם. שיעור ההבשלה של הגונד היה גבוה יותר אצל הנקבות בעלות ה-ablated בעיניים בהשוואה לאלו שלא היו ablated. האחוז הגבוה ביותר של שחלות שלב שלוש נמצא אצל נקבות סרטנים עם דיבור עיניים.
ניתוח חד-כיווני של השונות הראה הבדלים משמעותיים בין שלבי ההבשלה השחלתיים של נקבות הסרטנים הניסיוניות. בקבוצת הביקורת הייתה שכיחות גבוהה יותר של נקבות סרטנים לא בוגרות ביחס לקבוצות האבלטיות. רק הקבוצות שעברו אבלאט הצליחו לייצר נקבות סרטנים בשלב ארבע משלב לא בוגר 30 יום לאחר הטיפול.
חשוב לוודא כי העיניים של סרטן הבוץ כבר ablated מלא לאחר צריבה או טכניקת ניתוח. אבלציה של Eyestalk מאפשרת לחקלאים סרטנים לגרום להבשלת השחלות ולהתכה בקלות. זה גם מאפשר לחוקרים לחקור עוד יותר את התפקיד של דיבור העיניים בוויסות רבייה של סרטני בוץ.