Questo metodo ha il potenziale per essere utilizzato come nuova strategia clinica per l'artrosi del ginocchio. Questa tecnica è sicura, semplice per le iniezioni locali e il trattamento è efficace nella sperimentazione animale. Le nanoparticelle d'argento potrebbero essere applicabili in altre malattie infiammatorie e necessitano di ulteriori ricerche.
È importante quindi fare attenzione quando si iniettano le dimensioni del ginocchio dei topi, garantendo la procedura corretta. Valutare il riempimento della mano dell'articolazione del ginocchio alle ginocchia ed evitare qualsiasi perdita di farmaco. Inizia posizionando un topo anestetizzato su un tavolo operatorio.
Fissa gli arti del topo con del nastro adesivo, quindi radi il pelo con un rasoio. Successivamente, disinfettare la regione rasata tre volte con scrub alternati allo 0,1% di iodoformio e alcool. Usando le forbici, praticare un'incisione sulla pelle, esponendo in sequenza il tessuto sottocutaneo e il legamento infrarotuleo.
Con una siringa da insulina da un millilitro, iniettare 10 unità di collagenasi di tipo due nella cavità articolare. Suturare il tessuto sottocutaneo, quindi suturare la pelle. Ora sterilizzare l'area suturata con lo 0,1% di iodoformio.
Metti il topo in gabbie ventilate individualmente una volta che si è svegliato dall'anestesia. Inizia aggiungendo 400 microlitri di collagene di tipo uno a una provetta da micro centrifuga da 1,5 millilitri posta sul ghiaccio. A questo punto, aggiungere 200 microlitri di PBX, mescolare bene e posizionare le provette sul ghiaccio.
Aggiungi 400 microlitri di nanoparticelle d'argento a questa sospensione, portando la concentrazione finale di nanoparticelle a un milli mole. Mescolare bene la sospensione. Una settimana dopo l'iniezione di collagenasi, rimuovere i topi KOA dalle loro gabbie.
Prima di iniettare nanoparticelle d'argento, anestetizzare e preparare chirurgicamente il topo come precedentemente dimostrato. Usa le forbici per esporre in sequenza la pelle, il tessuto sottocutaneo e i legamenti del ginocchio. Quindi, usando l'ago di una siringa da insulina da un millilitro, entrare nella cavità articolare con un angolo di 15 gradi e iniettare lentamente 20 microlitri della miscela di collagene di nanoparticelle d'argento.
Durante l'iniezione, l'articolazione del ginocchio si gonfia, garantendo il successo dell'iniezione del farmaco. Dopo aver suturato e sterilizzato il sito chirurgico come in precedenza, posizionare i topi in gabbie ventilate singolarmente una volta che l'anestesia svanisce. Sterilizzare chirurgicamente e sezionare gli arti del topo sottoposto a eutanasia.
Prelevare le articolazioni del ginocchio, compresi il femore e la tibia, e rimuovere il tessuto muscolare. Raccogli i tessuti dell'articolazione del ginocchio, inclusi il femore e la tibia e il legamento molle circostante. Incapsula in formalina al 10% per la conservazione e il fissaggio.
Dopo la fissazione notturna dei tessuti, incorporare le sezioni in paraffina. Usando un microtomo, tagliare i tessuti incorporati in sezioni spesse 0,4 micro. Sottoporre i tessuti a diverse tecniche di colorazione.
Il peso corporeo medio dei topi KOA era significativamente inferiore a quello dei topi del gruppo di controllo. Il peso corporeo medio dei topi nel gruppo della collagenasi di tipo due e delle nanoparticelle d'argento era più alto rispetto ai topi KOA. La colorazione HE ha mostrato che lo spessore sinoviale dei topi nel gruppo KOA era significativamente più alto rispetto al gruppo di controllo.
Lo spessore sinoviale del gruppo trattato con nanoparticelle è risultato ridotto rispetto al gruppo KOA. L'iperplasia vascolare della sinovia è stata osservata nel gruppo KOA ed è risultata significativamente ridotta nel gruppo trattato con nanoparticelle. La colorazione Safranina-O ha rivelato una matrice cartilaginea distrutta nei topi KOA, mentre i topi trattati con la miscela di collagene di nanoparticelle hanno mostrato una matrice cartilaginea significativamente migliore.
I punteggi delle caratteristiche morfologiche erano più alti nel gruppo trattato con collagene II rispetto al gruppo di controllo. La colorazione immunoistochimica ha dimostrato una ridotta infiltrazione di neutrofili nelle regioni sinoviali dei topi trattati con nanoparticelle rispetto al gruppo KOA. È importante evitare il blocco del farmaco durante l'iniezione di collagenasi di tipo II e di diverse nanoparticelle.
L'effetto terapeutico di diverse nanoparticelle potrebbe essere tentato su modelli animali di lesione del legamento crociato anteriore.
