Este método tem potencial para ser utilizado como uma nova estratégia clínica na osteoartrite do joelho. Esta técnica é segura, simples para injeções locais, e o tratamento é eficaz na experimentação animal. Nanopartículas de prata podem ser aplicáveis em outras doenças inflamatórias e precisam de mais pesquisas.
É importante, então, ter cuidado ao injetar o tamanho do joelho dos camundongos, garantindo o procedimento correto. Avaliar o preenchimento da mão da articulação do joelho nos joelhos e evitar qualquer vazamento de drogas. Comece colocando um mouse anestesiado em uma mesa cirúrgica.
Tape os membros do mouse e, em seguida, raspe o pelo com uma navalha. Em seguida, desinfete a região raspada três vezes com esfoliantes alternados de iodofórmio a 0,1% e álcool. Com tesoura, faça uma incisão na pele, expondo sequencialmente o tecido subcutâneo e o ligamento infrapatelar.
Com uma seringa de insulina de um mililitro, injete 10 unidades de colagenase tipo dois na cavidade articular. Sutura o tecido subcutâneo e, em seguida, sutura a pele. Agora esterilizar a área suturada com iodofórmio a 0,1%.
Coloque o rato em gaiolas ventiladas individualmente assim que acordar da anestesia. Comece adicionando 400 microlitros de colágeno tipo um a um tubo de microcentrífuga de 1,5 mililitro colocado no gelo. Agora, adicione 200 microlitros de PABX, misture bem e coloque os tubos no gelo.
Adicione 400 microlitros de nanopartículas de prata a esta suspensão, fazendo com que a concentração final de nanopartículas seja de um mili mole. Misture bem a suspensão. Uma semana após a injeção de colagenase, remova os camundongos KOA de suas gaiolas.
Antes de injetar nanopartículas de prata, anestesiar e preparar cirurgicamente o camundongo como demonstrado anteriormente. Use tesoura para expor sequencialmente a pele, o tecido subcutâneo e os ligamentos do joelho. Em seguida, usando a agulha de uma seringa de insulina de um mililitro, entre na cavidade articular em um ângulo de 15 graus e injete lentamente 20 microlitros da mistura de colágeno de nanopartículas de prata.
Durante a injeção, a articulação do joelho inchará, garantindo uma injeção de droga bem-sucedida. Depois de suturar e esterilizar o local cirúrgico como antes, coloque os camundongos em gaiolas ventiladas individualmente assim que a anestesia terminar. Esterilizar cirurgicamente e dissecar os membros do camundongo eutanasiado.
Colher as articulações do joelho, incluindo o fêmur e a tíbia, e remover o tecido muscular. Coletar os tecidos articulares do joelho, incluindo o fêmur e a tíbia e o ligamento mole circundante. Cápsula em formalina a 10% para preservação e fixação.
Após a fixação noturna dos tecidos, embutir os cortes em parafina. Usando um micrótomo, corte os tecidos embutidos em seções de 0,4 micro espessura. Submeter os tecidos a diferentes técnicas de coloração.
O peso corporal médio dos camundongos KOA foi significativamente menor do que o dos camundongos do grupo controle. O peso corporal médio dos camundongos do grupo colagenase tipo dois e nanopartículas de prata foi maior em comparação com os camundongos KOA. A coloração HE mostrou que a espessura sinovial dos camundongos do grupo KOA foi significativamente maior em comparação com o grupo controle.
A espessura sinovial do grupo tratado com nanopartículas foi reduzida em relação ao grupo KOA. A hiperplasia vascular da sinóvia foi observada no grupo KOA e foi significativamente reduzida no grupo tratado com nanopartículas. A coloração com safranina-O revelou uma matriz cartilaginosa destruída em camundongos KOA, enquanto os camundongos tratados com a mistura de colágeno nanoparticulado mostraram uma matriz cartilaginosa significativamente melhor.
Os escores de características morfológicas foram maiores no grupo tratado com colágeno II em relação ao grupo controle. A coloração imunoistoquímica demonstrou menor infiltração neutrofílica nas regiões sinoviais dos camundongos tratados com nanopartículas em comparação com o grupo KOA. É importante evitar o bloqueio do fármaco durante a injeção de colagenase tipo II e várias nanopartículas.
O efeito terapêutico de várias nanopartículas poderia ser tentado em modelos animais de lesão do ligamento cruzado anterior.
