Cette méthode a le potentiel d’être utilisée comme nouvelle stratégie clinique pour l’arthrose du genou. Cette technique est sûre, simple pour les injections locales, et le traitement est efficace en expérimentation animale. Les nanoparticules d’argent pourraient être applicables dans d’autres maladies inflammatoires et cela nécessite des recherches supplémentaires.
Il est donc important d’être prudent lors de l’injection de la taille du genou des souris, en veillant à ce que la procédure soit correcte. Évaluer le remplissage de la main de l’articulation du genou au niveau des genoux et éviter toute fuite de médicament. Commencez par placer une souris anesthésiée sur une table d’opération.
Collez les membres de la souris, puis rasez la fourrure avec un rasoir. Ensuite, désinfectez la région rasée trois fois avec des gommages alternés à 0,1% d’iodoforme et d’alcool. À l’aide de ciseaux, faites une incision sur la peau, exposant séquentiellement le tissu sous-cutané et le ligament infra rotulien.
À l’aide d’une seringue à insuline d’un millilitre, injectez 10 unités de collagénase de type 2 dans la cavité articulaire. Suturez le tissu sous-cutané, puis suturez la peau. Stérilisez maintenant la zone suturée avec 0,1% d’iodoforme.
Placez la souris dans des cages ventilées individuellement une fois qu’elle se réveille de l’anesthésie. Commencez par ajouter 400 microlitres de collagène de type 1 à un microtube à centrifuger de 1,5 millilitre placé sur de la glace. Maintenant, ajoutez 200 microlitres de PBX, mélangez bien et placez les tubes sur de la glace.
Ajoutez 400 microlitres de nanoparticules d’argent à cette suspension, ce qui porte la concentration finale de nanoparticules à un milli mole. Mélangez bien la suspension. Une semaine après l’injection de collagénase, retirez les souris KOA de leurs cages.
Avant d’injecter des nanoparticules d’argent, anesthésier et préparer chirurgicalement la souris comme démontré précédemment. Utilisez des ciseaux pour exposer séquentiellement la peau, le tissu sous-cutané et les ligaments du genou. Ensuite, à l’aide de l’aiguille d’une seringue à insuline d’un millilitre, entrez dans la cavité articulaire à un angle de 15 degrés et injectez lentement 20 microlitres du mélange de collagène à nanoparticules d’argent.
Pendant l’injection, l’articulation du genou va gonfler, assurant une injection de médicament réussie. Après avoir suturé et stérilisé le site chirurgical comme précédemment, placez les souris dans des cages ventilées individuellement une fois que l’anesthésie s’est dissipée. Stériliser chirurgicalement et disséquer les membres de la souris euthanasiée.
Prélevez les articulations du genou, y compris le fémur et le tibia, et retirez le tissu musculaire. Prélevez les tissus articulaires du genou, y compris le fémur et le tibia et le ligament mou environnant. Encapsuler dans du formol à 10% pour la conservation et la fixation.
Après la fixation des tissus pendant la nuit, enrobez les sections dans de la paraffine. À l’aide d’un microtome, coupez les tissus incrustés en sections de 0,4 micro d’épaisseur. Soumettez les tissus à différentes techniques de coloration.
Le poids corporel moyen des souris KOA était significativement inférieur à celui des souris du groupe témoin. Le poids corporel moyen des souris du groupe des nanoparticules de collagénase et d’argent de type deux était plus élevé que celui des souris KOA. La coloration HE a montré que l’épaisseur synoviale des souris du groupe KOA était significativement plus élevée que celle du groupe témoin.
L’épaisseur synoviale du groupe traité avec des nanoparticules a été réduite par rapport au groupe KOA. L’hyperplasie vasculaire de la synoviale a été observée dans le groupe KOA et s’est avérée significativement réduite dans le groupe traité par nanoparticules. La coloration à la safranine-O a révélé une matrice cartilagineuse détruite chez les souris KOA, tandis que les souris traitées avec le mélange de collagène nanoparticulaire ont montré une matrice cartilagineuse significativement meilleure.
Les scores des caractéristiques morphologiques étaient plus élevés dans le groupe traité au collagène II par rapport au groupe témoin. La coloration immunohistochimique a démontré une réduction de l’infiltration des neutrophiles dans les régions synoviales des souris traitées aux nanoparticules par rapport au groupe KOA. Il est important d’éviter le blocage du médicament lors de l’injection de collagénase de type II et de plusieurs nanoparticules.
L’effet thérapeutique de plusieurs nanoparticules pourrait être tenté sur des modèles animaux de lésions du ligament croisé antérieur.
