O protocolo descrito minimiza o estresse durante a ablação do pedúnculo ocular de caranguejos da lama, reduzindo a ocorrência de mortalidade por ablação do pedúnculo ocular. A eficiência do tempo é a chave para minimizar o estresse dos animais. Certifique-se de que tudo está preparado antes de realizar o procedimento.
Comece lavando os caranguejos fêmeas saudáveis, ativos e prematuros com água da torneira clorada para remover quaisquer detritos e parasitas. Mergulhe os caranguejos em formol por 30 minutos. Garantir aeração contínua e suave com pedras de ar durante o tratamento com formaldeído.
Em seguida, use água do mar corrente para lavar os caranguejos para remover qualquer formaldeído residual. Para realizar a cauterização do talo do caranguejo, comece aquecendo a ponta de uma haste de metal com um maçarico até que a haste fique vermelha brilhante. Cubra um caranguejo anestesiado com uma toalha de algodão molhada e segure um olho do caranguejo com pinça esterilizada.
Pressione a ponta de metal quente vermelho no olho do caranguejo por cerca de 10 a 15 segundos até que o olho fique com uma cor laranja ou laranja avermelhada. Desinfete as pinças com etanol 70% e limpe-as com papel higiênico estéril para garantir que não haja contaminação cruzada entre caranguejos. Depois de realizar a ablação em todos os caranguejos, mergulhe a haste de metal na água da torneira.
Para realizar a ablação cirúrgica, segure o caranguejo anestesiado usando luvas grossas de algodão e cubra-o com uma toalha de algodão molhada. Use pinças estéreis para segurar um olho do caranguejo e corte rapidamente o talo ocular com tesoura cirúrgica. No pós-operatório, prepare um tanque aéreo com 20 partes por mil de água do mar filtrada com aeração contínua.
Conecte um tubo flexível com o tanque para fluxo de água gravitacional. Coloque o caranguejo em uma cesta e submeta-o à água do mar fluindo do tanque superior. Monitore o caranguejo sob a água do mar até que ele possa se mover espontaneamente.
Coloque os caranguejos individualmente em outro aquário com água do mar por 30 minutos para observação posterior. Selecionar aleatoriamente fêmeas recém-maduras que não tenham sido submetidas à ablação do pedúnculo ocular. Após a remoção da carapaça superior e do hepatopâncreas, observar e identificar o estágio de maturação do ovário do caranguejo.
Os estágios de maturação ovariana podem ser identificados com base em sua coloração, sendo o estágio imaturo um branco translúcido ou cremoso, o estágio inicial de maturação dois sendo pálido a amarelo claro, o estágio pré-maturado três sendo amarelo a laranja claro, e o estágio quatro totalmente maduro sendo de cor laranja escura a avermelhada. A taxa de maturação das gônadas foi maior nas fêmeas com haste ocular em relação às que não foram abladas. A maior porcentagem de ovários em estágio três foi encontrada em caranguejos fêmeas com haste ocular.
A análise de variância one-way mostrou diferenças significativas entre os estágios de maturação ovariana das fêmeas experimentais. O grupo controle apresentou maior prevalência de fêmeas imaturas em relação aos grupos ablados. Apenas os grupos ablados foram capazes de produzir caranguejos fêmeas estágio quatro a partir de um estágio imaturo 30 dias após o tratamento.
É importante garantir que o pedúnculo ocular do caranguejo de lama tenha sido totalmente ablado, após a técnica de cauterização ou cirurgia. A ablação ocular permite que os criadores de crustáceos induzam a maturação e a muda ovariana facilmente. Também permite que os pesquisadores investiguem mais a fundo o papel do pedúnculo ocular na regulação da reprodução do caranguejo da lama.
